HPLC法测定鼻渊片中大叶茜草素的含量

HPLC法测定鼻渊片中大叶茜草素的含量

刘仁俊1吴斐2于泓苓3刘琪3

刘仁俊1吴斐2于泓苓3刘琪3

（1吉林省中医院吉林长春130021)

(2长春精优药业股份有限公司吉林长春130033)

(3吉林省药物研究所吉林长春130061）

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）26-0076-02

【摘要】目的建立测定鼻渊片中大叶茜草素含量的方法。方法采用HPLC法，以C18为固定相，甲醇—水—四氢呋喃（310：90：3）为流动相，检测波长为250nm，流速为1ml·min-1。结果大叶茜草素在¬0.0936～2.808g范围内线性良好，平均回收率为98.7%，RSD=0.69%（n=6）。结论所建方法可用于鼻渊片中大叶茜草素的含量测定

【关键词】高效液相色谱法鼻渊片大叶茜草素

DeterminationofSwertiamarininBiyuantabletsbyRP－HPLC

LIURen-jun1，WUFei2，YUHong-ling3，LIUQi3

(1、JilinTraditionalChineseMedicineHospital，Changchun130021，China；2、ChangchunJingyouPharmaceuticalCo.Ltd.，Changchun130033，China；3、JilinProvinsialInstituteforDrug，Changchun130061，China)

【Abstract】OBJECTIVETodevelopamethodforthedetermineationofswertiamarininBiyuantablets.METHODAnRP-HPLCmethodwasestablished.TheChromatographiccolumnwasC18.Themobilephasewasmethanol-water–tetrahydrofuran（310︰90︰3）.Thedetectionwavelengthwas250nmandtheflowratewas1ml•min-1.RESULTSThegoodlinearitywasobtainedovertherangeof0.0936～2.808µgforswertiamarin.Theaveragerecoverywas98.7%，RSD=0.69%（n=6）.CONCLUSIONThemethodcanbeusedforquantitativedeterminationofthispreparation.

【Keyword】RP-HPLCBiyuantabletsSwertiamarin

鼻渊片清热解毒，通鼻窍。用于慢性鼻炎及鼻窦炎。原标准没有制定含量测定方法，我们参照《中国药典》2010年版一部[1]及其他文献资料，采用高效液相色谱法对本品茜草中的大叶茜草素含量进行定量，其方法的线性、精密度、重现性、回收率均较好。方法可行。

1实验部分

1.1仪器和试药

岛津2010自动进样高效液相色谱仪；大连伯瑞色谱中心C18色谱柱（4.6mm×250mm5µm）；大叶茜草素对照品（中国药品生物制品检定所提供批号为10884—200203)；鼻渊片（本所自制）；甲醇为色谱纯；水为重蒸馏水；其它试剂均为分析纯。

1.2方法与结果

1.2.1色谱条件大连伯瑞色谱中心C18色谱柱；甲醇—水—四氢呋喃（310：90：3）流动相；检测波长为250nm；柱温30℃；进样量为10μl。

1.2.2试验溶液的制备精密称取大叶茜草素对照品适量，加甲醇制成每1ml含80µg的溶液，即为对照品溶液；取鼻渊片样品，研细，取约4片量，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率30kHz）30分钟，甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。取续滤液，即为供试品溶液；另取与本品相当的缺茜草样品适量，精密称定，与供试品溶液制备方法同法制成阴性溶液，即为阴性样品溶液。

1.2.3专属性试验分别吸取对照品溶液、供试品溶液及阴性对照溶液各10μl，按以上色谱条件分别进样测定。对照品大叶茜草素峰的保留时间为29.31min，鼻渊片样品中大叶茜草素峰的保留时间为29.74min，已基本达到完全分离，阴性对照溶液中无干扰。结果见图1。

图1大叶茜草素对照品(A）、样品(B）、阴性样品(C）

Fig1Swertiamarincontrolsolution(A)，samplesolution(B)，negativesolution(C)

1.2.4线性范围精密称取大叶茜草素对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.0936mg的溶液，分别精密吸取1µl、2µl、5µl、10µl、20µl、30µl按上述色谱条件依次进样，测定峰面积。以浓度C为横坐标，峰面积A为纵坐标绘制标准曲线，计算的回归方程。A=4950209×C－12944r=1.0000

所以大叶茜草素进样量在0.0936～2.808µg范围内线性较好。

1.2.5精密度试验取上述大叶茜草素对照品溶液，各10µl重复进样6次，峰面积的RSD值为0.152%，表明精密度较好。

1.2.6重复性试验取本品批号050820的样品20片，研细，取约1.4g的80%、100%、120%各2份，精密称定，分别置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率30kHz）30分钟，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。精密吸取10µl，按上述色谱条件测定，测得大叶茜草素含量均值为0.66mg·g-1RSD值为0.833%。可见此方法重现性较好。

1.2.7回收率试验采用样品加标回收法，取重现性批号样品适量（0.7g的80%，100%,120%各2份），分别置锥形瓶中，分别精密加入大叶茜草素对照品溶液(浓度为5.31mg/10ml)1ml，再精密加入甲醇25ml，称定重量，超声处理（功率250W，频率30kHz）30分钟，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，精密吸取10µl，按上述色谱条件测定，计算回收率。测得大叶茜草素的平均回收率为98.7%，RSD=0.69%。可见此方法回收率较好。

1.2.8稳定性试验取回收率3的样品溶液，每隔一定时间进样10μl，共考察24小时，RSD值为0.64%，可见样品在24h内稳定。

1.2.9样品的测定按上述测定方法测定10批鼻渊片样品中大叶茜草素含量与上市样品含量测定，结果见表1。

表1样品含量测定结果(n=10)

Table1Resultsofsamplesdetermineation(n=3)

药材含量(%)批号成品含量(mg/片)

050725010.2830.274

v0.67%050725020.2780.276

050725030.2790.276

0508200.2370.240

0.70%0509010.3130.313

0509020.2790.284

0509030.2890.296

0.88%0604010.3600.354

0604020.3580.352

0604030.3540.352

上市样品0610020.1800.178

2讨论

文中所报道的鼻渊片中大叶茜草素的含量测定方法，可为完善其制剂的质控标准提供实验依据。

参考文献

[1］中华人民共和国药典.2010年版一部.北京：中国医药科技出版社，2010.P218.