清营汤对实验性糖尿病神经病变大鼠坐骨神经电生理及组织病理学表现的影响

清营汤对实验性糖尿病神经病变大鼠坐骨神经电生理及组织病理学表现的影响

徐小萍1朱平2许敬3戴启刚3

徐小萍1朱平2许敬3戴启刚3

（1江苏省中医院内分泌科江苏南京210029)

(2南京市第二医院江苏南京210003；3南京中医药大学江苏南京210008）

【摘要】目的研究清营汤对实验性糖尿病神经病变大鼠坐骨神经电生理及组织病理学表现的影响。方法用链脲佐菌素腹部注射，制成大鼠糖尿病神经病变模型，以弥可保为阳性对照。将实验大鼠分作正常组、模型组、治疗组、对照组，观察不同的治疗方法对糖尿病并发神经病变大鼠的影响。用BL-420生理机能实验系统测定各组大鼠神经电生理，光学显微镜观察坐骨神经病变。结果清营汤治疗组可以改善模型大鼠神经传导速度，同模型组及弥可保对照组比较，具有显著性差异；改善糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经病理学改变。结论清营汤可以改善糖尿病周围神经病变大鼠坐骨神经病理学改变，提高其神经传导速度。

【关键词】清营汤实验性糖尿病神经病变大鼠神经电生理组织病理学

1实验试剂与动物

1.1实验试剂

链脲佐菌素(Sigma，STZ，批号：20040208)，柠檬酸(上海第三化学试剂厂，分析纯，批号：20041108），戊巴比妥钠(分析纯，上海化学试剂场，批号：950078)，BL-420生理机能实验系统。

1.2实验动物

SD大鼠[南京中医药大学动物中心提供，动物许可证号：苏(K)2002-1022],体重250g左右，雌雄各半。

2实验方法

大鼠实验前一日，禁食不禁水24h，次晨剪尾取静脉血，用glucocardteststrip测空腹血糖，剔除不符合实验要求的大鼠。第二日实验前，将STZ用0.5mmol的柠檬酸溶液(pH为4.5)配成100mg/ml的溶液，按60mg/kg剂量腹腔快速注射于除正常组外的各组大鼠，并禁食24h。次晨再测空腹血糖，空腹血糖符合20mmol/L以上为纳入标准，不符合标准者淘汰。正常组腹部注射同等剂量的生理盐水。将造模大鼠随机分作模型组、治疗组、对照组，每组各30只。大鼠造模后饲养2周后观察。

3给药方法

待造模2周后，治疗组、对照组大鼠即开始予相应药物灌胃治疗，治疗组予清营汤，剂量为50g/kg?d（浓度200%），对照组予弥可保，剂量为250ug/kg·d，2组均加用胰岛素者皮下注射长效和短效胰岛素，将空腹血糖控制于7-9mmol/L。

造模后，分别于2周、8周、12周，以2％的戊巴比妥钠溶液麻醉大鼠，固定于鼠板上，在摸及大鼠坐骨结节处，剪开皮肤，钝性分离肌肉，暴露坐骨神经干后，用玻璃分针分离神经周围组织，引导电极与刺激电极相隔0.75cm，以不同电位的刺激电位促发神经冲动，刺激量从较小开始，渐增加至超强刺激，分别取得感觉神经和运动神经传导时间、潜伏期、传导速度，并获取大鼠坐骨神经。用10%福尔马林固定，常规取材，脱水，石腊包埋。切片经HE染色，光学显微镜观察坐骨神经病变。

4统计学处理

所有计数资料采用t检验，均用（均值±标准差）表示。显著性差异标准P<0.05。

5结果

5.1神经电生理变化

5.1.1造模后2周正常组与模型组神经电生理变化比较见表1。

表1造模2周后坐骨神经感觉神经、运动神经传导速度(m/s)比较()

组别神经类别传导速度(m/s)

正常组感觉神经26.38±6.980

运动神经47.46±6.210

模型组感觉神经8.10±4.408*

运动神经17.77±6.302

注：*与正常组相比P<0.05

从表1可以看出，糖尿病大鼠造模2周后，其坐骨神经传导速度已有明显变慢，说明造模后2周，糖尿病大鼠已出现神经电生理改变，形成糖尿病周围神经病变。

5.1.2治疗前（糖尿病大鼠造模后2周）、治疗后（糖尿病大鼠造模后8、12周）各组神经电生理变化比较见表2。

表2治疗前、治疗后各组感觉神经、运动神经传导速度(m/s)比较()

组别神经类别治疗前（造模后2周）治疗后（造模后8周）治疗后（造模后12周）

正常组感觉神经26.38±6.98025.99±6.79025.99±6.790

运动神经47.46±6.21047.77±6.30047.77±6.300

模型组感觉神经8.10±4.40817.34±5.47112.91±4.225

运动神经17.77±6.30210.83±4.12311.66±2.658

治疗组感觉神经8.10±4.40823.75±2.091*22.38±9.719**

运动神经17.77±6.30237.33±4.011☉37.02±7.192☉☉

对照组感觉神经8.10±4.40820.07±4.112$19.68±2.240$$

运动神经17.77±6.30224.77±8.194﹠18.17±8.516﹠﹠

注：*与同组治疗前相比，感觉神经传导速度显著提高，P<0.05；☉与同组治疗前相比，运动神经传导速度显著提高，P<0.05；$与同组治疗前相比，感觉神经传导速度显著提高，P<0.05；﹠与同组治疗前相比，运动神经传导速度显著提高，P<0.05；*与$相比，P<0.05，有显著差异；☉与﹠相比，P<0.05，有显著差异；*与**相比，P>0.05，无显著差异；☉与☉☉相比，P>0.05，无显著差异；$与$$相比，P>0.05，无显著差异；﹠与﹠﹠相比，P>0.05，无显著差异

从表2可以看出，治疗组、对照组都能有效提高坐骨神经感觉神经和运动神经的传导速度，有效治疗糖尿病周围神经病变，2组相比，治疗组疗效优于对照组。

5.2坐骨神经组织病理学改变

正常组：正常坐骨神经属有髓神经，在HE切片光学显微镜下神经纤维排列整齐、规则。纵切面呈长条形，其外被有髓鞘、雪旺氏细胞及基底膜。横切面神经纤维呈圆形，中央点状染色深的为轴突，其周围淡染为髓鞘。鞘膜外为神经膜，可见雪旺氏细胞核。

模型组（造模后2周）：纵切面神经纤维数量略减少，排列较正常组略稀疏，节段性局部髓鞘部增宽，呈空泡状。横断面神经纤维数量略减少，直径减小，略呈萎缩状，部分神经纤维体积增大，其内轴突消失，呈空泡状。

治疗组：组织病理学表现基本与正常组相同，神经纤维未见明显病变。

对照组：组织病理学表现基本与正常组相同，神经纤维未见明显病变。

6讨论

糖尿病周围神经病变(DPN)是糖尿病常见并发症，其发病率各文献报道差异较大，4%-80%不等，严重影响广大糖尿病患者生活质量。临床以对称性肢体麻木、疼痛、感觉异常、烧灼感等为主要症状，隶属于中医学“消渴”并发“痿痹”证候。其发病机理不同于单纯风、寒、湿、热等外邪侵入人体，闭阻经脉所致的风寒湿痹或风湿热痹，病机上具有消渴病证的特点。阴虚燥热，热灼筋脉，阴伤筋脉失养，气血失于流畅是其主要病机。

清营汤为《温病条辨》方，方中以犀角、生地为君药，共司清营凉血。元参、麦冬配生地以养阴清热为臣药。佐以银花、连翘、黄连、竹叶清热解毒以透邪热，配用丹参活血以消瘀热，全方清营养阴、活血通络，能改善实验性糖尿病周围神经病变大鼠神经电生理及组织病理学表现，有效治疗DPN。