四种肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒比较研究

四种肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒比较研究

陈良郑阳关文龙

郑州人民医院检验科河南郑州450003

摘要：目的比较四种肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒检测结果的准确性。方法用四种试剂盒平行检测73份阳性样本和84份阴性样本，按照各试剂盒说明书操作和判定结果。结果四种试剂盒检测结果间有显著差异，各试剂盒的灵敏度和特异性呈负相关。结论临床医院需要了解不同检测试剂盒结果的准确性，并结合患者的症状和其他检测结果综合判断是否为肺炎支原体感染，指导合理用药。

关键词：肺炎支原体IgM抗体试剂盒

【Abstract】objectivetocomparethefourspeciesofMycoplasmaneumoniaeIgMantibodydetectionkitdetectionaccuracyoftheresults.WithfourparallelKit73testedpositivesamplesand84-negativesamples，followthekitinstructionsanddeterminetheoutcome.FourkindsofKitthereisasignificantdifferencebetweentheresults，sensitivityandspecificityofthekitwerenegativelycorrelated.Conclusionshospitalsneedtoknowabouttheaccuracyofdifferenttestkitresults，combinedwiththepatient'ssymptomsandothertestresultsdeterminewhetherthepneumoniainfection，guiderationaldruguse.【Keywords】KitforMycoplasmapneumoniaeIgMantibodies

肺炎支原体（mycoplasmapneumonia，Mp）常引发急性呼吸道感染和不典型肺炎，是社区获得性肺炎（CAP）不典型病原体中的主要病原体，近年来其感染呈上升趋势1。由于MP感染在治疗上与其他微生物不尽相同，为避免抗生素滥用，早期、快速、准确的检测更具实际意义2。肺炎支原体检测方法有培养、抗体检测和核酸检测，IgM抗体一般在感染后1周出现，3～4周达高峰，由于Mp的潜伏期为2～3周，当患者出现症状就诊时，IgM水平已很高。因此，IgM抗体阳性可作为急性期感染的诊断指标3。目前国内已经批准了多个商品化肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒，但尚没有文章报道各试剂盒检测结果的准确性，本研究选择4个进口注册的商品化试剂盒，比较检测结果间的差异。

1材料与方法

1.1样本来源

本院2013年9月儿科住院患者中有发热、咳嗽症状的患儿157例，年龄6个月至8岁。

其中73例排除了病毒感染，用青霉素类或磺胺类抗生素治疗无效，用大环内脂类抗生素有效，基本确定为肺炎支原体感染，另84例临床诊断为病毒感染，排除了肺炎支原体感染的可能。所有患者用普通血清管采集分离血清，-20度保存。

1.2试剂盒

呼吸道感染IgM九项联检试剂盒（间接免疫荧光法），西班牙VIRCELL公司生产，郑州安图生物工程股份有限公司注册代理，批号：13M224。

肺炎支原体IgM抗体检测试剂盒（酶联免疫法），芬兰AniLabsystems公司生产，美德声科学技术公司注册代理，批号：167HE1-1

抗肺炎支原体抗体IgM检测试剂盒（酶联免疫吸附法），北京欧蒙生物技术有限公司生产，批号：E111006AF

肺炎支原体抗体IgM检测试剂盒（ELISA），以色列SavyonDiagnostics公司生产，北京荣志海达生物科技有限公司注册代理，批号：262-P0878600

1.3方法

1.3.1四个试剂盒均按照说明书操作，平行检测所有样本。

1.3.2间接免疫荧光试剂盒结果用奥林巴斯BX41荧光显微镜，在400倍视野下观测，细胞胞浆有均匀绿色荧光判为阳性，视野中均为红色细胞，没有典型荧光者判为阴性。

1.3.3ELISA试剂盒操作中用自动洗板机洗板，酶标仪读取吸光度值，按照各自说明书中判定方法判定结果。

2结果

157份样本用四个试剂盒检测结果见表1，四个试剂盒的灵敏度有较大差异，最高为90.4%，最低为58.9%，特异性除一个试剂盒不到90%外，其他均大于96%，各试剂盒的灵敏度和特异性呈负相关。73份阳性样本中有5份样本四个试剂盒检测均为阴性，43份样本四个试剂盒检测均为阳性，其余28份样本四个试剂盒检测结果不一致，见表2。

3讨论

目前临床实验室诊断肺炎支原体感染的主要方法是通过免疫学方法检测血清中的IgG或IgM抗体，已有多个抗体检测试剂盒获得批准上市，本实验用4个进口注册的商品化试剂盒对临床基本确定为肺炎支原体感染的73份患者样本和非支原体感染的84份患者样本进行了平行比对检测。73份感染者样本中有5份样本四个试剂盒均检测为阴性，可能为其他支原体感染，只有43份样本四个试剂盒均检测为阳性。从四个试剂盒的灵敏度和特异性统计结果可以看出，灵敏度和特异性呈负相关，其中VIRCELL公司的间接免疫荧光试剂盒的总符合率最高。这四种商品化试剂盒都是采用将抗原包被在微孔板上的间接法检测样本中的IgM抗体，试剂盒所使用的抗原制备工艺、纯度、吸附剂的吸附能力不同可能是导致检测结果差异较大的主要原因4。所以临床实验室需要首先评估试剂盒的准确性，并结合临床症状和其他检测结果联合诊断。

参考文献：

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[2]袁壮，董宗祈，鲁继荣等.小儿肺炎支原体肺炎诊断治疗中的几个问题.中国实用儿科杂志，2002，17（8）：449～457

[3]BeersmaMFC，DirvenK，VanDamAPetal.Evaluationof12commercialtestsandthecomplementfixationtestforMycoplasmapneumpniaespecificimmunoglobulinG（IgG）andIgMantibodies，withPCRusedasthe"goldstandard"1JClinicalMicrobiology，2005，43（5）：2277～2285

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[5]宋焕景，王桂珍，董占双，刘忠顺，吉兆华，周吉海.肺炎支原体P1重组蛋白的提取纯化及应用研究.微生物学杂志，2007，27（3）：107-110.