血脂与谷丙转氨酶试剂对总胆汁酸检测的携带污染分析

血脂与谷丙转氨酶试剂对总胆汁酸检测的携带污染分析

王九霞

王九霞

（江苏省宝应县安宜镇社区卫生服务中心225800）

【摘要】目的探讨血脂与谷丙转氨酶试剂对总胆汁酸检测携带的污染情况。方法选取我院进行体检的68例健康者的血清，进行随机混合成若干等份血清。选取10份混合血清作为对照组，取上述10份血清加入血脂试剂检测作为血脂试剂组，加入谷丙转氨酶试剂为谷丙转氨酶试剂组。分析比较血脂试剂对总胆汁酸的检测影响以及加入谷丙转氨酶试剂后对结果的影响。结果血脂试剂组总胆汁酸的浓度明显高于对照组（P<0.05）；谷丙转氨酶试剂组血清总胆汁酸浓度与血脂试剂组相比，差异具有统计学意义（P<0.05），但与对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。结论血脂试剂对于总胆汁酸检测可能有携带污染，导致总胆汁酸检测增高，且随着检测次数增加，或加入谷丙转氨酶试剂，增加中间检测项目，其影响逐渐降低。

【关键词】血脂试剂谷丙转氨酶试剂总胆汁酸携带污染血清

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）28-0046-02

总胆汁酸的测定，是作为肝实质损伤的一项重要指标。然而在利用全自动生化分析仪检测总胆汁酸过程中可出现试剂交叉污染现象，严重影响总胆汁酸的检测结果，导致误诊误治的危害[1]。因而，为了明确血脂和谷丙转氨酶试剂对于总胆汁酸检测的携带污染现象，我院选取68例健康者的血清进行实验，并获得一定的成就，现报道如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

选取2014年1月-2014年8月期间在我院进行体检的68例健康者的血清，进行随机混合成若干等份血清。选取10份混合血清作为对照组，另选取10份加入血脂试剂检测作为血脂试剂组，加入谷丙转氨酶试剂为谷丙转氨酶试剂组。健康者年龄为20～58岁，平均为42±2.7岁，男性38例，女性30例。两组的一般资料方面比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

1.2方法

采用日立7170A全自动生化仪。浙江东欧诊断产品有限公司生产的总胆汁酸（TBA）试剂：方法是循环酶法，反应温度37℃，波长405nm(主)/660nm(次)，标本3?l，试剂Ⅰ240?l，试剂Ⅱ80?l，读数时间150秒。总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL）和谷丙转氨酶（ALT）试剂都是浙江东欧诊断产品有限公司生产。总胆固醇、甘油三酯是酶偶联比色法/单试剂型，高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇是直接法，谷丙转氨酶是连续监测法/双试剂型。

1.2.1对照组

选取混合血清10份，加入生理盐水1：1混合，分别检测10份样本中的总胆汁酸（TBA）的浓度，取平均值，随后检测第二次和第三次。

1.2.2血脂试剂组和谷丙转氨酶试剂组

取上述10份混合血清，血脂试剂包括胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL），加入以上血脂试剂1：1混合，加入试剂后，检测平均TBA浓度，随后检测第二次和第三次，并做好记录。然后，加入谷丙转氨酶试剂，检测平均TBA浓度，随后检测第二次，并记录。分析每次TBA浓度变化情况。

1.3观察指标

利用全自动生化分析仪检测并记录混合血清总胆汁酸含量，单位为umol/l。

1.4统计学分析

采用SPSS17.0统计学软件进行分析，P<0.05表示差异有统计学意义。

2.结果

2.1血脂试剂对于总胆汁酸检测的影响

血脂试剂组包括TC、TG、HDL和LDL对总胆汁酸检测的影响，加入以上试剂后，血清总胆汁酸检测值明显增高，相比较对照组，差异具有统计学意义（P<0.05），但随着检测次数的增加，检测值有所下降。具体见表1。

表1血脂试剂对于总胆汁酸检测的影响（umol/l）

组别试剂第一次第二次第三次

对照组生理盐水8.1±0.48.1±0.48.1±0.4

血脂试剂组TC18.2±0.6*16.3±0.5*8.9±0.5*

TG14.6±0.7*12.0±0.6*8.4±0.3*

HDL48.5±16.3*29.6±9.1*9.3±5.7*

LDL12.4±0.8*11.2±0.7*8.1±0.4*

注与对照组相比，*P<0.05。

2.2谷丙转氨酶试剂组血清总胆汁酸检测值变化

对于血脂试剂组血清标本中加入谷丙转氨酶试剂检测后，对血清总胆汁酸检测存在影响，与其第一次相比较，总胆汁酸值显著下降（P<0.05）；加入谷丙转氨酶试剂后，第二次检测结果与对照组相比，差异无统计学意义（P>0.05），具体见表2。

表2谷丙转氨酶试剂组血清总胆汁酸检测值变化（umol/l）

检测次数TCTGHDLLDL

第一次10.9±0.59.9±0.515.4±1.69.8±0.5

第二次8.6±0.48.3±0.39.2±0.68.7±0.4

3.讨论

胆汁酸是由肝脏内合成，可与甘氨酸或牛磺酸结合成为结合型胆汁酸，由肝细胞分泌进入胆汁，随胆汁流至肠道，然后经肠道内细菌作用下被水解成游离型胆汁酸，透过肠壁进入血管，约有97%被重新吸收后回到肝脏，形成一个循环[2]。因而，健康人的周围血液中血清总胆汁酸含量极微，一般在10umol/l以内，仅当肝细胞损害或出现肝内、外阻塞时，胆汁酸的代谢就会出现异常，造成其值就会升高。相关研究表明，当发生肝癌时，TBA检测阳性率为100%，而肝硬化TBA检测阳性率为88%，显著高于其他指标[3]。目前，总胆汁酸的含量被作为是反映肝功能的敏感和有效的指标之一。

全自动生化分析仪，是临床上用于检测、分析生命化学物质的仪器，为临床上疾病的诊断、治疗和预后及健康状态提供可靠的信息依据。其原理是利用光电比色来测量血液中某种特定化学成分。具有测量速度快、准确性高、试剂量消耗低等优点[4]，已被广泛接受并运用。但也存在一定的不足，在其自动分析过程中极易由于试剂针沾染的试剂液未清理干净而携带入其他检测液中，造成试剂液交叉污染现象。同时，需要明白供污染项目和受污染项目，供污染项目指一个项目测定后产生的试剂携带可影响其后另一个项目的测定结果；受污染项目是指一个项目的测定结果可被另一个项目产生的试剂携带所污染。证明携带污染的存在最佳方法具体是，紧随供污染项目检测后的受污染项目的第一个检测值，与受污染项目未受污染时标准检测值不一致，其污染程度可用与未受污染时的标准值间差值来表示。本研究中，为了探讨血脂试剂和谷丙氨酶试剂对于血清总胆汁酸值的影响，在正常血清总胆汁酸检测后，随后加入血脂试剂，分析比较检测值差别，结果显示血脂试剂对于血清总胆汁酸的测定存在影响，其值明显增高，但随着次数增多，其值增高变化降低。然后紧随其后加入谷丙转氨酶试剂对比，血脂试剂对于总胆汁酸的影响减小，并随着次数的增多，逐渐恢复正常，可见，增加检测次数或增加中间检测项目，可有效降低总胆汁酸检测影响程度。

全自动生化分析仪的试剂针要接触各种试剂，按常规清洗，一般难以彻底清洗干净，易造成分析项目间的携带污染，因此在日常工作中要做好仪器的维护、检查、保养。据相关文献介绍血脂试剂中含有高浓度胆酸钠，是干扰TBA测定的主要因素，但本试验从试剂厂家提供的说明书上得知血脂试剂中并不含有上述成分，但试剂中的Good’S缓冲液浓度较高，至于是不是其中的某种成分还需进一步研究。本文研究表明，血脂与谷丙转氨酶试剂对于总胆汁酸检测效果影响明显，但随着检测次数的增加，或者中间检测项目的增多，其影响程度降低显著。生化项目的测定往往仅需要样本几微升，而试剂则往往需几百微升，因此在全自动生化分析仪检测过程中，上一相邻试验试剂若可影响化学反应过程，极易造成携带污染。因此为了给临床总胆汁酸的检测提供有效信息，应充分了解每一个试剂的成分，设计最佳的分析顺序。

参考文献

[1]李海聪，方欢英，陈志瑾，等.脂类物质对血清总胆汁酸检测的干扰和携带污染分析[J].国际检验医学杂志，2014，35（11）：1407-1409.

[2]刘香萍，程明刚，许伟珊，等.甘油三酯试剂与总胆固醇试剂对总胆汁酸测定的干扰[J].中华全科医学，2013，11（4）：621-622.

[3]唐芳，何文军，尹向阳，等.生化分析仪总胆汁酸试剂的携带污染对总二氧化碳测定的干扰分析[J].重庆医学，2011，40（17）：1739-1741.

[4]余书武，王霞.生化试剂污染对全自动生化分析仪检测结果的影响分析[J].国际检验医学杂志，2013，34（24）：3403-3404.