检出Rh抗D抗体引起的新生儿溶血病合并ABO新生儿溶血病1例

检出Rh抗D抗体引起的新生儿溶血病合并ABO新生儿溶血病1例

张理洁

张理洁（福建省龙岩市中心血站福建龙岩364000）

【中图分类号】R722.18【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）23-0086-02

【摘要】目的鉴定并分析一例黄疸送检新生儿的血清学特点,考查是否为母婴血型不合引起的新生儿免疫性溶血性疾病（简称HDN）。方法采用试管法和微柱凝胶法对新生儿进行ABO正定型，Rh（D）血型，直接抗人球蛋白试验，总胆红素检测，游离试验，释放试验以及不规则抗体检测试验等综合鉴定。结果新生儿血型为A型Rh(D)阳性，直接抗人球蛋白试验阳性，游离试验和放散试验均阳性均检出不规则抗D抗体。结论为Rh抗D抗体引起的新生儿溶血病合并ABO新生儿溶血病。

【关键词】母婴血型不合游离试验释放试验Rh新生儿溶血病合并ABO新生儿溶血病

新生儿溶血病源于胎儿从父方遗传到一些母亲没有的红细胞抗原，这些抗原可能遭到母亲免疫抗体的攻击，从而使胎儿红细胞遭到破坏，出现新生儿黄疸、贫血、水肿、肝脾肿大，甚至死胎、新生儿死亡等溶血病的症状及合并症[1]。近日我们对一例疑为溶血病的新生儿进行进一步的血清学鉴定,判断为Rh抗D抗体引起的新生儿溶血病合并ABO新生儿溶血病。现报告如下。

1.病例简介

陈XX之男，性别：男。2011年12月7号ap9:27剖腹产于复旦大学附属妇产科医院。母亲：陈XX，性别：女，O型Rh（－）,G2P2孕37W剖腹产,2011年12月6日于上海血液中心血型参比室检出Rh抗D效价32。父亲：A型Rh（+）

2.试剂与方法

单克隆抗-A、抗-B标准血清(上海血液生物医药有限公司,批号20100706)、单克隆抗-D(IgM)标准血清(上海血液生物医药有限公司,批号20101130)、抗人球蛋白试剂(上海血液生物医药有限责任公司，批号20110105)、抗人球蛋白卡（DiaMed,批号50531.66.09）进口谱细胞（IMmUCOR,批号41243）。

ABO血型正定型，Rh（D）血型，直接抗人球蛋白试验，总胆红素检测，游离试验，释放试验以及不规则抗体检测试验均按标准操作规程[2]和上海血液中心血型参比实验室实验操作规范操作。

3.试验过程记录

3.1标本预处理

3.1.1核对标本信息。将患儿血样离心,分离出血清Ps。

3.1.2在原管加适量生理盐水，将血块用竹签捣碎，使红细胞游离后转移到大试管，用生理盐水洗涤3次。

3.1.3取少量洗涤后的压积红细胞配成1～2%红细胞悬液Pc备用。

3.2血型鉴定：

表1血型鉴定和直抗试验结果

该患儿ABO血型为A型，RhD阳性。直抗结果为2+s，Rh抗体与新生儿红细胞结合的亲和力较强，一般≥1+。怀疑此患者为Rh血型系统抗体引起的溶血，用热放散效果不佳改用乙醚放散。

3.3乙醚放散：

3.4乙醚放散操作步骤：

3.4.1取经洗涤3次的受检者压积红细胞1份加1份生理盐水，2份乙醚，剧烈振荡1～2分钟，然后以3400转∕分1000g离心。

3.4.2离心后分成3层，上层是乙醚，中层是红细胞基质，下层是具有抗体的释放液体（呈深红色）。

3.4.3用吸管吸出底层释放液，置37℃水浴10分钟，以除尽乙醚，再次离心，取上清液即为释放液。

3.5抗体鉴定

表2患者血清和红细胞放散液与谱细胞反应结果

游离试验和释放试验结果为均检出IgG抗D抗体。

3.6排除合并ABO溶血病

当确定新生儿患有Rh新生儿溶血病，同时母婴ABO血型不合，应该在释放游离试验中加入相应的A、B、O细胞检测患儿是否同时患有ABO新生儿溶血病。此时加入的A、B、O细胞必须不含有能与母亲血清中Rh抗体反应的抗原。

表3排除合并ABO溶血病结果记录表。

此处的Ac、Bc、Oc应为Rh（D）阴性红细胞，目的是排除Rh血型系统抗体对实验结果的影响。

此步骤试验结果为合并ABO新生儿溶血病。

4.实验结论

血型：A型Rh（D）：阳性总胆红素：3.7（mg/dl）

直抗试验：阳性游离试验：阳性释放试验：阳性

实验诊断：可证实为Rh抗D抗体引起的新生儿溶血病合并ABO新生儿溶血病。

5.讨论

如果新生儿的直抗呈强阳性，患儿的Rh定型可能受到影响。直抗强阳性的红细胞在某些Rh定型试剂中会出现假阳性的结果，而当患儿红细胞表面的Rh抗原完全被Rh抗体占据时，可能会出现假阴性的试验结果，此时需将细胞作热放散后再定型。

直抗试验和释放试验都是检测红细胞上致敏的血型抗体。ABO直抗都很弱≤1+，而其它血型系统的比较强，特别是Rh新生儿溶血病直抗＞1+，直抗阳性越强，通常意味着新生儿溶血病的病情越重。释放试验敏感度高，释放试验所使用的红细胞比直抗试验多几百倍，也是判定新生儿溶血病最有力的证据。

因为婴儿体内的抗体都是由母亲产生的IgG血型抗体，经过胎盘进入胎儿循环与其红细胞上的相应抗原结合，可以用母亲的血清代替婴儿的血清做抗体筛选试验[2]。

Rh合并ABO新生儿溶血病，母婴之间ABO血型不合，意味着胎儿红细胞进入母亲体内立即被母亲体内的相应ABO抗体破坏，无法有效地刺激母亲体内Rh抗体效价的升高，这种情况下新生儿Rh溶血病往往较轻。

如果ABO系血型不合时，采用O型红细胞和AB型血浆的混合血液换血。Rh血型不合时有两种情况：一种是单纯Rh溶血的情况，采用Rh血型和母亲相同的血型，而ABO血型采用与婴儿同型的全血；另一种是Rh合并ABO溶血，这时只能采用Rh阴性O型红细胞和AB型血浆的混合血液交换输血。对抗D引起的Rh新生儿溶血，可考虑使用Rh阳性红细胞为患儿换血。虽然效果不如Rh阴性血，但是在无法得到Rh阴性血的情况下，可以有效的挽救患儿的生命，并且无严重不良后果[3]。

参考文献

[1]［英］杰夫·丹尼尔主编.朱自严主译.人类血型.2007:47.

[2]王梁平，彭道波，赵晖，等.Rh新生儿溶血病临床调查[J].临床血液学杂志，2009,22（2）：96-97.

[3]余忠清，胡丽华，刘峰，孕妇及胎儿Rh（D/E）免疫性溶血病得诊断与血液治疗[J].中国免疫学杂志，2007，23:164-166.