86例细胞免疫治疗反复自然流产疗效的临床分析

86例细胞免疫治疗反复自然流产疗效的临床分析

谢宛君1谢元媚2靖涛2何桂华2

（1．广州中医药大学第二临床医学院510405；2.广东省第二人民医院妇科510317）

【摘要】目的：探讨淋巴细胞免疫治疗反复自然流产临床疗效。方法：取2008年7月至2014年8月就诊的反复自然流产患者86例，对患者采用淋巴细胞皮内注射的方式进行治疗。结果：86例封闭抗体阴性的患者中治疗后共73例成功妊娠，成功率达84.88%。在后期的随访中患者以及新生儿情况良好，无其他副作用出现。结论：针对封闭抗体缺乏导致的反复自然流产患者采用淋巴细胞免疫治疗能够提高妊娠成功率，取得满意的效果，值得在临床上使用和推广。

【关键词】淋巴细胞免疫治疗；反复自然流产；疗效分析

【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-7165(2015)18-046-02

反复自然流产(Recurrentspontaneousabortion，RSA)是指连续两次怀孕在同一妊娠周期发生自然流产的现象，属不育症范畴。随着研究的深入，有学者发现习惯性流产与患者的封闭抗体水平有关[1]，因此产生了淋巴细胞免疫疗法(Lymphocyteimmunitytreatment，LIT)，以达到抑制母胎间细胞性免疫排斥反应，减少流产率的目的。为探讨淋巴细胞免疫疗法的疗效，我们对86例RSA患者予以LIT治疗，临床效果满意，现报道如下。

1资料与方法

1.1一般资料

选取2008年7月至2014年8月到本院就诊的RSA患者，病因检测排除染色体感染因素、内分泌、自身抗体检测阳性等因素所致，而封闭抗体阴性的患者86例，平均(34.2±4.3)岁。

1.2方法

1.2.1流产病因筛查方法与标准所有患者均符合以下条件：(1)自然流产史≥2次，无活产史；(2)排除生殖道畸形和形态学异常；(3)抗体ASAb(-)，EmAb(-)，AcpAb(-)；(4)内分泌检查PRL、FSH、LH、E2、P、T、T3、T4、TSH及空腹血糖正常；(5)封闭抗体(-)；(6)双方行TORCH(包括巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒和弓形体)、衣原体、支原体等检查均为阴性；(7)夫妇双方染色体检查正常，无家族遗传病史；(8)男方精液分析正常；(9)治疗前3个月未使用过调节免疫功能药物，未经任何免疫治疗。

1.2.2治疗方法丈夫传染病项目检查正常后，无菌抽取其静脉血20ml,用生理盐水按1:1比例稀释，分别缓慢注入4个内装淋巴细胞分离液4ml的无菌圆底试管上层,使之形成分明界面；以2000r/min速度离心5min后，吸取淋巴细胞层，经无菌生理盐水洗涤后取下层沉淀物,再加生理盐水制成悬液，控制细胞数为(2-4)×107ml。选择患者前臂内侧分4-6个点皮下注射,每2-3周注射1次,4次为1疗程。嘱患者治疗1疗程后尽快怀孕,孕后继续免疫治疗每2周1次至孕12周后停用，如半年内未怀孕应再次行免疫治疗1疗程。确定妊娠后予以HCG2000μ隔日一次至孕9-12周，Ｂ超检查提示胎儿发育正常后停用。

1.2.3妊娠成功纳入标准：符合以下任何一项：

(1)妊娠≥28周，B超提示宫内活胎，胎儿、胎盘、羊水均未见异常；(2)已经分娩正常活婴者。

1.2.4统计学分析采用统计软件SPSS19.0进行统计分析，计数资料用X2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1淋巴细胞免疫治疗后患者免疫状态变化

2.1.1皮肤迟发型反应

注射部位均有不同程度红肿或瘙痒，但症状随着免疫次数增加而减轻；2例患者全身风团状荨麻疹，予口服氯雷他定后好转。

2.1.2妊娠及其结局经治疗后再次妊娠者(包括妊娠成功及再次流产)共78例，其中73例成功妊娠，足月妊娠分娩60例，不足月2例，处于妊娠期且孕≥28周11例，成功率达84.88%。5例于妊娠早期自然流产，8例治疗后未妊娠。62例新生儿除2例早产有黄疸外，均未见生长受限。

2.1.3不同流产次数妊娠结局比较

流产次数≤3次(包括2次和3次)与流产次数>3次组之间比较，差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1流产次数与妊娠结局的关系

3讨论

近年来，我国育龄期女性在妊娠早期RSA发病率越来越高，受到广泛关注。关于其发生机理，研究成果[2]显示：胎儿与母体间存在着复杂而特殊的免疫平衡关系，妊娠成功与否与母体的免疫抑制作用机制有重要的关系,主要在于封闭抗体的作用。封闭抗体是一种在正常孕妇的血清中，能够抗配偶淋巴细胞的特异性的IgG抗体，它可抑制淋巴细胞反应，封闭母体淋巴细胞对胎盘滋养层的细胞毒作用，防止辅助T细胞识别胎儿抗原，并可阻止母亲免疫系统对胚胎的攻击。封闭同种抗原刺激的淋巴细胞产生巨噬细胞移动抑制因子，故称其为封闭抗体。[3]正常生育妇女体内存在一定水平的封闭抗体，在妊娠期间，这种抗体可以与母胎界面上来自父方的抗原相结合，而使胎儿不能被母体免疫系统识别，免受母体免疫系统的攻击反复自然流产患者血清中封闭抗体为阴性，所以由于母体封闭抗体的缺乏,导致了习惯性流产的发生。

针对封闭抗体缺乏导致的RSA，1981年Taylor首次用LIT方案对封闭抗体缺乏的RSA患者进行治疗获得成功，随后多项研究表明采用LIT方案可提高妊娠成功率，推测其机制是该疗法能够刺激母体产生同种免疫反应，产生具有免疫保护作用的封闭抗体，阻止母体免疫系统对胚胎的排斥，使胚胎形成免疫耐受，产生免疫保护。[4]本研究对86例封闭抗体阴性的RSA患者进行LIT方案治疗，再次妊娠的成功率达88.61%，获得妊娠成功的73例患者，除13例不足月生产外，未发现有胎儿生长受限，证实LIT方案治疗RSA是安全有效的。同时，本研究发现，流产次数≤3次者经免疫治疗后妊娠成功率明显高于流产次数>3次者，猜测其可能原因是：流产次数越多，患者身体免疫反应性越低下，且平均年龄较高，卵巢功能逐渐下降。因此，建议RSA患者尽早治疗，以提高疗效。

总之，对RSA患者采取配偶体内淋巴细胞进行免疫治疗，可以增加母体中封闭抗体数量，防止母体免疫系统对胎儿或胎中的父系抗原进行识别、侵害和排斥，产生免疫保护，使孕妇再次妊娠，免疫治疗效果良好，妊娠成功率较高，且治疗过程简便易行，交叉感染率低，副作用小，值得在临床实践中推广和使用。

参考文献

[1]KujovichJ,MerrillPA.Antiphospholipidantibodiesandantithrombindeficiency:doubletroubleforpregnancy.AmJHematol,2011,86(12):1028-1031.

[2]史青杨,李春洪,冯丽华.不明原因反复自然流产的免疫病因研究进展[J].中国实验诊学,2010,14(1):153-155.

[3]ShankarkumarU,PatwardhanMM,etal.Autoantibodyprofileandotherimmunologicalparametersinrecurrentspontaneousabortionpatients.NigerMedJ.2011,52(3):163-166.

[4]CheckJH.Apracticalapproachtothepreventionofmiscarriage:part2-activeimmunotherapy.ClinExpObstetGynecol,2010,37(1):5-9.