微柱凝集技术交叉配血不合的分析

微柱凝集技术交叉配血不合的分析

梁昭清杨育瑜

梁昭清杨育瑜（广西医科大学第六附属医院广西玉林市第一人民医院输血科537000）

【摘要】目的：探讨应用微柱凝集技术交叉配血不合的凝集情况。方法：使用强生全自动配血系统应用微柱凝集技术进行交叉配血试验，对微柱凝集技术法配血不合的标本，用试管法做间接抗人球蛋白配血试验验证，并做直接抗人球蛋白试验、抗体筛查和鉴定等血清学辅助检查。结果：配血不合的种类主要有IgM、IgG类血型不规则抗体引起的特异性凝集（14／75，18.7%）；自身抗体及冷凝集素等所致的非特异性凝集（61／75，81.3%）。结论：熟练掌握血型血清学专业技术，正确分析配血不合的种类，能提高临床输血的安全性和及时性。

【关键词】交叉配血不合自身抗体不规则抗体微柱凝集技术

【中图分类号】R457.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）12-0025-02

交叉配血试验（CMT）是输血前必须检测的项目，准确的交叉配血是临床安全输血的重要保证，使用盐水法配血只能检测出血清中的IgM抗体；酶法和手工抗人球法虽能检出IgG抗体，但操作复杂、实验时间长，不适合作为常规检测项目普及应用。近年来，国内部分地区开始应用微柱凝集技术（MGT）[1、2]，由于其灵敏度高，因此在配血过程中常出现不同程度凝集的阳性结果，若不能及时作出准确的判断，则会影响到临床输血的及时性和安全性，现将我们在使用微柱凝集技术配血过程中遇到的阳性结果的情况分析和处理方法报告如下。

1材料与方法

1.1.1材料强生全自动配血系统，血型卡、配血卡、低离子液由康臣公司提供。不规则抗体筛查谱细胞、抗人球蛋白血清由上海市血液中心提供，

1.1.2检测对象2010年11月至2011年3月在本院需要输血的住院或急诊患者3348例。

1.1.3标本处理常规EDTA抗凝血，标本试管贴上条码，离心后血浆与血细胞分离清楚，血浆高度至少1.5CM，不能溶血。

1.2.1微柱凝集方法及原理微柱凝集试剂卡中含有IgG、C3d成分，在试剂架装上标本，人工扫描，根据配血系统设置，机器自动把患者和供血员的血浆和红细胞悬液（在稀释板中稀释）按一定比例加入到卡中，经37℃的孵育器孵育后（仪器设置时间为15分钟），系统自动完成从离心到结果判读的全过程。若血清中有完全或不完全抗体，完全抗体直接与相对应的红细胞表面的抗原结合发生凝集，而不完全抗体则会致敏在供血员的红细胞上，再经微柱中的抗人球蛋白搭桥，便凝集成大的凝集颗粒或结成块状，这些颗粒或块状在离心时无法通过微柱凝胶而留在凝胶的上端，为阳性结果，根据微柱上面的凝集颗粒的多少、大小以及散布的程度来判定结果（4+、3+、2+、1+），不凝集的红细胞便完全沉到微柱的底部，为阴性结果。

1.2.2对微柱凝集技术法配血不合的标本，用试管法做间接抗人球蛋白配血试验验证，并做直接抗人球蛋白试验、抗体筛查和鉴定、冷凝集素测定等血清学辅助检查，操作按《全国临床检验操作规程》执行。

2结果

2.1MGT法配血3348例，配血不合75例，其中主侧不合14例，次侧不合56例，主、次侧均不合5例。

2.2根据血清学检查结果，并结合临床资料进行分析，显示引起配血不合的原因为：特异性IgM、IgG类血型抗体，自身抗体和冷凝集素等。其中，特异性凝集14例，占凝集总数18.7%；非特异性凝集61例，占凝集数81.3%。

3讨论

3.1特异性凝集特异性IgM、IgG类不规则抗体引起的配血不合14例，该14例MGT法主侧出现凝集，仪器判读为“3+、2+、1+”。有12例抗体筛查试验结果为阳性，其中，5例为IgG抗-E，1例为IgG抗-C、e，1例为IgG抗-JKa，5例为IgM、IgG抗-Mur，分别为这些患者找到了交叉配血相合且对应抗原阴性的血液输用，无输血不良反应，这些病例多数为有输血史或妊娠史的患者，这类凝集为血型抗原抗体反应的特异性凝集。有2例为ABO新生儿溶血病患儿（母婴血型1例为O-A，1例为O-B），因其游离试验阳性（血清中有IgG抗-A、IgG抗-B），所以导致了主侧凝集，为这类患者选择输用O型红细胞。

3.2非特异性凝集

3.2.1自身凝集造成微柱次侧弱凝集56例，这些病例主侧多为阴性，而次侧均呈现出不同程度的弱凝集（2+、1+、0.5+），凝集颗粒散布在微柱的上半部，而不是在微柱的顶端呈一线状沉淀。不规则抗体筛查试验均为阴性，自身对照出现阳性。此56例有15例肿瘤患者，18例血液病患者，9例是肾病患者，6例胃肠病患者，8例呼吸内科患者；这些患者除了反复多次输血外，可能是由于病毒感染、药物或某些微生物，刺激机体导致免疫调节功能紊乱，使红细胞膜抗原变性，刺激机体产生相应的自身抗体（IgG和补体），这些抗体易吸附在患者的红细胞表面，而MGT法中所用微柱管的试剂中又含有IgG、C3成分，可与吸附在人红细胞的IgG及补体结合，因此发生非特异性凝集反应，这类患者给予洗涤红细胞输注。

3.2.2主、次侧均不合的5例患者，有2例为多发性骨髓瘤，3例为自身免疫性溶血性贫血患者。这5例MGT法配血主、次侧均出现不同程度的凝集，凝集颗粒均匀散布在微柱的上半部分，对这5例标本进行不规则抗体筛查试验，结果均为阴性，直接抗人球蛋白实验阳性，自身对照阳性。多发性骨髓瘤分泌大量M蛋白引起患者体内出现单克隆的异常免疫球蛋白和/或本周蛋白，血清异常球蛋白增多，血液粘稠度增高，显微镜下观察:红细胞扁平面相互重叠在一起呈典型的线形硬币状堆积，即缗钱状凝集,属于假凝集的范畴。自身免疫性溶血性贫血患者容易产生温抗体和冷抗体（冷凝集素），温抗体一般在37℃时最活跃，主要是IgG，少数为IgM，冷抗体在20℃时作用最活跃，主要是IgM。自身免疫性溶血性贫血患者容易引起定血型及配血困难[3]，冷凝集素综合征患者应尽可能避免输血，可输可不输者尽量不输，必须输血时，输入同型的洗涤红细胞，同时，血液制品应复温后再输用，输注速度应缓慢，在输血过程中应密切注意观察[4]。

MGT是近年来兴起的一项免疫学检测新技术，是生物化学凝胶过滤技术、离心技术与免疫化学抗原抗体反应相结合的产物，MGT法省略了洗涤红细胞及结果确认等过程，易于批量操作[5]，但是，由于其灵敏度高，因此在配血过程中常受一些非特异性物质干扰，出现不同程度凝集的阳性结果，影响输血的及时性。作为输血科的技术人员，必须熟练掌握血型血清学专业技术，对于阳性结果要细心观察并熟练进行判定分析，正确分析配血不合的种类，必要时用手工抗人球法复查，并做一些相关的补充试验，如不规则抗体筛查试验，冷凝集素效价测定，自身凝集试验，红细胞放散试验等，根据相关检查结果分清楚真凝集和假凝集现象，及时做出正确的判断，以保证临床输血的及时性和安全性。

参考文献

[1]彭道波，兰炯采，王梁平，等，用微柱凝胶试验进行交叉配血[J].中国输血杂志，2001，14（4）：232.

[2]杨世明，张勇萍，崔颖.微柱凝胶法检测疾病对ABO血型抗原的影响及血清学特性分析[J].细胞与分子免疫学杂志，2005，21（6）：755-759.

[3]张鲁平，李继明，刘雯馨，自身免疫性溶血性贫血引起血型及配血困难2例[J].临床血液学杂志（输血与检验版），2007，4（2）：95-96

[4]王静，沈立松，沈霞.冷凝集素综合征引起交叉配血困难1例报告[J].临床输血与检验，2001，3（2）：57

[5]夏琳，周新，临床输血与输血技术学实验指导[M].北京：人民卫生出版社，2004，56-57