胃肠癌患者外周血组织特异性mRNA的检测及其临床意义

胃肠癌患者外周血组织特异性mRNA的检测及其临床意义

周勇童仕伦

（1.武汉大学人民医院胃肠外科湖北武汉430060；2.武汉大学人民医院胃肠外科湖北武汉430060）

【摘要】目的：胃肠癌患者外周血组织特异性mRNA的检测及其临床意义。方法：选取800例胃肠癌患者作为试验组，同期正常健康人800例作为对照，分别于手术前和手术后一周内取外周血。结果：正常人群组织特异性mRNA阳性率显著低于胃肠癌患者，病理分期A期组织特异性mRNA阳性率显著低于病理分期C期、D期，差异有统计学意义（P<0.05）。结论：胃肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的阳性表达同肿瘤的分期有关,可作为胃肠癌微转移的一个诊断监测指标。

【关键词】RNA；逆转录-聚合酶链反应；后；肿瘤转移.

【中图分类号】R392.11【文献标识码】A【文章编号】1004-6194（2015）02-0278-02

【Abstract】Objective:todetecttheclinicalsignificanceofspecificmRNAinperipheralbloodofpatientswithgastriccarcinoma.Methods:800casesofgastriccancerpatientsastheexperimentalgroup,800casesofnormalhealthypeopleasthecontrol,respectively,beforesurgeryandaftersurgerywithinaweektotakeblood.Results:thenormalhumantissuespecificmRNApositiveratewassignificantlylowerthanthatofpatientswithgastriccancer,pathologicalstagingatissuespecificmRNApositiveratewassignificantlylowerthanthatofthepathologicalstagingofstageCandDstage,thedifferencewasstatisticallysignificant(P<0.05).ConclusionthepositiveexpressionofspecificmRNAinperipheralbloodofpatientswithgastriccarcinomaisrelatedtothestagingoftumor,whichcanbeusedasadiagnosticindicatorforthediagnosisofgastrointestinalcancer.

【Keywords】RNA,reversetranscriptionpolymerasechainreaction,tumormetastasis.

早期诊断监测肿瘤有无转移对临床诊断、治疗及预后判断具有重要意义。目前国内同时联合三个基因对外周血循环癌细胞进行检测胃肠癌的报道相对较少。本研究应用RT-PCR技术检测1600例胃肠癌疾病患者与正常健康人群外周血中目前关于外周血组织特异性mRNA检查在胃癌中的研究尚,并探讨其临床意义。

1资料与方法

1.1研究对象研究人员在医院肿瘤科收集2013年1月～2015年5月就诊患者资料，经执业医师确诊的800例胃肠癌患者分别于手术前和手术后一周内取外周血,其中结肠癌300例,直肠癌250例,胃癌250例所有患者均经病理证实，均经告知后签署知情同意书参加本次作为治疗组800例其中男性420例，女性380例年龄（39-70）岁，平均年龄为（62±8.38）岁BMI（26.4±2.5)；在我院体检中心选取未患有胃肠癌疾病的健康人群作为对照组800人，男性320例，女性480例，年龄范围（40-72）岁，平均年龄（62.5±7.57）BMI（26±2.3）岁。两组患者经统计学分析年龄、性别、病程、体质指数等因素均可去除这些混杂因素影响，均无统计学意义（P>0.05)。

1.2主要试剂试剂：TRIzolReagent上海恪敏生物科技有限公司。逆转录酶：PCR扩增仪美国应用生物系统公司（上海）9700型；数字凝胶紫外成像仪（南京顺泰科技有限公司）。

1.3研究方法

嘱研究对象均空腹抽取外周静脉血5mL,加入肝素抗凝。2h内经密度梯度离心法分离有核细胞,置-85e保存留作总RNA制备。提取外周血有核细胞置于去RNAase的匀浆器中,加入RNAzol1.0mL,置冰水浴中匀浆2min,提取外周血有核细胞总RAN,最后加入三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液(10mmol/L,pH8.0,含EDTA10mmol/L)100LL。取部分RNA于UV-2201型紫外分光光度计上测A260,换算出总RNA浓度。

1.4统计分析运用spss19.0进行数据录入及整理分析。定性资料运用χ2检验；定量资料，以均数±标准差（）表示；按α=0.05的检验水准，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1胃肠癌患者与对照人群外周血中组织特异性mRNA的表达差异见表1

3讨论

本文研究表明，胃肠癌患者与对照人群外周血中组织特异性mRNA的表达差异，正常人群组织特异性mRNA阳性率显著低于胃肠癌患者组组织特异性mRNA阳性率，差异有统计学意义（P<0.05）。提示：胃肠癌患者组织特异性mRNA阳性与正常人群组织特异性mRNA阳性率不同。与表二显示，低分化程度细胞组织特异性mRNA阳性率与中分化细胞组织特异性mRNA阳性率相比，差异无统计学意义（P>0.05）；低分化程度细胞组织特异性mRNA阳性率与高分化细胞组织特异性mRNA阳性率相比，差异无统计学意义（P>0.05）。提示：分化程度与组织特异性mRNA阳性不成正比。表三显示，不同病理分期胃肠癌患者外周血中组织特异性mRNA的表达差异中，病理分期A期组织特异性mRNA阳性率与病理分期B期组织特异性mRNA阳性率相比，差异无统计学意义（P>0.05）；病理分期A期组织特异性mRNA阳性率显著低于病理分期C期组织特异性mRNA阳性率,差异有统计学意义（P<0.05）；病理分期A期组织特异性mRNA阳性率显著低于病理分期D期组织特异性mRNA阳性率，差异有统计意义。

参考文献：

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*通讯作者：

童仕伦