地氟醚对老年大鼠学习记忆功能的影响

地氟醚对老年大鼠学习记忆功能的影响

龚涛武1刘书明2杨洋1林夏妃1朱昭琼1佘

龚涛武1刘书明2杨洋1林夏妃1朱昭琼1佘廷志2(通讯作者)

（1遵义医学院附属医院贵州遵义563000）

（2遵义医学院附属口腔医院贵州遵义563000）

【摘要】目的：探讨地氟醚对老年大鼠学习记忆功能的影响。方法：老年雄性SD大鼠30只，采用随机数字表法，将大鼠随机分为实验组与对照组。其中实验组吸入8%地氟醚30min，分为4个亚组即麻醉后苏醒2h（Des-2组）、12h（Des-12组）、24h（Des-24组）、72h（Des-72组）；对照组（CON组）吸入1L/minAir+1L/minO230min，每组6只。麻醉前将各组大鼠进行Morris水迷宫定位航行和空间探索适应性训练，记录逃避潜伏期、游泳总路程、平台象限停留时间百分比、平台象限运动距离百分比、平台象限进入次数百分比。麻醉后于各时间点再次进行Morris水迷宫行为学测试，记录指标同适应性训练。结果：与第1d比较，第2、3、4、5d逃避潜伏期、游泳总路程明显缩短，差异具有统计学意义（P<0.05）。麻醉后各组大鼠行为学检测比较差异无统计学差异（P>0.05）。结论：地氟醚麻醉对老年大鼠的短期学习记忆能力未造成损害。

【关键词】地氟醚；学习记忆；认知功能障碍；行为学

【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2018）20-0347-02

随着我国逐渐步入老龄化社会及医疗技术的快速发展，接受手术治疗的老年患者日益增多。老年患者术后中枢神经系统并发症，尤其是术后认知功能障碍（Postoperativecognitivedysfunction，POCD）已成为近年来社会关注的热点问题。地氟醚作为一种新型卤代吸入麻醉剂，因其血气分配系数（0.42）最低，并且具有起效快、苏醒迅速和可控性强的特点，而在临床广泛使用[1]。有关地氟醚的使用是否会导致老年患者手术后发生学习记忆能力的损害受到越来越多的关注。本研究拟借助动物行为学实验，评价地氟醚对老年大鼠学习记忆能力的影响。

1.材料与方法

1.1主要试剂与仪器

地氟醚（批号：H094F622）；Morris水迷宫测试仪（成都泰盟科技有限公司）；Fabius麻醉机，Vamos气体监护仪（Draeger公司，德国）；吸入麻醉箱（自制）。

1.2实验动物及分组

健康雄性SD老年大鼠30只，体重450～550g，20月龄，由重庆第三军医大学实验动物中心提供[SCXK(渝)2012-0005]。采用随机数字表法分为对照组和实验组，其中实验组分为4个亚组即麻醉后苏醒2h（Des-2组）、12h（Des-12组）、24h（Des-24组）、72h（Des-72组），每组6只。

1.3实验方法

麻醉前所有大鼠先进行Morris水迷宫适应性训练。包括定位航行（5d）和空间探索实验（1d）。定位航行实验：设置平台与水面距离为2cm，每天训练4次。大鼠分别于4个象限中点面向池壁入水，限定大鼠在120s内找到并爬上平台休息10s，若120s内未找到，则引导其找到并置于平台上休息10s，记录逃避潜伏期和总路程。空间探索实验：第6天同一时间撤去平台，大鼠从第四象限入水，游泳120s，记录平台象限停留时间百分比、平台象限运动距离百分比、平台象限进入次数百分比。水迷宫适应性训练完成后，CON组于吸入麻醉箱中吸入1L/minAir+1L/minO230min；实验组吸入8%地氟醚30min。该吸入麻醉箱是一自制（75cm×40cm×15cm）的密闭容器，箱内铺垫少量钠石灰以吸收CO2，通过控制挥发罐刻度使大鼠吸入的地氟醚浓度始终维持在8.0%。CON组、Des-2组在分别吸入1L/minAir+1L/minO2和8%地氟醚30min后完全苏醒2h行Morris水迷宫实验；Des-12组、Des-24组、Des-72组麻醉完全苏醒后12h、24h、72h再次行Morris水迷宫实验，所有记录数据同麻醉前。。

1.4统计学处理

采用SPSS17.0统计学软件进行分析，计量资料以（x-±s）表示，组间各指标比较采用单因素方差分析。

2.结果

麻醉前逃避潜伏期与总路程随着时间的推移逐渐缩短；各组原平台象限滞留时间百分比、运动距离百分比、平台进入次数百分比差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1、表2。麻醉后各组大鼠的逃避潜伏期、游泳总路程、平台象限滞留时间百分比、运动距离百分比、平台进入次数百分比差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3、表4。

3.讨论

POCD的发生不仅影响手术后患者的日常生活，而且还增加手术后死亡率，至今其发病机制尚不明确。影响POCD的因素众多，而年龄为其中唯一明确的危险因素，随年龄的增长，POCD的发生率越高[2]。因此，本研究选择老年大鼠为研究对象。

Morris水迷宫是Morris于1981年设计并应用于脑学习记忆机制研究的一种经典实验手段，在AD的基础研究中应用最为普遍。测试内容主要包括定位航行和空间探索实验两部分。实验主要用于评价动物的空间学习记忆功能、回忆探究能力[3]。本实验老年大鼠麻醉前的逃避潜伏期和总路程随着时间的推移逐渐缩短，5d的定位航行适应性训练实验中逐渐形成了稳定的空间学习记忆能力。空间探索实验中的各组行为学检测指标差异无统计学意义，表明各组老年大鼠对已形成的空间学习记忆的提取无影响。

地氟醚作为一种新型吸入麻醉剂，在临床上使用日益增加，地氟醚的使用能否导致POCD已成为人们关注的焦点。目前有关地氟醚麻醉对老年大鼠学习记忆能力是否造成影响报道不一致。本研究中地氟醚使用浓度为临床常用浓度，并参考文献选择8%地氟醚为研究使用浓度。结果显示，老年大鼠吸入8%的地氟醚30min后苏醒2h、12h、24h、72h的逃避潜伏期和总路程与对照组比较差异无统计学意义，各组大鼠空间探索实验的行为学指标比较差异无统计学意义，提示8%地氟醚麻醉30min对老年SD大鼠的学习记忆能力未造成损害。这与CallawayJK等的研究报道结果一致，其研究结果显示老年大鼠在吸入1MAC的地氟醚后学习记忆能力没有下降。而与文献[4,5]的报道不一致，推测可能原因是：研究对象年龄不同；使用的吸入药物浓度和麻醉时间不同所导致。

综上所述，地氟醚麻醉后对老年大鼠的短期学习记忆能力未造成损害。而有关地氟醚在不同吸入浓度、不同吸入时间和长期认知功能方面的影响仍需进一步研究。

【参考文献】

[1]刘莹瑞,段立波.地氟醚药理特性及其临床应用的研究进展[J].吉林大学学报(医学版),2018,44(02):448-454.

[2]刘富兵,尹力,朱宇航,等.异氟醚对老年大鼠学习记忆能力及海马NMDAR1表达的影响[J].实用医学杂志,2016,32(01):34-37.

[3]周娇娇,阙建宇,于雯雯,等.Morris水迷宫检测动物学习记忆水平的方法学[J].中国老年学杂志,2017,37(24):6274-6277.

[4]BinZheng，RenchunLai，JunLi，etal.CriticalroleofP2X7receptorsintheneuroinflammationandcognitivedysfunctionaftersurgery[J].BrainBehavImmun.2017，61:365-374

[5]陈雪,闵连秋.地氟醚对新生大鼠学习记忆功能的影响[J].沈阳药科大学学报,2016,33(12):985-990.

基金项目：遵义医学院附属医院硕士科研启动基金[院宇（2013）12号]；贵州省科学技术厅[黔科合LH(2017)7120号]

作者简介：龚涛武（1984.4-），男，汉族，贵州省安顺市人，主治医师，硕士学位。主要研究方向：吸入麻醉.

通讯作者：佘廷志（1975.7-）男，汉族，贵州省遵义市人，副主任医师，硕士学位。主要研究方向：临床麻醉.