乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床应用研究

乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床应用研究

李成龙

（湖南中医药大学第二附属医院检验科湖南长沙410000）

摘要：目的探讨乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床应用效果。方法在医院2015年11月至2016年10月期间诊治的乙型肝炎患者中抽取75例作研究组样本，同期选取健康体检者75名作为对照组样本，对2组受检者实施乙型肝炎病毒DNA定量检测。结果HBsAg、抗-HBe、抗-HBc组乙型肝炎患者的HBV-DNA含量是（7.45±2.84）′105，远高于其他组（P＜0.05）；HBsAg、HBeAg、抗-HB组乙型肝炎患者的HBV-DNA阳性率高于其他组（P＜0.05）。结论乙型肝炎病毒DNA定量检测有重要的临床意义，可用于监测乙肝病毒感染患者的病情进展、合理制定抗乙肝病毒复制的用药方案。

关键词：乙型肝炎；病毒DNA；定量检测

本研究为明确乙型肝炎病毒DNA定量检测的临床应用效果，对一组乙型肝炎患者、一组健康体检者进行乙型肝炎病毒DNA定量检测，现报道2组受检者的检测结果如下。

1.资料与方法

1.1临床资料

本组乙型肝炎病毒感染患者共75例，收治时间：乙型肝炎病毒DNA定量检测。其中，男35例，女40例；年龄为26~74岁，平均年龄为（55.34±3.38）岁；同期选取75名健康体检者作为对照组，男36例，女39例；年龄为27~74岁，平均年龄为（55.38±3.31）岁；2组受检者年龄、性别等统计学对比无差异（P＞0.05）。

1.2纳入与排除标准

（1）纳入标准：①研究组患者临床检查等均符合乙型肝炎病毒临床诊断标准[1]；②认知功能正常，签订了知情同意书；

（2）排除标准：①配合行为较差；②临床资料不完整。

1.3检测方法

（1）试剂：HBV微板核酸杂交定量检测试剂盒、HBV血清学标志物检测试剂盒；

（2）仪器：PCR扩增仪、酶标仪；

（3）检测过程：分装PCR主反应液、稀释液、裂解液；取50μL标本置入50μL裂解液中，在37℃的保温箱中保温1h，置入100μL的中和液中，以样品液A稀释，获得样品原液。取样品稀释液B，稀释样品原液，获得15μL稀释后样品，将其置入反应管中，反应管中有主反应液，置入50μL的石蜡油。处理后标本扩增、杂交后，以TMB系统显色，以酶标仪进行定量计算，计算公式：[（HBV吸光度-阴性对照值）′PCR前血样稀释倍数′PCR后产物稀释倍数/（IC吸光度-阴性对照值）′5]′120′1000=拷贝/ml

1.4观察指标

对研究组患者按血清标志物分组，并对研究组、对照组患者的HBV-DNA含量、HBV-DNA阳性率进行对比；

统计学方法

将此次研究所得数据输入SPSS20.0统计学软件：计量资料、计数资料分别使用均数±标准差（）、例数（n）表示，计量资料与组间率（%）对比则实行t检验、c2检验；若存在统计学差异，则以P＜0.05描述。

2.结果

注：①HBV-DNA含量：与HBsAg、抗-HBe、抗-HBc组相比，*表示P＜0.05；②HBV-DNA阳性率：与HBsAg、HBeAg、抗-HBc相比，#表示P＜0.05

HBsAg、抗-HBe、抗-HBc组乙型肝炎患者的HBV-DNA含量是（7.45±2.84）′105，远高于其他组，且比较有统计学差异（P＜0.05）；HBsAg、HBeAg、抗-HB组乙型肝炎患者的HBV-DNA阳性率最高，是97.06%，高于其他组，比较均有统计学差异（P＜0.05），详见表1.

3.讨论

我国属于乙型肝炎病毒感染高发地区之一，大约有10%人群属于乙型肝炎病毒携带者，可见乙型肝炎病毒感染对人们健康的威胁较大[2~3]。目前，临床上对于乙型肝炎病毒感染的临床诊断，主要通过检测血清特异性抗原/抗体实现，其中，乙型肝炎病毒DNA聚合酶链反应（PCR）定量检测的灵敏度、特异性较高，但相关报道鲜见[4~6]，应做进一步分析。

经本研究发现，健康体检者的HBV-DNA含量以及HBV-DNA阳性率均为0，而乙型肝炎患者的HBV-DNA含量、HBV-DNA阳性率相比较高，可见HBV-DNA定量检测在鉴别乙型肝炎上有一定作用；同时，HBsAg、HBeAg、抗-HBc组乙型肝炎患者的HBV-DNA阳性率高达97.06%，HBV-DNA含量为（4.22±0.71）′107，可见该组患者的乙肝病毒复制情况最活跃，证明该类型乙型肝炎患者的病毒传染性最强。此外，HBsAg、抗-HBe、抗-HBc阳性是乙型肝炎病毒的长期携带标志，而该组患者的HBV-DNA含量高达（7.45±2.84）′105，可见该组患者病毒复制的活跃性较高，应及时予以有效治疗。

综上所述：乙型肝炎病毒的DNA定量检测有助于临床医师明确乙型肝炎病毒感染病情进展，确定抗HBV复制的治疗方案的应用效果。

参考文献

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