中性粒细胞趋化因子NAcPGP在慢性阻塞性肺疾病和哮喘中的表达及鉴别

(整期优先)网络出版时间:2016-01-11
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中性粒细胞趋化因子NAcPGP在慢性阻塞性肺疾病和哮喘中的表达及鉴别

王先勇

湘西自治州人民医院湖南湘西416000

摘要:目的:分析中性粒细胞趋化因子NAcPGP在慢性阻塞性肺疾病和哮喘中的表达及鉴别意义。方法:分别选取慢性阻塞性肺疾病患者30例,哮喘急性发作期患者30例,对两组患者的临床资料进行回顾性分析,运用三重四极杆液质联用仪技术检测两组患者痰液中的NAcPGP表达水平,进而分析其差异性。结果:慢性阻塞性肺疾病组的NAcPGP表达水平(80.9±53.2)pg/mL明显高于哮喘急性发作期组的NAcPGP表达水平为(35.8±19.1)pg/mL,对比两组差异显著,有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性阻塞性肺疾病患者的NAcPGP表达水平明显高于哮喘急性发作期患者,NAcPGP可能是鉴别慢性阻塞性肺疾病与哮喘急性发作期的生物标志物。

关键词:中性粒细胞趋化因子;NAcPGP;慢性阻塞性肺疾病;哮喘

慢性阻塞性肺疾病和哮喘都是临床上一种较为常见的呼吸系统疾病,属于多发病。这两种疾病的临床症状极为相似,但其治疗方法却也存在着差异性。慢性阻塞性肺疾病和哮喘在急性发作期时均不能进行肺功能检查,支气管激发试验是急诊的禁忌症,其鉴别难度较大。及时准确地对这两大疾病的急性发作期进行鉴定非常关键,中性粒细胞趋化因子NAcPGP的发现,或有望实现这一目标。中性粒细胞趋化因子NAcPGP是慢性阻塞性肺疾病患者肺部构造破坏后形成的小分子碎片,其在痰液中的表达水平或许可以用来鉴别慢性阻塞性肺疾病和哮喘急性发作期[1]。基于此,本研究检测了慢性阻塞性肺疾病组和哮喘急性发作期组痰液中的NAcPGP表达水平,以分析其在两组患者中表达水平的不同点。

1资料与方法

1.1临床资料

分别选取慢性阻塞性肺疾病患者30例,哮喘急性发作期患者30例,对两组患者的临床资料进行回顾性分析。慢性阻塞性肺疾病患者:男性17例,女性13例;年龄范围为42~78岁,平均年龄为(67.3±3.6)岁;所有患者均符合中华医学会呼吸病学分会《慢性阻塞性肺疾病诊治指南(2013年修订版)》的慢性阻塞性肺疾病相关诊断标准[2],患者临床上均表现出不同程度的气促、喘息、胸闷、咳嗽、发热等症状。哮喘急性发作期患者:男性16例,女性14例;年龄范围为43~80岁,平均年龄为(67.7±3.9)岁;所有患者均符合中华医学会呼吸病学分会哮喘学组《支气管哮喘防治指南(支气管哮喘的定义、诊断、治疗和管理方案)》的支气管哮喘的相关诊断标准[3],患者临床上均表现出不同程度的气促、喘息、胸闷、咳嗽等突发症状。对比两组患者的性别、年龄等一般资料,差异不明显,无统计学意义(P>0.05),具有一定的可比性,详见表1所示。

1.2方法

1.2.1痰标本采集与储藏

痰标本采集:患者先用西批氯铵含淑液漱口,清除口内残渣物,深吸气后再用力咳出1~3口痰,放于无菌离心管内,加入与痰标本相同体积的氯化钠溶液,置于离心机中进行离心处理(1000rpm,15min,4℃),取上清,弃痰栓,把上清液放于EP管中,储藏于零下80℃冰箱中以待检测。痰标本禁止多次冻融。

1.2.2NAcPGP检测

固相萃取:向萃取柱中添加超纯水1mL,过滤后再添加甲醇1mL;取痰标本上清液100uL,添加2%甲酸100μL,混匀后倒入萃取柱内,流速为2mL/min;用5%甲醇1mL淋洗萃取柱,再用甲醇1mL淋洗萃取柱,以清理干扰杂质;待测物用甲酸/甲醇1mL将NAcPGP从萃取柱上洗脱出来,洗脱液放于离心管内,用氮气吹干仪吹干洗脱液样本,再用0.25%甲酸50μL溶解掉吹干后的洗脱液样本残渣[4]。

色谱条件:运用ThermoAccela髙效液相色谱系统,流动相A为乙腈,流动相B为0.1%甲酸,进样体积20μL。

质谱条件:质谱系统运用三重四极杆质谱系统,扫描模式为SRM,碰撞气体为1.5mTorr,离子传输管温度为320℃,气化温度为400℃,鞘气压力为40arb,辅助气阀流速为10arb,喷雾电压为+3500V。

1.3统计学方法

采用SPPS11.0统计软件进行数据统计,计量资料以x±s表示,组间对比采用t检验,计数资料以%表示,组间对比采用x²检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

慢性阻塞性肺疾病组的NAcPGP表达水平为(80.9±53.2)pg/mL,哮喘急性发作期组的NAcPGP表达水平为(35.8±19.1)pg/mL,慢性阻塞性肺疾病组的NAcPGP表达水平明显高于哮喘急性发作期组,对比两组差异显著,有统计学意义(P<0.05)。详见表2所示。

3讨论

慢性阻塞性肺疾病与哮喘急性发作期都是呼吸科的常见病症,尽管两种疾病患者的临床症状极为相似,均具有气促、喘息、胸闷、咳嗽、发热等症状,但其发病原理与治疗方法却存在差异性。对临床经验较不丰富的急诊医生而言,面对一个气促发作的患者,短时间内是极难正确判断出改该患者是慢性阻塞性肺疾病患者还是哮喘急性发作期患者。

慢性阻塞性肺疾病最后的病理特点是肺气肿,外周气道内的气道壁会因慢性炎症的反应,进而出现肺部结构重塑、气流受限不完全可逆的情况。有研究报道显示,慢性阻塞性肺疾病患者痰液中的NAcPGP表达水平高于正常人。但也有研究报道显示,哮喘急性发作期患者的气流受限具有较为明显的可逆性,分析因素,与患者气流受限是受气道痉挛所致的相关。除了哮喘急性发作期的患者外,其他大多数哮喘患者肺部结构重塑并不显著,对肺基质的破坏性也相对较弱,这就造成了NAcPGP在慢性阻塞性肺疾病及哮喘急性发作期中表达水平的差异。

本研究为了探讨中性粒细胞趋化因子NAcPGP在慢性阻塞性肺疾病和哮喘急性发作期组中的表达及鉴别意义,分别选取了50例慢性阻塞性肺疾病患者与50例哮喘急性发作期患者的临床资料进行回顾性研究,对比分析两组患者的NAcPGP表达水平,结果显示:慢性阻塞性肺疾病组的NAcPGP表达水平为(80.9±53.2)pg/mL,哮喘急性发作期组的NAcPGP表达水平为(35.8±19.1)pg/mL,慢性阻塞性肺疾病组的NAcPGP表达水平明显高于哮喘急性发作期组,对比两组差异显著,有统计学意义(P<0.05)。

综上所述,慢性阻塞性肺疾病患者的NAcPGP表达水平明显高于哮喘急性发作期患者,NAcPGP可能是鉴别慢性阻塞性肺疾病与哮喘急性发作期的生物标志物。

参考文献:

[1]贾晔然.中性粒细胞趋化因子NAcPGP在COPD和哮喘中的表达及鉴别[D].南方医科大学,2014.

[2]贾晔然,张红璇.中性粒细胞趋化三肽在慢性阻塞性肺疾病中的作用机制[J].实用医学杂志,2013(3):501-503.

[3]郭宇,李燕,陈庄.趋化因子在哮喘中的作用及研究进展[J].现代预防医学,2012(7):1764-1768.

[4]徐萍,徐岷,周国雄,等.中性粒细胞趋化因子在轻、重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织中的表达变化[J].江苏大学学报:医学版,2010(5):377-381.