安徽马鞍山地区60株结核分枝杆菌基耐药情况的初步分析

安徽马鞍山地区60株结核分枝杆菌基耐药情况的初步分析

洪颖杨卉朱明

洪颖杨卉朱明

（马鞍山市疾病预防控制中心检验科243000）

【摘要】目的了解马鞍山地区结核分枝杆菌耐药情况，为本地区肺结核的防治提供依据。方法对从临床收集的60例结核菌株进行培养，通过可药敏实验对菌株进行耐药情况分析。结果单耐药菌株为18株，多耐药菌株占15株。单耐药菌株以利福平和异烟肼占多数，分别为15和13株；多耐药菌株以对异烟肼和利福平耐药最多，占32株。结论马鞍山地区结核分支杆菌的耐药率较高。

【关键词】结核杆菌耐药药敏试验

【中图分类号】R517.9【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）24-0054-02

TheinitialanalysisofthedrugresistanceofthemycobacteriumtuberculosisintheMaAnshanareaofAnhuiprovince

HongYing,YangHui,ZhuMing.CenterforDiseaseControlandPreventionofMaAnshanCity(MaAnshan243000,China)

【Abstract】ObjectiveTounderstandthedrugresistanceofmycobacteriumtuberculosisintheHuangshanareaofAnhuiprovince，providingthestrategiesofthepreventionandtreatmentoftuberculosis.Methodssixtycasesofmycobacteriumtuberculosiswerecollectedfromclinical.ThedrugresistanceofMycobacteriumtuberculosiswasanalyzedthroughdrugsensitivitytest.ResultsAlloftheisolatedstrainsweremycobacteriumtubercutosiswhich18ofthemweresingledrugresistanceand15ofweremulti-drugresistantstrains.Thenumbersofthedrugresistancetorifampicinandparaaminosalicylatewere15and13,respectively.ConclusionThedrugresistanceofmycobacteriumtuberculosiswashighinHuangshanarea.

【Keywords】Mycobacteriumtuberculosis;Resistance;Drugsensitivitytest

结核分枝杆菌(mycobacteriumtuberculosis，TB)引起的结核病严重危害人类健康，已经成为一个严重的公共卫生问题。全球约有近1/3的人口感染，且每年死亡人数超过200万病例。发展中国家，人们感染结核分枝杆菌的问题更为严重。随着越来越多的结核分枝杆菌对一线药物耐药，这已经成为人们对结核病控制中的一个难题，也是结核病人复发以及恶化的一个主要原因[1]。

为了了解马鞍山地区结核分支杆菌耐药的情况，本研究对本地区60株结核分枝杆菌进行药敏实验，初步了解该地区结核分枝杆菌的耐药情况，从而为本地区的结核病的防治提供参考依据。

1材料与方法

1.1样本来源60株结核分枝杆菌，从2011-2013年安徽马鞍山地区结核病人痰标本分离获得。其中男性35人，女性20人。

1.2菌株鉴定60株临床分离菌株的菌种采用硝酸苯甲酸培养基（PNB）和噻吩-2-羧酸肼培养基（TCH）进行鉴定，根据其生长情况来区分结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和非结核性分枝杆菌。

1.3接种培养将鉴定后的结核分支杆菌用0.5%吐温-80生理盐水稀释成到10-2mg/ml，取0.1ml接种在培养基斜面上，37℃温箱孵育，培养第4周记录并报告结果。

1.4检测药物与培养基5种药物为：异烟肼(INH)，吡嗪酰胺(PZA)，乙胺丁醇(EMB)，利福平(RFP)和对氨基水杨酸(PAS)。改良罗氏培养基被用来检测待测菌株的药物敏感性[2]。对照组，在不含药培养基培养。所有样品均通过两种不同浓度的含药培养基培养。培养基的药物浓度见参考文献(见表1)，耐药标准：含药培养基菌落数/对照培养基菌落数≥1%为耐药。

表1结核杆菌药敏试验个药物浓度

药品培养基药物浓度(ug/ml)

异烟肼(INH)110

利福平(RFP)50250

乙胺丁酸(EMB)550

对氨基水杨酸(PAS)110

比嗪酰胺(PZA)1.515

1.5主要试剂罗氏培养基由安徽省结防所提供。

1.6统计方法通过Spss10.0进行统计分析，两样本率的比较采用卡方检验。

2结果

2.1菌种鉴定60株临床分离株均为结核分枝杆菌。

2.2药敏情况完全敏感菌株27株（45%），耐药菌株33株（55%），单耐药菌株18株（30%），多耐药菌株15例（25%），性别在敏感菌株、单耐药和多重耐药菌株的分布上无统计学差异（p<0.05）。单耐药菌株中，利福平（25%）和对氨基水杨酸（23.3%）占多数。多耐药菌株中，耐2种、3种、4种耐药所占比例分别为13.33％、8.33％和3.33％。其中，耐异烟肼和利福平耐药的菌株（53.33％），其次为利福平和链霉素（47.37％）（见表2）。

表260株结核分支杆菌多耐药菌株分布表

药物耐药菌株数耐药率(%)

INH+PZA23.33％

INH+RFP11.67％

INH+PAS23.33％

RFP+PZA11.67％

RFP+PAS23.33％

INH+RFP+PZA13.75％

INH+RFP+PAS23.33％

RFP+EMB+PZA23.33％

RFP+EMB+PAS+PZA11.67％

INH+RFP+PZA+PAS13.75％

总计1525％

3讨论

由于结核分枝杆菌耐单药和耐多药的频率越来越高，结核病这个古老的疾病依旧是本世纪最严重的传染病之一。我国的结核病患者高达200万位居全球第二位，并且我国耐药病人人数也很多，高达55.5万。结核病已经阻碍了我国的经济发展，并且高耐药率对我国结核病的防治带来极大挑战[4]。

本次研究表明，马鞍山地区的总耐药率(55%)显著高于国家2000年结核病流病学抽查中的27.8%[3]，且结核病患者耐药情况严重，应予以重视。不同药物的耐药情况存在差异。药敏试验显示：本地区结核杆菌耐五种一线药的耐药率从高到低依次为IHN、RFP、PAS、SM、EMB,以往研究认为，全杀菌的利福平发生耐药的概率较低[4]。然而，本此研究中，利福平的耐药率较高，在临床上已经不能很好的治疗初、复治病人。链霉素因副作用大、耐药者逐渐增多、不方便家庭治疗的肌注方式给药等多种局限，近年来已经逐渐被乙胺丁醇取代。研究表明，乙胺丁醇能有效协同增强其他抗结核药物的效果[5]。其可能的机制为，乙胺丁醇能够破坏结核分枝杆菌的细胞壁，从而有利于其他抗结核药物进入宿主细胞内以及结核分支杆菌内。我们的研究发现，大部分结核病患者对乙胺丁醇均敏感，极少数患者对乙胺丁醇耐药。因此，在治疗过程中，联用乙胺丁醇可以达到较好的效果。

目前，测定结核分支杆菌的耐药性仍然采用绝对浓度法、比例法等经典方法[6]。但结核分支杆菌生长需要6-8周的生长时间，因此很难及时指导临床用药，因为为了减少结核病耐药现象的发生，我们一方面需要找到一种新的、更有效、节约时间的药敏检测方法，其次要加强对结核病患者的管理，全程监督患者的药物治疗情况。如果以上两个方面能够得到落实，我们既可以提高对耐药结核病人的治愈率，又可以防止耐药菌株进一步的扩散药物，从而减少获得性耐药患者。

参考文献

[1]阴灵芳,孙惠平,沈立新.结核分枝杆菌耐药特点分析[J].河北医药,2011,33(2):190-191.

[2]刘志广,张选民,张媛媛,等.结核分枝杆菌西安分离株北京家族基因型检测及其耐药相关性研究.中国人兽共患病学报,2008,24(5):435-438.

[3]全国结核病流行病学抽样调查技术指导组.第四次全国结核病流行病学抽样调查报告.中华结核和呼吸杂志,2002,25(2):3-7.

[4]WHO.Guidelinesfortheprogrammaticmanagementofdrug-resistanttuberculosis.Geneva:WorldHealthOrganization;2006.p.174.

[5]张楠,胡继红,万康林.乙胺丁醇耐药表型与耐药基因embB突变的关系.中国卫生检验杂志,2010,20(3):490-492.

[6]陈红兵，金玉芬，于庭，等.结核分枝杆菌耐药分析及基因检测研究.中国实验诊断学,2010,14(12):1965-1968.