ANA与抗ENA抗体联合检测对自身免疫病诊断价值

ANA与抗ENA抗体联合检测对自身免疫病诊断价值

蔡利群李凤

（黑龙江省中医药科学院黑龙江哈尔滨150036）

【摘要】目的：自身免疫病中抗核抗体(ANA)和抗可提取性核抗原(ENA)抗体联合检测情况及联合检测在诊断中的应用价值。方法：对我院2017年6月—2018年6月期间收治的自身免疫病患者100例为观察组，选取同期体检的健康者50例为对照组。进行血清间接免疫荧光法检测ANA，免疫印迹法检测ENA多肽抗体。结果：对照组血清ANA及ENA抗体检测结果，均为阴性，阳性率0%，观察组ANA检测，阳性率SLE患者96.72%，SS患者90.91%，MCTD患者87.5%，PM/DM患者85.71%；RA患者50.0%；PSS患者80.0%。SLE组抗Ro/SSA抗体检出率最高85.24%，SS组抗La/SSB抗体81.81%，SLE组抗Sm抗体检出37.70%;抗U1-核糖核蛋白抗体检出情况，SLE组77.04%，SS组72.72%，MCTD组87.5%，PSS组20.0%；Scl-70抗体PSS组检出40.0%；抗Jo-1抗体PM/DM组检出57.14%。结论：自身免疫性疾病血清ANA和抗ENA抗体检测具有互补性，可提高临床诊断的准确性和检出率，为自身免疫性疾病的诊断、疗效及预后提供临床诊断依据。

【关键词】自身免疫病；抗核抗体(ANA)；抗可提取性核抗原(ENA)；诊断

【中图分类号】R593【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）35-0049-02

自身免疫性疾病是当今医学界面临的许多疑难病症中的一种。抗核抗体（ANA）是指对真核细胞的核的不同成分，作为抗原所产生的各种自身抗体的总称。抗ENA抗体是指对核内可提取性核抗原（ENA）的自身抗体。ENA是用等渗盐溶液从细胞核碎片提取的可溶性核蛋白[1]。本研究通过对血清中ANA和ENA抗体，来分析两者关系，提高对疾病检测诊断的准确性和针对性。

1.资料与方法

1.1一般资料

选取我院2017年6月—2018年6月期间收治的自身免疫病患者100例为观察组，选取同期体检的健康者50例为对照组。进行血清间接免疫荧光法检测ANA，免疫印迹法检测ENA多肽抗体。观察组100例，其中男44例，女56例，年龄最小4岁，最大74岁，平均年龄42.5±2.5岁；其中系统性红斑狼疮（SLE）61例，干燥综合征（SS）11例，混合性结缔组织病（MCTD）8例，多肌炎/皮肌炎（PM/DM）7例，类风湿性关节炎（RA）8例，系统性硬化症（PSS）5例。对照组50例，其中男20例，女30例，年龄最小5岁，最大73岁，平均年龄43.5±3.5岁。

1.2方法

间接免疫荧光素标记抗体法。将底物贴于洁净的载玻片上，储存于20℃或普通冰箱中保存，可用数周。待检血清经56℃，30min灭活，适当稀释后滴在底物片上，37℃30min，PBS冲洗，冷风吹干，加已知效价的荧光抗体，37℃30min，再冲洗、吹干。在荧光显微镜下见到底物细胞核呈亮绿色的荧光为阳性，将阳性标本进行一系列对倍稀释出现阳性结果的最后一个稀释度即为其滴度[2]。

抗可浸出核抗原抗体（ENA）采用对流免疫电泳法，待测血清与ENA进行对流免疫电泳根据相应沉淀线的有无判定有无抗ENA抗体。胶层厚1.6mm，成对平行打孔，孔径3mm，孔距6mm。阳极侧孔加待检血清或阳性对照血清，10V/cm电泳30min。阴极侧孔加ENA，电泳45min，待阳性对照孔与ENA孔之间出现白色沉淀线时停止电泳，将胶板置温盒内继续扩散24h。

2.结果

对照组血清ANA检测结果均为1：100（-），均为阴性，阴性率100%；对观察组血清中ANA检测结果，

SLE组61例，1：100（-）者2例，1：100（+）者2例，1：320（+）者13例，1：1000（+）者28例，1：3200（+）者15例；阳性率为96.72%；SS组11例，1：100（-）者1例，1：100（+）者1例，1：320（+）者2例，1：1000（+）者4例，1：3200（+）者3例；阳性率为90.91%；MCTD组8例，1：100（-）者1例，1：100（+）者1例，1：320（+）者2例，1：1000（+）者3例，1：3200（+）者1例；阳性率为87.5%；PM/DM组7例，1：100（-）者1例，1：100（+）者1例，1：320（+）者2例，1：1000（+）者3例，1：3200（+）者0例；阳性率为85.71%；RA组8例，1：100（-）者4例，1：100（+）者3例，1：320（+）者1例，1：1000（+）者0例，1：3200（+）者0例；阳性率为50.0%；PSS组5例，1：100（-）者1例，1：100（+）者0例，1：320（+）者1例，1：1000（+）者1例，1：3200（+）者1例；阳性率为80.0%。

对照组血清ANA及ENA抗体检测结果，均为阴性，阳性率0%，观察组ANA检测，SLE组61例，阳性60例（96.72%）；SS组11例，阳性10例（90.91%）；MCTD组8例，阳性7例（87.5%）；PM/DM组7例，阳性6例（85.71%）；RA组8例，阳性4例（50.0%）；PSS组5例，阳性4例（80.0%）。抗Ro/SSA抗体，SLE组检出52例（85.24%），SS组检出9例（81.81%），MCTD组检出3例（37.5%），PSS组检出4例（57.14%）；抗La/SSB抗体，SLE组检出46例（75.41%），SS组检出9例（81.81%），MCTD组检出1例（12.5%），PSS组检出2例（40.0%）；抗Sm抗体（A-Sm），SLE组检出23例（37.70%）;抗U1-核糖核蛋白抗体（A-U1-RNP）SLE组检出47例（77.04%），SS组检出8例（72.72%），MCTD组检出7例（87.5%），PSS组检出1例（20.0%）；Scl-70抗体，SLE组检出2例（3.27%），PM/DM组检出1例（14.28%），PSS组检出2例（40.0%）；抗Jo-1抗体PM/DM组检出4例（57.14%）。

3.讨论

ANA阳性对SLE等自身免疫性疾病有重要的诊断价值，此外在硬皮病、类风湿性关节炎、舍格伦综合征（干燥综合征）等病中，ANA的阳性率也较高。抗Sm抗体主要见于SLE及其重叠综合征，是SLE的特异性标志之一，但阳性率偏低，为30%～40%，故在非活动期亦可检出。同时检测抗dsDNA和抗Sm抗体，可提高SLE的诊断率。抗RHP抗体见于多种风湿病患者、SLE、RA、进行性全身性硬化症、皮肌炎患者阳性率为10%～50%，混合性结缔组织病患者阳性率可达95%～100%，且效价很高。

【参考文献】

[1]吴风.ANA、抗ENA抗体法联合检测205例自身免疫性疾病的结果分析[J].职业与健康，2011，27(18):2087-2088.

[2]朱华强，李婉怡，吴茜，等.ANA与抗ENA抗体谱联合检测对系统性红斑狼疮的诊断价值[J].国际检验医学杂志，2017，38(6):835-838.