慢性乙型肝炎患者血清IL-13、IL-18、TGF-β和MMP-1水平测定的临床意义

慢性乙型肝炎患者血清IL-13、IL-18、TGF-β和MMP-1水平测定的临床意义

朱静肖龙张晓懿

朱静1,2肖龙3张晓懿2

（1苏州大学医学部公共卫生学院江苏苏州215123)

(2扬州大学第五临床医学院常熟二院核医学科江苏常熟215500）

(3扬州大学第五临床医学院常熟二院消化内科江苏常熟215500）

【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）6-0011-02

【摘要】目的探讨慢性乙型肝炎（CHB）患者血清细胞因子及相关指标的变化及其临床意义。方法78例乙型肝炎患者分别设置为轻度（50例）和重度（28例）两组；分别测定患者血清白细胞介素13（IL-13）、白细胞介素18（IL-18）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和金属基质蛋白酶-1（MMP-1）含量。检测方法：血清TGF-β1采用放射免疫分析法检测；IL-13、IL-18和MMP-1含量测定采用酶联免疫吸附试验测定。结果本文结果显示，CHB患者轻度组和重度组血清IL-13水平均非常显著地高于对照组（P<0.01）。IL-18水平轻度组明显高于对照组（P<0.05）,重度组水平升高则更为显著（P<0.01）。TGF-β1含量轻度组略高于对照组，统计差异无显著性（P>0.05）；重度组含量明显高于对照组(P<0.05)。MMP-1水平同TGF-β1的变化基本一致。结论CHB患者血清细胞因子活性的变化，对于肝损伤程度及预后的评估具有一定临床意义。

【关键词】慢性乙型肝炎白细胞介素13，18转化生长因子-β1金属基质蛋白酶-1

CHB是由于嗜肝细胞病毒的长期感染、复制而使机体产生免疫应答，表现为体内T、B淋巴细胞比例及功能调节紊乱，从而导致进行性肝细胞免疫性损害、肝功能障碍。血液中T细胞免疫指标及受体表达明显发生改变，提示这种T细胞的活化激活了机体免疫系统，且处于一种病理性的活跃状态。研究还证实，乙型肝炎病毒(HBV)能激活IL的表达，且IL的变化与乙型肝炎病情的演变、发展关系密切[1]。为共同探讨CHB患者免疫功能及其他伴随标志物的变化关系。本文测定了78例乙型肝炎患者血清IL-13、IL-18、TGF-β和MMP-1的含量，现报道如下。

1对象和方法

1.1对象

1.1.1患者组随机选择2007年8月至2010年5月在我院传染病分院住院的乙型病毒性肝炎患者78例（男60,女18）；年龄17-72岁,平均(37.17±15.02)岁。其中慢性肝炎50例；重型肝炎28例。所有病例入院时检查血清肝功能指标ALT、AST、TBA、AKP均不同程度升高；肝炎病毒学标志乙型均为阳性，2例患者病毒学标志分别呈现乙丙及丁型重叠。肝炎临床诊断均符合2000年西安全国病毒性肝炎学术会议修订《病毒性肝炎防治方案》的标准[2]。在研究过程中患者均无明显的全身性急、慢性炎症感染，也均未使用过免疫抑制剂及免疫增强剂。

1.1.2对照组68名（男54,女14）,年龄18-71岁,平均(36.43±14.79)岁。均为来我院健康体检并确定的健康成人。既往无心、肝、肺、肾等重要脏器疾患，血尿常规、肝、肾功能指标均属正常范围，血清乙肝抗体检测阴性。在研究前及研究中也均未使用过免疫抑制剂及免疫增强剂。本组在性别、年龄等与患者组均具可比性。

1.2方法

1.2.1标本采集抽取CHB患者空腹肘静脉血4ml，2500r/min离心10min分离血清注入试管中，并加盖塞紧，置于-20℃低温冰箱中保存待测；对照组人员的标本采集，于相同条件下抽取健康体检人员空腹肘静脉血4ml,其余操作保存条件同患者组。

1.2.2测定方法血清TGF-β1采用放射免疫分析法测定；IL-13、IL-18和MMP-1含量测定采用酶联免疫吸附试验测定。放射免疫试剂盒由北京科美东雅生物技术有限公司提供。测定仪器为中国科学院上海原子核研究所日环仪器一厂生产的SN-695B型全自动γ-计数器和美国生产的FAMIER-150型全自动酶标分析系统（提供配套酶标试剂）。所有指标的测定均由专职技术人员严格按操作说明书进行。样本贮存后在2周内检测完毕。

1.2.3数据处理所测数据皆以均数标准差（x-±s）表示，组间配对数据差异的比较采用t检验。

2结果

本文结果显示，CHB患者轻度组和重度组血清IL-13水平均非常显著地高于对照组（P<0.01）。IL-18水平轻度组也明显高于对照组（P<0.05）,重度组水平升高则更为显著（P<0.01）。TGF-β1含量轻度组略高于对照组，统计差异无显著性（P>0.05）；重度组含量明显高于对照组(P<0.05)。MMP-1水平同TGF-β1的变化基本一致。

3讨论

人的IL-13仅存在于激活的外周血单核细胞中。IL-13主要由活化的Th2细胞分泌[3]。近年来的研究表明,IL-13和IL-4是人体内发现的仅有的两种可以直接促进IgE合成的细胞因子。所以,在Ⅰ型超敏反应患者血清中,IL-13、IL-4和IgE均呈不同程度的升高。因此,IL-13和IL-4是检测Ⅰ型超敏反应的重要指标。人体内多种T细胞亚群被激活后，IL-13是较早、较长、较大量表达的一种细胞因子。李香淑等[1]的研究证实CHB患者血清IL-13高于正常对照组，且发现其水平与自身的ALT及AST呈正相关。并认为，IL-13在乙型肝炎发病过程中,可以反映肝细胞损伤程度。同时还提示指出,IL-13在CHB患者体内通过诱导IgE的合成,促进Ⅰ型超敏反应的发生。本文结果表明，CHB患者轻度组和重度组血清IL-13水平均非常显著地高于对照组（P均<0.01），重度组水平又明显高于轻度组（P<0.05）。显示IL-13在轻型CHB患者血清中已升高非常显著，说明患者在长期慢性病理进程中很有可能一直存在着Ⅰ型变态反应。在此我们提醒临床，在患者的治疗过程中，是否可以采用必要的脱敏治疗。

研究发现，在细菌、病毒、寄生虫和真菌感染时，血清中可以检测到高浓度的IL-18。有文献报道IL-18具有较多的生物学活性,能介导内毒素对肝组织的损伤,导致类似暴发性肝炎的发作。此外李建华等的研究亦表明，HBV的感染可刺激外周血单个核细胞产生IL-18，IL-18通过增强Th1型细胞反应，分泌多种活性细胞因子并激活自然杀伤细胞(NK)及细胞毒性T细胞(CTL)，增强其细胞毒性作用而导致肝细胞的免疫性杀伤。本文结果显示，IL-18水平轻度组明显高于对照组（P<0.05），重度组水平升高则更为显著（P<0.01）。证实该细胞因子水平参与了慢性肝炎的病理进程。同时提示高浓度的IL-18在慢性重型乙型肝炎患者的免疫损伤中起到了很大作用。本文研究再次证实了文献的结果，然临床对IL水平升高的治疗尚缺乏理想的方法。但我们受文献的启示，是否可尝试应用受体或抗体乃至负性免疫调节细胞因子阻断、拮抗其损伤性免疫反应机制的关键环节，以减轻免疫损伤，我们期待同行的进一步研究报道。

TGF-β是一类具有多种生物学功能的多肽类生长抑制因子，具有抑制T细胞、巨噬细胞增殖和活性等功能，调节多种靶细胞基因的表达，尤其对肝细胞增殖具有强烈的抑制作用。现已公认，TGF-β1是人体中TGF-β超家族成员作用最强的一个，一旦TGF-β1出现异常可导致C-myc基因表达增强，Rb蛋白及P53蛋白的去磷酸化也可被解除，使细胞过度生长，导致正常细胞恶性转变。同时该指标也是衡量肝损伤的有用指标。本文结果显示，TGF-β1含量轻度组略高于对照组，无显著统计差异（P>0.05）；重度组含量则明显高于对照组(P<0.05)；同时，重度组也明显高于轻度组（P<0.05）。其水平的递增关系也与病情的严重程度相一致。提示TGF-β1与肝脏长期的慢性炎症，导致肝纤维化的形成关系密切。其升高的原因可能：由于乙肝病毒长期慢性感染导致的肝脏免疫性炎症,大量纤维化形成细胞通过自分泌及旁分泌作用产生高浓度的TGF-β1，导致血清水平明显升高，而TGF-β1正是强效的致纤维化因子。如此可加快肝脏纤维化的进程，加重肝功能的损害。多项研究共识表明，肝组织中TGF-β1增加是慢性乙型肝炎时肝纤维化形成的重要病理学基础。本研究CHB患者随病情的加重血清TGF-β1水平升高更为显著,我们推测患者血清TGF-β1水平的变化可反映肝脏的慢性炎症进行性向纤维化进展的病理过程。

蛋白酶亦名蛋白水解酶，含有锌或钙离子,主要作用于细胞外基质（ECM）,故名金属基质蛋白酶（matrixmetalloproteinase，MMP），是一组对基质有广泛降解作用和调节基质动态平衡的酶系大家族。MMP来源于巨噬细胞、单核细胞、TB淋巴细胞等,与肿瘤的侵袭转移、关节炎、肾小球肾炎、肝和肺纤维化、腹膜炎等疾病和正常组织的更新、吸收有密切的联系。寇国先等研究了80例CHB患者血清MMP-1水平，发现MMP-1表达增多，与肝纤维化程度、计分、肝组织胶原含量及血清纤维化指标成显著正相关。与本文结果一致，升高的原因可能：①由于乙肝病毒感染后，激活了机体的免疫应答，导致了以细胞免疫为主的免疫性病理损伤，造成长期的慢性渐进性炎症过程，伴随着炎灶区的修复，ECM浓度表达增加，为了有效的降解、清除ECM，致炎症肝组织内MMP-1活性升高，进而溢入血循环。②因长期的慢性肝细胞炎症损伤，导致肝细胞对酶类的降解、清除功能下降，使MMP-1在血循环中的生物半衰期延长、且在血液中逐渐积蓄，造成血清该酶水平升高。据此我们认为，本病患者血清MMP-1的测定，对于初步评估肝功能及其肝组织纤维化的临床价值不容忽视。

参考文献

[1]李香淑,吴龙仁,崔鹤松，等.乙型病毒性肝炎患者血清IL-13、IL-15水平及其比值的临床价值[J].中国免疫性杂志,2007,23（1）：73-75.

[2]中华医学会传染病与寄生虫病学肝病学分会.病毒性肝炎防治方案[J].中华肝脏病杂志,2000,8:324-329.

[3]KroegelC，JuliusPetal.MatthysHetal.Endobronchial，secretionofinterleukin-13foiiowinglocalallergenchallengeinatopicasthma:relationshiptointerleukin-4andeosinophilcounts[J].EuRespireJ,2000,9:899-904.