《临床免疫学与检验》的实习教学体会

《临床免疫学与检验》的实习教学体会

张文兰胡同平

张文兰胡同平（包头医学院第一附属医院内蒙包头014010）

【摘要】临床免疫学与免疫检验是医学检验专业的一门重要课程，而临床实习的目的是将医学基础理论知识运用于实践，转化为临床技能。

【关键词】临床免疫学免疫学检验教学体会

临床免疫学（clinicalimmunology）是将免疫学基础理论、临床医学疾病与免疫学技术相结合，用于研究疾病的免疫病理机制、诊断与鉴别诊断、评价治疗效果和判断预后的多个分支学科的总科。免疫学检验(laboratoryimmunology)是研究免疫学技术及其在医学检验领域应用的一门学科，是医学检验专业的重要学科之一[1]。临床免疫学与免疫检验是医学检验专业的一门重要课程，是一门基础知识丰富、实践性很强的课程，与临床医学广泛紧密地结合。检验专业人士能正确理解检测结果的临床意义，协助临床医生正确地选择有关实验是免疫学检验的主要目的和任务，也是本学科的发展方向。临床免疫学与检验强调理论联系实际，实习教学则是理论联系实际的重要环节。以下是笔者在《临床免疫学与检验》实习带教中的几点体会。

一提高带教老师的自身修养

“公欲善其事，必先利其器！”教师在教育过程中起主导作用，其素质直接影响教学质量。一个优秀的带教老师，除应具有丰富的理论知识和临床经验外，还要学习心理学知识和新的教学理论和方法，努力提高自身素质。学生到免疫室以后，应向他们介绍本室的规章制度、工作职责、操作流程及注意事项，根据本室的特点和学生的不同层次来安排带教计划。

二注重职业道德教育

对学生严格管理，严格要求，做到教书育人。要求他们上课不许迟到、早退，在工作上必须严谨求实，刻苦专研，不断学习新的知识，提高技术水平。教师言传身教，使实习生通过耳濡目染，自觉提高自身素质，养成良好的医德医风。严格要求检验结果的准确性，及时准确地保证临床医师对疾病的诊断，尽量减少和避免医疗事故的发生，提高学生的法律意识。

三采用启发式和互动教学方法，培养学生的临床思维能力

传统的教学方法是老师机械地向学生讲授临床理论和解决方法，学生始终处于被动接受的地位，往往会造成学生缺乏独立的临床思维能力，难以得到横向立体思维和综合分析能力的训练，大大削弱了学生学习的主动性，将来真正进入临床实际工作后即使遇到一些常见问题也无法解决。因此，必须改变这种教学方法，可运用启发式和互动教学方法，将教学的主体从老师转向学生，以发挥学生学习的主观能动性，激发其自学能力，启发和提高其临床思维能力及运用理论知识分析和解决临床实际问题的能力[2]。

四利用现代化教学手段，加强直观教学

近年来，计算机多媒体辅助教学已经越来越多地应用于医学教学。计算机多媒体技术是将文字、图像、声音等多种表达知识的媒体结合在一起，具有信息载体多样性、集成性和交互性等特点，具有很强的形象性和主动性，能够把抽象的概念具体化，因此能较好地激发学生的学习兴趣，使学生愉快地学习，是开展实验教学的有效辅助形式[3]。许多的常规操作都有教学软件，既有详细的理论讲解，又有形象的操作演示，学生既感兴趣又易看懂。这样统一安排观看，既节约教师的人力，又提高教学效率，缩短教学时间。

五提高学生的动手能力，培养学生实事求是的科学态度

作为医学检验专业的学生，不仅要建立良好的临床思维能力，还需要学习、掌握一定的临床操作技能，为日后的临床工作打下扎实的基础。带教老师在实习课上要耐心示范各种检验仪器的正确使用方法，及时纠正学生的不正确姿势，同时强调各种操作误差和人为误差引起的检验结果不准确。但实习最重要的，是让每个学生亲自动手。

（一）熟悉仪器设备，有重点地讲授实验仪器的使用与保养方法，让每一位同学都亲自操作所需仪器、材料、用具等，使学生在今后的工作中能够对仪器操作自如。比如，在做临床免疫学相关的手工实验操作中，移液器是最常使用的工具。移液器的正确操作是科学实验的第一步，是一个非常基础的实验操作，但其中也蕴含着许多操作学问，稍不留神就容易产生偏差。以下分几个方面来详细叙述移液器的使用方法[4]。

1设定移液体积

①调节移液体积时，若要从大体积调为小体积，则按照正常的调节方法，逆时针旋转旋钮即可。

②如果要从小体积调为大体积时，则可先顺时针旋转刻度旋钮至超过设定体积的刻度，再回调至设定体积，这样可以保证量取的最高精确度。

③在该过程中，千万不要将旋钮旋出量程，否则会卡住内部机械装置而损坏了移液器。

2装配枪头

①正确操作：将移液端垂直插入枪头，左右微微转动，上紧即可。

②错误操作：用移液器反复撞击枪头来上紧的方法是不可取的，这样会导致移液枪的内部配件（如弹簧）因敲击产生的瞬时撞击力而变得松散，甚至会导致刻度调节旋钮卡住，严重情况下会将白套筒折断。

③多通道移液器，将移液器的第一道对准第一个吸头，倾斜插入，前后稍微摇动上紧，枪头插入后略超过O型环即可，此时可以看见连接部分形成清晰的密封圈。

3移液方法

3.1移液原则：

①移液之前，要保证移液器、枪头和液体处于相同温度。

②不要用大量程的移液器来移取小体积的液体。(移液的体积需保证在移液器所提供的量程范围之内才符合准确度和精确度的要求)。

③在吸液之前，可以预先吸放几次液体以润湿枪头（尤其是要吸取粘稠或密度与水不同的液体时）。

④吸取液体时，移液器保持竖直状态，将枪头插入液面下2～3毫米，为避免移液不准确，应慢吸慢放。

3.2要吸取粘稠或密度与水不同的液体时，可以采取两种移液方法：

①前进移液法：用大拇指将按钮按下至第一停点，然后慢慢松开按钮回原点。接着将按钮按至第一停点排出液体，稍停片刻继续按按钮至第二停点吹出残余的液体，最后松开按钮。

②反向移液法:一般用于转移高粘液体、生物活性液体、易起泡液体或极微量的液体其原理就是先吸入多于设置量程的液体，转移液体的时候不用吹出残余的液体。吸取液体时先按下按钮至第二停点，慢慢松开按钮至原点。排出液体时将按钮按至第一停点，排出设置好量程的液体，继续保持按住按钮位于第一停点（千万别再往下按），取下有残留液体的枪头，弃之。

4移液器的放置

①使用完毕后，应将移液器调回最大量程，然后将其竖直挂在移液器架上。

②当移液器枪头里有液体时，切勿将移液器水平放置或倒置，以免液体倒流腐蚀活塞弹簧。

5移液器的维护

5.1清洁和消毒

5.1.1移液器内外部清洁：①外壳的清洁：使用肥皂液、洗洁精或60％的异丙醇来擦洗，然后用双蒸水淋洗，晾干即可；②内部的清洗：需要先将移液器下半部分拆卸开来（具体方法可参照说明书），拆卸下来的部件可以用上述溶液来清洁，双蒸水冲洗干净，晾干，然后在活塞表面用棉签涂上一层薄薄的硅酮油脂（起润滑作用）。

5.1.2移液器的消毒灭菌处理：①高温高压灭菌处理：用灭菌袋、锡纸或牛皮纸等材料包装灭菌部件，在121℃，100kPa条件下，灭菌20分钟，完毕后，在室温下完全晾干后，活塞上油，再组装；②紫外线照射灭菌：整支移液器和其零部件可暴露于紫外线照射下，进行表面消毒。

5.2移液器的检测

气密性检测可以使用目视法检测：将吸取液体后的移液器垂直静置15秒，观察是否有液滴缓慢的流出。若有流出，说明有漏气现象。

一把小小的移液器，操作方面就有这么多讲究。一定要让学生一开始就掌握正确的操作方法，培养他们一丝不苟、严谨认真的工作态度。

（二）熟悉实验的全程操作，让每位学生都亲自动手参加实验的每一个步骤与环节。学生对于实验的全过程有了深刻的了解，这样在今后的独立工作中，就可以把握好每一个实验环节，养成缜密的思维习惯，为以后他们完成自己的工作打好基础。

1在实验之前，首先要让学生明白一个基本思路，那就是免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应。早期建立的免疫学检测技术通常直接用抗原抗体反应产生的现象判断实验结果，如本实验室开展的红斑狼疮因子（抗ＤＮＰ抗体）的检测就是采用颗粒性抗原所形成的凝集现象来进行判断。以后开展起来的标记免疫技术则是用高度敏感的示踪物质（如荧光物质、放射性核素、酶或化学发光物质等）标记抗原或抗体，进行抗原抗体反应后，通过检测标记物对抗原或抗体进行定性、定位或定量分析。标记免疫技术具有灵敏度高、快速、可定性、定位或定量等优点，拓宽了免疫学检测技术的应用范围，是目前应用最广泛的免疫学检测技术。如实验室已经开展的抗核抗体（antinuclearantibodies，ANA）、抗核周因子（APF）、抗角蛋白抗体（AKA）和抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）的检测均采用间接免疫荧光法（indirectimmunofluorescence，IIF）检测，而类风湿因子分型（RF-IgA/G/M）、抗环瓜氨酸肽抗体（CCP）、抗RA33抗体、抗dsDNA抗体、抗核小体抗体、抗线粒体抗体M2型、抗α-胞衬蛋白多肽抗体都是采用的酶联免疫吸附试验法（enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA）定量检测，免疫印迹法(immunoblottest，IBT)最常用于抗核提取物抗体（ENA）的测定，免疫球蛋白（IgG、IgA、IgM、IgE、IgG4）、补体（C3、C4）、抗链球菌溶血素O、抗链球菌DNA酶、C-反应蛋白、类风湿因子的测定均使用西门子的BNP特种蛋白仪，采用速率散射比浊法全自动定量检测。而现在临床上最常使用的乙肝五项指标的测定，既有ELISA的手工测定法，又有全自动酶免分析仪测定，还有化学发光法测定。对各种测定方法，同学们都要有所了解，掌握其检测原理和基本操作，知道各种方法各自的优缺点。

2实验过程中，要充分发挥学生的积极性和技巧性。每个人要独立完成实验，其目的是训练正确、熟练的操作能力，养成良好的工作习惯，遵守实验操作规程，认真观察实验结果，切忌走马观花。

3实验完成后，要认真总结实验过程中出现的问题，解答每一位同学提出的疑问，让每位同学都弄懂弄通免疫指标在临床诊断的重要意义，为以后工作中合理、正确地解答病人和临床医生的疑问打下良好的基础。

（三）让实习生主动操作一些大型仪器，参与实验室报告的输入和发送，熟悉科室的一些管理软件，使学生会动手动脑，对所出的每张报告进行准确、认真地分析。

（四）让学生了解质控的重要性，增强质量控制意识。质量控制[5]是对一个实验室的仪器状态、检验人员操作水平的总的评价。带教老师要结合免疫室的室内和室间质控结果进行教学分析，重点讲解质控的原理、常用方法以及失控后如何进行全面分析和处理。

（五）注重科研能力培养。现代的临床检验师应该是综合素质较高的检验人才，不仅能做一般常规工作的检验，而且应培养学生的科研能力，让他们从文献检索、科研设计、科学试验、课题总结到论文撰写诸多环节上都能得到正规的训练，使他们初步掌握科学研究基本方法，为今后开展科研、选题、立项打下一个良好的基础。

总之，希望通过这门课程的学习，医学检验专业的学生能够明确临床免疫室的工作职责，能够做到拿到一份免疫检测项目的说明书就能把实验做完做好，及时准确地向临床发放正确的结果，协助临床医生做好疾病的诊断和鉴别诊断，并不断提高自身的专业水平和科研能力。

参考文献

[1]王兰兰，吴健民.《临床免疫学与检验》第四版.人民卫生出版社,2008,2:8-9.

[2]王春梅，李楠.浅谈如何在免疫学教学中促进师生互动[J].西北医学教育,2009,17(3):528-529.

[3]赵杰,官守涛,朱明磊.多媒体技术在免疫学实验教学中的运用[J].山西医科大学学报(基础医学教育版),2006,8(2):194.

[4]韩志芳.微量加样器在实验教学中的正确使用与标准[J].中国卫生检验杂志,2005,15(6):757-758.

[5]叶应妩,王毓三,申子瑜.《全国临床检验操作规程》第三版.人民卫生出版社,2006（12）:39-113.