不同甲型流感病毒抗原检测方法的对比分析

不同甲型流感病毒抗原检测方法的对比分析

许毅

（西安航天总医院；710100）

【摘要】目的：对比分析不同甲型流感病毒抗原检测方法。方法：取200例流感样患者的鼻咽部史拭子，分别经胶体金法、免疫渗滤法甲型流感病毒抗原检测试剂盒检测，检测结果对照甲型流感病毒核酸检测结果比较，评价不同检测方法诊断效能。结果：免疫渗滤法的阳性检出率、灵敏度明显高于胶体金法（P＜0.05）。结论：甲型流感病毒抗原的两种检测方法各有优势，胶体金法操作简单方便，可用于大样本筛查检测，免疫渗滤法的灵敏度较高，可用于临床疾病诊断。

【关键词】甲型流感病毒；抗原；胶体金法；免疫渗滤法

[中图分类号]R2[文献标号]A[文章编号]2095-7165（2018）19-0297-02

随着流感疫情频繁发生，人们对流感的关注与认知程度不断加深，该疾病为当前唯一全球性监测疾病，威胁着人们生命健康，尤其是儿童、免疫力低下者与老年人群[1]。当前临床并无特效药物治愈流感，但疾病早期应用对应的抗病毒药物，可缩短病情持续时间，改善患者症状，减少并发症发生[2]。因此，加强病情监测，快速准确诊断疑似病例，对于及早控制病情发展，具有积极的意义。本次研究中，以甲型流感病毒核酸检测结果为标准，对比分析胶体金法、免疫渗滤法检测试剂临床诊断价值，总结如下。

1资料与方法

1.1一般资料

研究对象为2016年1月到2017年5月不明原因的发热且合并呼吸道症状的200例患者，符合体温＞37.5℃。合并以下症状之一：流涕乏力、喉咙痛、咳嗽、关节疼痛、头痛等全身症状，患者获得知情权，签署同意书。

1.2试剂与仪器

甲型流感病毒抗原快速检测试剂分别为甲型流感病毒抗原检测试剂盒（dot-ELISA法）、甲型流感病毒检测试剂盒（胶体金法）。

1.3方法

1.3.1采集样本

鼻咽部拭子插入鼻腔分泌物最多处，并轻轻晃动鼻咽拭子，缓慢向根部推送，直至到鼻甲处，轻轻晃动后，取出鼻咽拭子。

1.3.2免疫渗滤法

采集的鼻咽部拭子插入试剂盒自制保存液中，紧贴管壁，旋转多次，促样本尽快溶解，取200μL待测样本，与400μL裂解液进行混合，之后将混合液加入FLu-A-Ag渗滤装置中，静置10分，观察样本完全渗入后，加200μL酶标试剂，静置待完全渗入后，经洗涤液清洗2次，之后加100μL显色剂，显色2分钟，最后加50μL终止液，3分钟内观察结果。

1.3.3胶体金法甲型流感病毒检测

采集的鼻咽部拭子放于含300μL稀释液的塑料试管内，充分挤压，待鼻腔分泌物完全溶解在稀释液后，取120μL溶解后样本，加入试纸卡加样孔，15分钟后，观察检测结果。

1.4统计学分析

统计软件工具为SPSS20.0。用x2检验对比检测样本，P＜0.05，表示组间存在统计学意义。

2结果

200份鼻咽拭子标本经甲型流感病毒核酸检测，阳性样本检出42例，其中免疫渗滤法检出阳性41例，阳性率为97.6%，胶体金法检出阳性35例，阳性率为83.3%，免疫渗滤法的阳性检出率高于胶体金法（x2=4.97，P＜0.05）。以甲型流感病毒核酸检测结果为标准：免疫渗滤法的敏感度95.2%、特异性为99.4%；胶体金法敏感度为80.9%，特异性为99.4%。具体见表1：

表142例甲型流感阳性样本的两种抗原检测结果（n）

3讨论

流感病毒根据其基质蛋白以及核蛋白抗原性不同，可分为三大类，其中甲型流感病毒具有扩散快、传染控制难度大的特点，是引起禽类、家畜及人类流感流行的主要病毒[3]。人类历史中，假性流感病毒多次引发人类流感大爆发。甲型流感病毒持续传播流行，严重影响人们的健康、正常生活以及社会公共安全，给人们以及社会造成较大的困扰与压力，是当前流行病毒研究的主要对象。甲型流感病毒预防控制关键在于，筛选与确定流感病毒感染者，控制传染源传播，需要提出积极有效的筛查方法，及早确诊疑似病例，稳定病情。

临床主要通过病原检测方法，因该方法耗时短、操作简单方便，不需特殊试验器材、特定的试验场所，而且方便对患者迅速分流，及时隔离疑似患者，早期对症处理治疗[4]。当前临床常用的检测方法为免疫渗滤法、胶体金法，其中免疫渗滤检测，是根据双抗体夹心法对病毒核蛋白抗原进行检测，借助垂直流免疫渗滤装置的浓缩样本，检测灵敏度较高。胶体金法检测方法是以胶体金为标志物，利用特异性抗原抗体反应，定位抗原抗体，并进行定性定量研究，具体方法是于检测试纸上固定病毒核心蛋白单克隆抗体，经免疫层析法检测病毒核蛋白[5]。经研究表明，免疫渗滤法检出阳性率为97.6%，胶体金法检出阳性率为83.3%，以甲型流感病毒核酸检测结果为标准，免疫渗滤法的敏感度95.2%，胶体金法敏感度为80.9%，表明免疫渗滤法检测灵敏度更高。但对比这两种检测方法操作，胶体金法操作更为简单，15min可完成，而免疫渗滤法操作复杂，检测时间相对较长。临床实际应用过程中，胶体金检测方法更适合一些大型需快速检测的场所，而免疫渗滤法检测灵敏度更高，更适合用于医院检测。

综上所述，两种甲型流感病毒检测各有优势，其中免疫渗滤法检测准确率更高，但具体的检测方法选择，应结合具体情况选择，胶体金法检测操作相对简单。

参考文献

[1]刘玉兰,何凤屏,肖芸,等.直接免疫荧光法快速检测甲型流感病毒抗原的临床意义[J].国际检验医学杂志,2016,37(16):2234-2235.

[2]陈晨,范清琪,陈刚,等.流感病毒两种快速抗原检测方法的对比分析[J].中国感染与化疗杂志,2017,17(1):29-32.

[3]刘冬兰,刘铭龙,毕景锐,等.甲型和乙型流感病毒抗原检测新方法[J].热带医学杂志,2017,17(7):851-854.

[4]常晓松,刘东泽,何纬,等.基于荧光免疫层析法建立甲型流感病毒快速检测技术的研究[J].成都医学院学报,2017,12(5):546-550.

[5]戴玉柱,崔大伟,杨先知,等.五重荧光定量RT-PCR法检测甲型流感病毒[J].临床检验杂志,2015,33(9):641-644.