贫血在临床检验中的诊断研究

贫血在临床检验中的诊断研究

马刚

马刚(沈阳市沈北新区中心医院110000)

【摘要】目的通过42087例珠蛋白生成障碍性贫血（下称地贫）筛查，经基因确诊筛出70例血红蛋白E（HBE）病。方法现采用近3年27例HBE病分析异常HBE的理化性质。常规血液学检查、硷性血红蛋白电泳、α－和β－地贫基因检测来确诊本文病例。结果有21例HBE杂合子，4例HBE杂合子复合标准型α－地贫，有2例HBE杂合子复合静止型α－地贫，镜下观察红细胞形态异常。结论通过这70例HBE病基因检测，碱性血红蛋白电泳可确诊HBE病。临床表现贫血较轻，在本行政区本室统计HBE病的发生率为0.166％，这样能更好为产前检查、婚前检查提供科学参考。

【关键词】珠蛋白生成障碍性贫血血液临床检验诊断

【中图分类号】R446.11【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）49-0116-01

血红蛋白E（HBE）是最常见的慢速异常血红蛋白之一，是β链第26位谷氨酸被赖氨酸替代（α2β2GAA－AAG），异常血红蛋白E则是β－珠蛋白生成障碍性贫血（下称地贫）中的特殊基因类型。1979年梁植汉等首次经HB化学分析确诊我国有HBE。本科室通过42087例地贫筛查，检出70例HBE，HBE的阳性率高达0.166％，比以往有些报告阳性率高。为了减少以后漏诊现将近3年27例HBE病实验室的有关检查报道如下。

一资料与方法

1、一般资料

2011年3月至2013年9月在本院做产检及婚检的27例经基因确诊为HBE病的患者。

2、检查方法

2.1样本采集。取静脉血2ML，乙二胺四乙酸抗凝。

2.2红细胞平均体积（MCV）测定。采用日本SySTEMKｘ－21自动血细胞分析仪及其配套的稀释液和溶血素试剂测定，实验前严格按照操作规程进行质控。MCV正常值为82～100FL、异常值为小于82FL。

2.3HB电泳分析。采用美国HELEnA公司的SPIFECoMBo－HB电泳仪，使用与仪器配套的SPIFEALKALINE（PH8.6），HB琼脂凝胶板，扫描仪是EPSon公司QuiCk－SCAn2000。血红蛋白A2（HBA2）正常值：2.5％～3.5％。

2.4镜下观察红细胞形态、HEinz小体。取0.0004M美兰液及1.25％亚硝酸葡萄糖液1:1配制，加0.78％NACL按1:9配成反应液，加静脉血1滴水孵育3～6H，取出加10％龙胆紫1滴再水浴30min，湿片镜检红细胞形态。

2.5α－地贫基因诊断。α－地贫试剂由亚能生物技术（深圳）有限公司提供，PCR扩增仪为美国MJPTC－200，严格按说明书进行操作。

二结果

由27例HBE病的常规血液学分析，红细胞（RBC）计数正常，24例HB含量正常（110～160g/L），只有3例轻度贫血（96～106g/L）；MCV全部低于正常值（68.3～82FL）；平均红细胞血红蛋白量（MCH）有17例低于正常值（＜26pg），10例在正常范围内；平均血红蛋白质量（MCHC）有26例正常，只有1例低于正常范围，红细胞分布宽度（RDW－SD）只有2例稍低于正常值（37～54），镜下观察湿片红细胞形态：RBC大小不均，中心淡染区扩大，形态异常，见靶形红细胞，整个细胞形态呈贫血状。碱性血红蛋白电泳的结果27例HBE的结果在21.4％～34.0％之间（实际上HBE＋HBA2）。HBF在0～2.5％之间，HBA在64.5％～78.6％之间，基因突变类型21列HBE杂合子，4例HBE并发，标准型α地贫，2例HBE并发静止型α地贫。详细结果见表1。

表1HBE血液分析结果及HBE基因突变类型

三讨论

1、HBE是世界上最常见最重要的异常血红蛋白之一，也是β－地中海贫血中一种特殊类型。本科室经过42087例2岁以上人群血红蛋白分析筛查得出HBE病的发生率为0.166％，明显高于以往HBE发生率为0.103％的报道。

2、从表1显示常规血液学分析HBE病基本上都在正常范围内，虽然血液学数据分析细胞贫血很少，但MCV和镜下观察红细胞形态均异常。碱性血红蛋白电泳HbE与HbA2重叠，扫描后浓度明显高于HBA2，平均为30.9％。从上表对HBE值的统计，HBE杂合子HBE的百分比明显高于复合α－地贫的HBE病。与β－地贫的区别是，β－地贫的HBA2浓度一般低于8％，若该值超过10％则复合HBE存在这一论点与本实验结果相符。根据本科室做的大量地贫筛查总结得出碱性血红蛋白电泳、MCV、镜下红细胞形态，根据这3项理化检查可诊断HBE病。

3、筛查出HBE再经基因确诊后21例为BE位点突变基因型HBE杂合子，4例BE位点突变基因型HBE杂合子并发SEA基因型A－标准型地贫，2例BE位点突变基因型HBE杂合子并发4.2型、3.7型A－静止型地贫各1例。这个结果显示HBE杂合子占多数，构成比为78％。临床症状不明显，因此在我区预防工作显得尤为重要，积极开展社会宣教，人群筛查，遗传咨询及指导和产前诊断等工作。通过社会的努力降低地贫的发生率。

参考文献

[1]李强辉,周维模,龙雪峰,郭鹏.腹腔镜脾切除术治疗儿童地中海贫血23例[J].中华临床医师杂志(电子版).2011(17)

[2]王明月,赖永榕.血红蛋白E复合β地中海贫血[J].医学综述.2009(06)