抗-HCV与HCV-Ag联合检测的应用评价

抗-HCV与HCV-Ag联合检测的应用评价

聂凤英

聂凤英（河南省濮阳市中医院检验科河南濮阳457000）

【中图分类号】R373.2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）16-0117-02

【摘要】目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原与HCV抗体联合检测在筛查丙型肝炎的应用价值。方法统计HCV-Ag阳性标本的HCV逆转录PCR检测结果.结果HCV-Ag阳性标本经PCR测定HCVRNA阳性37例.结论HCV-Ag的检出时间早于抗体.HCV-Ag和HCV抗体联合检测,缩短了检测窗口期(PWP),有助于丙型肝炎的早期诊断。

【关键词】HCV核心抗原抗-HCV酶联免疫吸附测定;丙型肝炎

HCV在宿主外周血中含量及病毒抗原的含量非常低，常规方法很难直接检测。利用重组HCV-Ag开发的抗-HCV抗体检测技术，目前，检测的特异性有所提高。但是，在HCV感染后至抗HCV抗体产生之前还有一段约40-70天的较长时期，称为感染后血清阳转前的窗口期（PWP）。如果仅仅检测抗-HCV就会漏检，不能实现丙型肝炎的早期诊断，同时给临床输血带来潜在威胁。HCV-Ag核心抗原作为HCV感染者体内出现的早期感染的标志,几乎与HCVRNA同时出现.为了评价HCV-Ag检测对丙型肝炎早期诊断的价值,本文对门诊体检人群及住院病人进行HCV抗体初检、复检,HCV-Ag的检测,HCV-Ag阳性标本进行HCV逆转录PCR检测,现将结果报道如下

1资料与方法

1.1一般资料统计我院2010年1月至2011年12门诊体检及住院病人的HCV-Ag、抗-HCV抗体，HCVRNA检测情况.总标本9650例，标本包括抗-HCV阳性血清标本，抗-HCV可疑血清标本，单项丙氨酸氨基转移酶(ALT)增高的标本，HCV-Ag、抗-HCV抗体和ALT均阴性的标本。抗-HCV阳性标109例,抗-HCV可疑标本78例,单项丙氨酸氨基转移酶增高的标本65例，HCV-Ag阳性标本经PCR测定HCVRNA阳性37例。

1.2方法

1.2.1抗HCV抗体检测采用郑州安图生物公司生产的抗-HCV抗体检测试剂盒进行初检，采用厦门英科新创的公司生产的抗-HCV抗体试剂盒进行复检。按说明书上的方法操作。抗-HCV抗体初检、复检均阳性者为抗-HCV阳性血清标本，初检或复检抗-HCV抗体单项结果阳性者为抗-HCV可疑血清标本。

1.2.2HCV-Ag检测采用湖南景达制药有限公司生产的HCV-Ag酶联免疫试剂盒，按说明书方法操作。

1.2.3HCVRNA检测送郑州金域检验。

1.3仪器奥地利的2010酶标仪，酶联免疫吸附测定法。

2结果

共检测了"9650例血清标本，109例HCV阳性血清标本中检测出HCV-Ag阳性20例,78例抗-HCV可疑血清标本中检测出HCV-Ag阳性19例,65例单项ALT增高的标本中检测出HCV-Ag阳性2例,9398例正常标本中未检出HCV-Ag阳性.HCV-Ag阳性标本经PCR测定,HCVRNA阳性37例，HCV-Ag与RNA符合率为90.0%（37/41)。HCV-Ag检测和RNA检测的阳性率差异无统计学意义(P〉0.05),见表1.

表1不同血清标本HCV-Ag与HCVRNA检测结果

3讨论

丙型肝炎是由丙型肝炎病毒HCV感染引起的传染病。HCV是主要经被污染的血液和血液制品传播的病毒，是丙型病毒性肝炎的病原体。目前被认为是造成大部分血液及社区传染性非甲非乙型肝炎的主要原因，也是引起输血后肝炎主要的致病因子。虽然多数HCV感染者无症状，但感染HCV后形成慢性肝炎的概率很高，且有相当比例的患者会发展成肝硬化、肝癌，严威胁人体健康。尽早检出HCV感染者是实现丙型肝炎早期诊断、阻断HCV传播的重要途径。

长期以来，临床上习惯依赖于检测抗-HCV作为诊断丙型肝炎的根据。实际上抗-HCV检测的仅仅是HCV的表达产物之一，反映的是机体对HCV的免疫反映状态，抗-HCV是在血清中保留时间最长的免疫学指标，但并不能全面反映肝炎患者体内HCV的感染情况。况且抗-HCV阳性病例中，有相当大一部分HCVRNA是阴性的。原因可能是抗-HCV呈假阳性，也可能与HCV病毒学症消退或病毒基因变异有关；或者在核酸提取时，核酸量太少而提取失败；也可能存在某些抑制扩增的因素存在，影响到核酸的检出。HCV感染者在感染后数周内血清HCV抗原出现,HCVRNA转阳。随后ALT增高，抗-HCV抗体出现，在HCV感染后至抗-HCV抗体产生之前，还有一段感染后血清阳转前的窗口期（PWP）,为了降低PWP感染的危险，缩短PWP，以实现HCV感染的早期检测，国外学者对病毒核酸、HCV-Ag检测进行了评价，通过阳转系列血清对抗-HCV抗体、HCVRNA和HCV-Ag出现时间进行比较，HCV-Ag的平均检出时间只比HCVRNA晚约1天。

在临床应用价值上抗-HCV抗体、HCVRNA和HCV-Ag检测比较如下:由于HCV感染通常是持续性的终生感染，临床诊断仍以ELISA法检测抗-HCV抗体为主，特点是敏感性高，方法操作简单，所需费用少。但由于各厂家试剂间的灵敏度和特异性存在着一定差异,从而导致抗HCV抗体检测结果不一致.在ELISA法检测抗-HCV抗体检测试剂盒中,由于酶标抗体是广谱抗人IgG抗体,对吸附在固相上的IgG抗体无筛选作用,降低了检测的特异性.一些慢性感染性疾病、自身免疫性疾病，由于患者体内IgG含量较高，容易产生假阳性结果。为了使血清样品中非特异性IgG含量尽量减少，降低非特异性吸附，一般需要稀释样品，这就降低了样品中特异性抗体的浓度，使方法灵敏度下降。HCVRNA检测存在以下问题，检测操作复杂、影响因素多、需专用设备、检测耗时长、对标本和操作的要求较高、检测结果假阳性问题较难解决。而HCV抗原检测耗时短，其方法与常规ELISA法相似，不用添加仪器设备，大大缩短了窗口期（PWP）.但是当机体出现抗-HCV抗体之后,体内HCV-Ag和HCV抗体相结合,导致抗原检出率降低或不能被检出.因此,HCV-Ag可应用于HCV感染的早期诊断.HCV-Ag和抗-HCV抗体联合检测,有助于实现丙型肝炎的早期诊断，大大降低漏检率。

参考文献

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