覆盆子化学成分和质量标准研究

覆盆子化学成分和质量标准研究

陈文星

湖南省湘潭县中医医院湖南湘潭411228

【摘要】覆盆子为华东覆盆子干燥未成熟果实，具有缩尿、固精、益肾之效，临床主要应用于阳痿早泄、小便频繁、肾虚遗尿等范畴。现代研究发现，覆盆子中含有黄酮、萜类、挥发油等成分，对延缓衰老、增强记忆力，温肾助阳等具有显著效果。本研究主要对覆盆子化学成分进行分析，寻找其特征形成成分，从而获取快捷且准确的定量、定性方法，制定科学的质量标准，控制药材质量，确保用药安全性。

【关键词】覆盆子；质量标准；化学成分

中药材的质量与中药疗效呈密切相关性，随着中药的现代化发展，控制其疗效，提高中药材质量具有重要价值。中医药为人类健康具有巨大贡献，为促进中药的国际化发展，必须对中药材制定规范的质量标准，促进中药材临床应用规范化[1]。覆盆子在《中国药典》中仅对其药材来源及显微鉴别进行分析，无法很好对其质量进行控制[2]。为促进中药材质量控制的完善，需要从化学成分方面入手，作化学成分研究，随后通过高效液相色谱法对覆盆子成分进行分析，从而判断其质量标准，现进行综述如下：

1覆盆子化学成分分析

覆盆子用50%乙醇及95%乙醇作渗漉提取，溶剂回收后，采取氯仿、石油醚及正丁醇等不同极性的溶剂作萃取，采取现代多中色谱方式作分离及纯化，获得18个化合物，采取波谱技术获得16个化合物结构，有1个为新天然产物，2个为新化合物，有3个为本植物首次分离后获得。

1.1实验材料

华东覆盆子干燥未成熟果实、柱层析硅胶、检验试剂；工业级乙醇；分离使用的石油醚、乙醇及甲醇、正丁醇、环己烷、乙酸乙酯、丙酮、丁醇、甲酸等，均为分析纯；水为蒸汽水。仪器包括：紫外线分析以及红外分光光度计、电子天平、高分辨质谱仪、循环水式真空泵、电热干燥箱、恒温水浴锅。

1.1.2提取分离

提取：使用材料覆盆子10kg、研磨成粉，依次使用95%乙醇与50%乙醇作渗漉提取，渗漉液采取薄膜蒸发仪压缩所形成的浸膏，加水后混悬，加如氯仿、石油醚、正丁醇作萃取，溶剂回收，95%乙醇提取物之功，氯仿萃取90g、石油醚10g，正丁醇萃取物为200g；50%乙醇提取物为正丁醇提取物79g、氯仿提取物26g。

分离：95%乙醇渗漉部分氯仿萃取物90g，使用硅胶柱作分离，石油醚以丙酮梯度洗脱，将各流份收集，作薄层检识，根据结果作合并。作反复硅胶柱分离，经氯仿：甲醇（20：1）、氯仿：乙醇乙酯（10：1）、氯仿：甲醇：甲酸（40：3：1）作洗脱，纯化后，甲醇及甲醇作等重结晶。

1.1.3化学成分检验结果

覆盆子95%与50%乙醇提取部分获得18个化合物，理化性质及波普技术鉴定16个，生物碱类4个，三萜类化合物6个，甾醇类3个，黄酮类5个、脂肪醇类1个，有机酸类1个。新化合物2个月，新天然产物1个；首次分离3个。覆盆子中有黄铜、萜类等化合物，具有极性相近性因素，导致分离难度大；脂肪酸含量较大，薄层鉴别难以获得合适显色剂，致使化合物分离难度增高[3]。

2覆盆子质量标准分析

2.1含量测定

材料为华东覆盆子干燥未成熟果实，使用椴树苷作对照组，经波谱作结构鉴定，检测纯度为99.5%以上；试剂有：薄层层析硅胶板、甲醇、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、冰醋酸及丁醇。

2.1.1样品提取

本品粉末0.5g，共三份，作精密称定，加甲醇25ml，称重后，分别使用超声1h及回流1h，冷浸过夜三种方法，取出后置于温室，分别再称重，使用甲醇弥补重量，摇匀后过滤。量取10ml续滤液，溶剂挥干后，残渣使用10ml蒸馏水作溶解，正丁醇萃取3次，减压蒸干。残渣使用甲醇溶解，定容于10ml容量瓶，0.45μm滤膜内作过滤处理[4]。抽取个试验品10ml，随后进行检测。

2.1.2稳定性试验

抽取10μL椴树苷对照品溶液，制备后，分别在0、1、2、4、8、12、24h进样，作有效测定，峰面积为1.92%，对照品在24h内处于稳定状态。

2.1.3样品含量测定结果

高效液相色谱法对覆盆子中椴树苷含量进行测定，显示，其方法快捷、准确，简单，在覆盆子质量控制中具有较高的科学依据。

2.2鉴别与检查

2.2.1覆盆子薄层鉴别

取本品0.5g粉末，加甲醇25ml，作超声处理30min，经滤过及滤液蒸干，残渣加100ml蒸馏水溶液，正丁醇萃取3次，合并萃取液，每日10ml，减压蒸干，残渣加1ml甲醇溶液，为试验溶液。另选椴树苷为对照品，加甲醇制作为1ml含1ml溶液，作对照品溶液。各吸取两种溶液4μL与2μL，分别在同一硅胶G薄层板上，环已烷、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲酸以10：12：12：1比例作展开剂，随后将其展开、取出、晾干，喷上10%硫酸乙醇溶液，以105℃加热，直至完全显色[5]。

2.2.2水分测定

根据《中国药典》中水分测定方法作测定，取8个地区覆盆子粉末各2.0g，将其平铺于干燥及恒重扁形称量瓶内，作精密称定，将瓶盖打开后，置于105℃烘箱内，作5h干燥，改好瓶盖，转入干燥器内，冷却25min，作精密称定[6]。随后再将其置于105℃烘箱内，做作1h干燥，再进行冷却及称重，两次成分差异不超5mg，根据两次沉重的减失重量判断覆盆子中的水分含量。

从不同区域药品显示，水分含量主要在0.45%~0.59%，因此，覆盆子水平主要在0.60%范围内。

2.2.3灰分测定

选取8个地区的覆盆子粉末分别2.0g，置于恒重坩埚内，作精密称重，随后再置于电炉上，缓慢加热至完全碳化，移至电阻炉，逐渐升温至550℃，完全碳化至恒重，移到干燥器内，冷却，作精密称定，根据残渣重量，判断材料的灰分含量。

从结果显示，灰分含量为4.12~4.78%，因此，覆盆子灰分含量在5.0%内。

3结语

高效液相法对覆盆子椴树苷含量测定，具有稳定性好，准确性高，操作便捷等优势，可作为覆盆子定量控制提供依据的主要方法[7]。因中药材的成分复杂，选择8个地区覆盆子进行分析，从薄层鉴别、水分及灰分方面对覆盆子进行鉴别，值得推广。

参考文献：

[1]程丹，李洁，周斌等.覆盆子化学成分与药理作用研究进展[J].中药材，2012，35（11）：1873-1876.

[2]程丽珍，张玲，谢晓梅等.超高效液相色谱法同时测定覆盆子中3种黄酮成分的含量[J].安徽中医学院学报，2012，31（5）：75-77.

[3]谢一辉，丁妍华，练波等.覆盆子活性成分山奈酚的含量测定[J].江西中医药大学学报，2015，85（2）：77-78，120.

[4]张石群，林辉，苗琦等.覆盆子提取物联合唑类药物抗真菌活性研究[J].中国真菌学杂志，2012，07（1）：4-7.

[5]雷利芳，游静，曾华金等.微孔板结合化学发光法快速测定覆盆子中总糖蛋白的抗氧化活性[J].发光学报，2013，34（5）：650-655.

[6]黄丽萍，熊玉洁，赵梦岚等.覆盆子有效部位改善肾阳虚型痴呆大鼠学习记忆作用机制研究[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（19）：192-196.

[7]邬玉芬，吴俊，喻卫武等.覆盆子总黄酮超声波提取工艺响应面法优化及其抗氧化特性研究[J].浙江林业科技，2014，84（1）：23-27.