检测腹泻患儿粪便中的轮腺病毒抗原分析对临床诊断的价值

检测腹泻患儿粪便中的轮腺病毒抗原分析对临床诊断的价值

杨刚

杨刚(湖北省红安县人民医院检验科438400)

【摘要】目的探讨粪便中轮状病毒和腺病毒对临床诊断的价值。方法收集630例腹泻患儿的粪便，轮状病毒、腺病毒检测试剂（乳胶法）采用双抗体夹心法，二合一试剂含有被事先固定于膜上测试区R区的轮状病毒抗体和A区的腺病毒抗体和包被在聚酯膜上的轮状病毒抗体乳胶和腺病毒抗体乳胶混合物。结果粪便中轮腺病毒抗原二合一检测是诊断患儿腹泻肠炎敏感的方法,双重检测以确定病原菌和选用药物,快速的为临床诊断该病提供了很有价值的依据。结论小儿腹泻是一组多病原因素引起的消化道疾病，出现腹泻时除需进行大便常规检查，还需检测轮腺病毒，以确定病原，进行对症治疗，对临床诊断该病提供了很有价值的依据。腺病毒和轮状病毒感染是婴幼儿急性水样泻的主要致病原,双重病毒感染是最多见的感染形式，轮状病毒是6个月～1岁患儿水泻的主要致病原。

【关键词】轮状病毒腺病毒腹泻患儿粪便

【中图分类号】R725.7【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）49-0020-02

轮状病毒是世界上儿科肠胃炎和腹泻的主要原因之一，几乎所有的孩子在5岁左右都可能被感染。每年全球有900,000儿童死于轮状病毒感染。轮状病毒感染的症状有发热、呕吐并伴有严重的腹痛。轮状病毒具有极度传染性，病毒主要来源于粪便。腺病毒是引起儿童病毒性胃肠炎的第二大病因（10-15%）。该病毒依据不同的血清型也可引起呼吸系统疾病，以及腹泻、结膜炎、膀胱炎等。目前，至少有47种腺病毒的血清型被发现，它们全部共享一个共同的六邻体抗原。其中血清型40和41与胃肠炎有关，主要的症状是腹泻，可持续9-12天，并伴有发热和呕吐。［1］本文就我院2011～2013年临床门诊和住院送检的腹泻儿粪便标本的轮状病毒及腺病毒检测结果同时进行分析。

1材料与方法

1.1标本来源本院2011～2013年临床门诊和住院送检的腹泻儿粪便630例腹泻患儿粪便标本中,单纯轮状病毒阳性159例(25.23%);单纯腺病毒阳性87例(13.81%);轮状病毒和腺病毒双重阳性103例(16.35%);病毒阳性总例数349例(55.39%)。诊断主要依据临床症状和体征，如起病急，有呕吐、腹泻，部分病人有发热、上呼吸道感染病史及轻中度脱水征，大便性质为糊便、粘糊便、稀水便或蛋花汤样便，镜检有脂肪球，很少有白细胞。

1.2试剂来源和方法试剂购自杭州艾博生物医药有限公司，轮状病毒/腺病毒检测试剂（乳胶法）采用双抗体夹心法，二合一试剂含有被事先固定于膜上测试区R区的轮状病毒抗体和A区的腺病毒抗体和包被在聚酯膜上的轮状病毒抗体乳胶和腺病毒抗体乳胶混合物。通过对腹泻病人粪便的检测，有效区分标本中的轮状病毒/腺病毒。

1.3操作步骤样品制备（1）旋开收集器的盖子，用盖子上附带的取样棒挑取大约50毫克的粪便样本，再将取样棒放回收集器中旋紧盖子。如果粪便标本较稀薄，可用一次性塑料吸管吸取两滴大约50ul样本至收集器中。（2）将样本和缓冲液充分摇匀，摇晃试管使样品充分分散开。（3）将制备好的样本滴加2滴到加样孔（S）中，无气泡的稀释液样本，并开始计时，检测结果应在10-20分钟时判读，20分钟后判读无效。

1.4结果判断轮状病毒：质控区（C）出现一条蓝色的线条，同时R区有一条蓝色的线条结果为阳性。腺病毒：质控区（C）出现一条蓝色的线条，同时A区有一条红色的线条结果为阳性。轮状病毒和腺病毒均为阳性：质控区（C）出现一条蓝色的线条同时A区有一条红色的线条，R区有一条蓝色的线条。

2结果

630例腹泻患儿粪便标本中,单纯轮状病毒阳性159例(25.23%);单纯腺病毒阳性87例(13.81%);轮状病毒和腺病毒双重阳性103例(16.35%);病毒阳性总例数349例(55.39%)。双重病毒感染高峰期位于6月和9月～11月,肠道腺病毒感染高峰期位于5月～6月和9月～11月,而轮状病毒在4月～6月和10月～12月呈现二个感染高峰,轮状病毒、腺病毒和双重病毒感染的年龄无显著差异,均以3岁以下婴幼儿为主,且主要集中在7个月～12个月的婴幼儿。轮状病毒和腺病毒感染是婴幼儿急性水样泻的主要致病原,双重病毒感染是最多见的感染形式，轮状病毒是6个月～1岁婴儿水泻的主要致病原。小儿腹泻是一组多病原因素引起的消化道疾病，出现腹泻时除需进行大便常规检查，还需检测轮腺病毒，以确定病原，进行对症治疗，对临床诊断该病提供了很有价值的依据。

3讨论

3.1婴幼儿最常见的消化道综合症，轮状病毒和腺病毒感染是婴幼儿急性腹泻的前两位致病原。轮状病毒主要通过粪-口途径传播，在秋冬季高发，在秋冬季节腹泻患儿中主要是由轮状病毒感染所致。本文显示：单纯轮状病毒阳性159例(25.23%);单纯腺病毒阳性87例(13.81%);轮状病毒和腺病毒双重阳性103例(16.35%);病毒阳性总例数349例(55.39%)。腹泻儿感染率达到55.39%，且主要集中在7个月～12个月的婴幼儿,达到45.6%均以3岁以下婴幼儿为主随着年龄增大轮状病毒感染率降低。［2］

3.2腹泻儿轮状病毒的感染呈季节性分布主要集中于秋冬季节。本文显示第四季度腹泻儿轮状病毒的阳性率明显高于前三个季度，以第二季度和第三季度较低。［3］

3.3轮状病毒肠胃炎是一种从温和到严重的疾病，有一些表征像是呕吐，水状腹泻，以及低程度的发热。当儿童受到这类病毒感染时，在症状发生前大约会有两天的潜伏期。症状通常是从呕吐开始，接着是四到八天的大量腹泻。轮状病毒感染较容易造成脱水的细菌性病原体还要更常引起脱水的现象，脱水成为轮状病毒感染的最常见的死因。

在人一生中，感染轮状病毒A种会有这样的经过：第一次感染通常会产生症状，但是下一次的感染通常会是典型的无症状，因为免疫系统提供了部分的保护机制。所以，感染症状发生的比例于两岁以下的儿童最高，之后渐渐降低直到45岁为止。虽然新生儿感染的机会很常见，但是通常都是温和的症状或是无症状疾病；最严重的症状都会发生在比较大一点的出生六个月到两岁的小孩，以及发生在有免疫缺陷的小孩身上。因为从童年获得的免疫力，大部分的成人对于轮状病毒并不易受到影响；成人发生的肠胃炎通常是因为其他病因而非轮状病毒，但是成人的无症状感染依然在社群中带有感染症的传染性。有症状的再感染通常因感染了不同血清型的轮状病毒A种。

3.4受到腺病毒感染时，症状潜伏期10天左右。主要症状是腹泻，呈水样便或稀便，量或多或少。儿童每天排便最多8～9次，病程一般4～8天。各型腺病毒所致腹泻持续时间不等，以肠腺病毒胃肠炎腹泻时间最长，大多患者有呕吐，持续1～2天，少数有发热。非肠型腺病毒腹泻患者发热较多。约20％腺病毒肠炎患者有呼吸道症状。粪便排病毒时间1周左右。腺病毒肠炎病情一般较轻，少数有严重脱水或同伴其他系统感染需住院治疗。［4］

3.5小儿出现腹泻时除查大便常规外，还需检测轮病毒和腺病毒，双重检测以确定病原菌和选用药物，轮状病毒、腺病毒感染的患儿大便常可见到脂肪球、很少见到红细胞和白细胞，做病原学诊断是大便的快速轮状病毒、腺病毒抗原检测。可以满足各层次医院对轮病毒和肠道腺病毒进行初步诊断，其检测结果与临床符合率较高，从而可以对临床诊断该病提供了很有价值的依据。

参考文献

[1]SCHMITZ,H.etal.WorldwideepidemiologyinhumanRotavirusinfections,J.Epidemiology,117,pp.455-466

[2]HiroyukiTsutsumi,KazunobuOuchi,MasayaOhsaki,etal.ImmunochromatographytestforRapidDiagnosisofRotavirusRespiratoryTractInfections:CoparisonwithVriusIsolationintissueCulture,JournalofClinicalMicrobiology,37(6)：pp.2007-2009

[3]Al-Yousif,Y.,J.Anderson,C.Chard-Bergstrom,A.Bustamante,M.Muenzenberger,K.Austin,andS.Kapil.2001.Evaluationofalatexagglutinationkit(Virogenotatest)fordetectionofbovineRotavirusinfecalsamples.Clin.Diagn.Lab.Immunol.8:496-498

[4]KiddAH，MedalayCR．Invitrogrowthofsomefastidiousadenovirusesfromstoolspecimens．JClinPathol，1981，34(2)：213—216．