毛细柱气相色谱法测定水果蔬菜中有机磷农药残留量

毛细柱气相色谱法测定水果蔬菜中有机磷农药残留量

李旭

李旭

（昆明市疾病预防控制中心云南昆明650228）【摘要】目的：建立一种快速、准确测定蔬菜水果中有机磷农药残留量的气相色谱法,并应用于昆明市蔬菜水果中有机磷农药残留量专项监测工作中。方法：用二氯甲烷提取,浓缩后经Florisil固相萃取柱净化,用气相色谱-氮磷检测器测定,色谱柱为OV-101石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm)分离。结果：甲胺磷、DDVP、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、对硫磷在0.05-0.4μg/ml的范围，峰面积与浓度呈良好的线性关系。加标回收率（n=5）甲胺磷为95.8%、DDVP为94.8%、乐果为88.7%、甲基对硫磷为89.0%、马拉硫磷为90.9、对硫磷为92.6%。精密度良好。20个水果样品中甲胺磷的检出率为60%、马拉硫磷为30%、对硫磷为20%、DDVP为70%、乐果为50%、甲基对硫磷为40%。20个蔬菜样品中甲胺磷的检出率为70%、马拉硫磷为20%、DDVP为60%、乐果为20%、甲基对硫磷为20%。结论：本方法快速、准确、分析成本低,能满足有机磷农药残留量的快速分析的要求。

【关键词】气相色谱；水果蔬菜；有机磷农药【中图分类号】O657.8【文献标识码】B【文章编号】1007-8231（2011）12-2048-02

有机磷农药是目前最常用最重要的一类农药，它具有易分解，杀虫效率高，对植物药害小等特点，在各种农作物尤其是在水果蔬菜中得到广泛的使用，因而水果蔬菜受有机磷农药污染也最为严重，并造成潜在的危害。加强对市售的水果蔬菜的有机磷农药残留量的监测，对合理开发和正确使用农药，保证人民健康具有重要的意义。本文建立一种快速、准确测定蔬菜水果中有机磷农药残留量的气相色谱法，本法快速、准确、分析成本低,能满足有机磷农药残留量的快速分析的要求。

1材料与方法

1.1主要试剂和仪器

1.1.1试剂二氯甲烷（分析纯）、丙酮(分析纯)、无水硫酸钠(分析纯)、中性氧化铝(分析纯)、活性炭。

1.1.2有机磷标准品甲胺磷、DDVP、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、对硫磷浓度均为100μg/ml，农业部环境保护科研所研制。标准溶液的配制分别将各标准品用丙酮稀释成5.0μg/ml混标储备液,再吸混标储备液0.50ml于50ml容量瓶中,用丙酮定容至刻度作为标准使用液,各有机磷农药的浓度均为0.05μg/ml。

1.1.3净化柱的制备在20ml具有筛板的空柱中先加5g的无水硫酸钠，再加5g的中性氧化铝,再加5g的活性碳，再加5g的无水硫酸钠。

1.1.4仪器AutosystemXL-GC美国PE公司生产的气相色谱仪附氮磷检测器

1.2试样前处理

1.2.1试样提取和净化取蔬菜水果的可食用部分100g,切碎混匀,称取20g于搅拌杯中,加入适量无水硫酸钠,搅拌至呈干粉状,转移至具塞锥形瓶中,加入100ml二氯甲烷浸泡(以浸过固体表面为宜),超声提取20min或浸泡过夜。将浸泡液全量倾入小烧杯中,并用20ml二氯甲烷分2次洗涤残渣,并入小烧杯中,过固相净化柱，用KD浓缩器在60℃水浴上浓缩近干,用丙酮溶解残留，并定容到1ml,待测。

1.3气相色谱分析

1.3.1色谱条件色谱柱OV-101(30m×0.25mm×0.25μm)，载气(氮气),流速:1.0ml/min,恒流;分流比：1：10;进样口温度:240℃;检测器温度:280℃;柱温程序:起始130℃,保持1min以10℃/min的速率升至200℃,保持5min;进样量1.0μl;分流进样。

1.3.2测定在相同的气相色谱条件下,分别将混合标准液(浓度均为0.05μg/ml)进行气相色谱分析,以保留时间定性,确定混合标准品中各有机磷农药所对应的峰和保留时间。试剂空白、试样空白、加标试样和混合标准系列都在同一色谱条件下进行测定,以保留时间定性,以峰面积定量。用外标法定量。

2结果与讨论

2.1线性范围及标准曲线

分别精密取5.0μg/ml混标液0、0.50、1.00、2.00、4.00ml置于50ml的容量瓶中加丙酮稀释到刻度，摇匀。标准系列：0、0.05、0.1、0.2、0.4μg/ml。进样1.0μl，以浓度（X）含量对峰面积（Y）作线性回归。各种农药在50-400ng/ml的浓度范围内线性良好。

回归方程如下表：

2.2无水硫酸钠的用量

样品前处理所需无水硫酸钠的量必须根据样品的含水量进行调整。比如梨、苹果、萝卜等含水量较多的样品需加入较多的无水硫酸钠才能保证完全吸收样品的水分,而花菜、芹菜等含水量较少的样品无水硫酸钠的加入量可相对少些。一般无水硫酸钠的加入量以刚好吸掉样品的水分并稍过量为宜,以使样品研磨后呈干粉状为判断标准。

2.3提取溶剂的选择

提取使用丙酮、石油醚比较,但存在净化步骤较多,溶剂的消耗量大,前处理周期过长等缺点。可能影响样品中痕量残留量分析的精密度和准确度。本方法采用无水硫酸钠吸附样品中的水分,再用二氯甲烷提取。实验结果表明本法以二氯甲烷提取率较高,且消除了水分干扰,有利于进行净化柱的处理,六种农药样品加标回收率能达到要求。

2.4净化方法的选择

在样品提取液的净化过程中,要特别注意那些颜色很深、杂质偏多的样品,如韭菜、白菜等样品。此类样品的提取液中加入少量活性炭粉末,充分摇匀,滤液经净化柱净化。经比较用无水硫酸钠+中性氧化铝+活性炭+无水硫酸钠净化柱较好。

2.5分离条件

在恒温下甲胺磷和DDVP不分离，试验用程序升温，在起始130℃,保持1min以10℃/min的速率升至200℃,保持5min，甲胺磷、DDVP、乐果、甲基对硫磷、马拉硫磷、对硫磷的分离效果良好，其保留时间分别是2.64、2.73、7.38、9.19、10.15、10.65min.

分离图谱如下：

2.7回收率试验

分别称取香蕉、苹果、西瓜、芹菜、白菜各20g共五份，准确加入5μg/ml的混标1.0ml，测得对照值，计算平均回收率（n=5）分别为：甲胺磷：95.8%（RSD=1.5%）、DDVP：94.8%（RSD=2.3%）、乐果：88.7%（RSD=1.4%）、甲基对硫磷：89.0%（RSD=3.2%）、马拉硫磷：90.0%（RSD=1.8%）、对硫磷：92.6%（RSD=2.6%）。

2.8方法的检出限

根据仪器的检测器灵敏度和空白试样的基线噪声的3倍等因素来确定每种有机磷农药残留量的检出限，检出量（进样1μl）分别为（ng）甲胺磷：0.050、DDVP：0.025、乐果：0.032、甲基对硫磷：0.050、马拉硫磷：0.049、对硫磷：0.025.

2.9监测结果分析

在本次专项调查中共采集了20件水果和20件蔬菜，检测结果如下：

20种水果中6种有机磷农药残留量

农药名称含量范围

从以上结果可以看出水果在6种有机磷农药残留量检出量比蔬菜大，检出有机磷农药的种类比蔬菜多。

水果和蔬菜中仍在用国家不允许使用的甲胺磷农药和不得检出的马拉硫磷和对硫磷农药；有些农药还未制定限量标准，使结果无法判断。

参考文献

［1］中华人民共和国国家标准GB/T145—2003《植物性食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种残留的测定》。

［2］常凤启，等.河北食品卫生执法专项检查结果分析.中国卫生检验杂志，2003,13（1）：85~