罗洪顺1曾昭智2
(1东莞市亚洲制药有限公司广东东莞516160)
(2广东药学院实验动物中心广东广州510006)
【摘要】目的探讨心脑血康胶囊改善微循环和降血脂功能的药理作用。方法通过显微镜观察小鼠耳廓微循环,根据微血管口径的变化,判断药物改善机体微偱环的作用;采用喂养大鼠高脂饲料的方法建立实验性高脂血症模型,观察药物的降血脂及其抗氧化的作用。结果心脑血康胶囊5.12g生药/kg剂量能明显扩张小鼠耳廓微血管(p<0.05);2.56g生药/kg剂量能显著改善高脂血症大鼠的体重(p<0.05),降低高脂血症大鼠血清TC、TG、LDL-C(p<0.05),升高HDL-C(p<0.05),降低大鼠血清MDA含量(p<0.05),提高SOD、GSH-Px活性(p<0.05~0.01),其中1.28g生药/kg剂量能明显降低MDA含量和GSH-Px活性(p<0.05)。结论心脑血康胶囊能扩张小鼠耳廓微循环,改善机体微循环;对实验性高脂血症大鼠具有一定的降血脂和抗脂质过氧化作用。
【关键词】心脑血康胶囊高脂血症降血脂抗脂质过氧化改善微偱环
【中图分类号】R965【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2013)22-0054-02
心脑血康胶囊由水蛭、田七、丹参、冰片等多味药材组成的中药制剂,具有活血祛瘀,降血脂、抗氧化、改善机体血液偱环的功效。本实验采用对小鼠耳廓微循环和大鼠高脂血症模型的影响[1-3],探讨心脑血康胶囊改善机体微循环、降血脂及其抗脂质过氧化状态的作用。
1材料
1.1试剂与药物甘油三酯(TG)试剂盒(批号201008)、总胆固醇(TC)试剂盒(批号201011)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)试剂盒(批号201006)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)试剂盒(批号201004),均为中生北控生物科技股份有限公司产品,超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(批号20110331),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)试剂盒(批号20110615)丙二醛(MDA)试剂盒(批号20110339),均为南京建成生物工程研究所产品。心脑血康胶囊浸膏,每g相当于2.56g生药,批号20110225,由东莞市亚洲制药有限公司提供;复方丹参滴丸,规格27mg/丸,批号100321,天津天士力制药股份有限公司;辛伐他汀,规格20mg/片,批号100495,杭州默沙东制药有限公司。
1.2主要仪器全自动生化分析仪(HITACHI-7080型,日本),解剖显微镜(XTL-1型,南京江南永新光学有限公司),电热恒温水浴锅(DK-S26型,上海精密实验设备有限公司),低温高速离心机(TGL-16G型,上海安亭科学仪器厂),紫外-可见分光光度计(UV-1800型,北京瑞利分析有限公司)。
1.3动物NIH小鼠,SPF级,体质量18~22g,由广东省医学实验动物中心提供,动物质量合格证SCXK(粤)2008-0002;SD大鼠,SPF级,体质量180~220g,由广东省医学实验动物中心提供,动物质量合格证SCXK(粤)2008-0002;各动物正常饲养3天后供试验用。
1.4饲料基础饲料:广东省医学实验动物中心提供。高脂饲料:按基础饲料86.7%、猪油10%、胆固醇3%、胆酸盐0.2%、丙硫氧嘧啶0.1%标准,委托广东省医学实验动物中心加工制成。
2方法
2.1对小鼠耳廓微循环的影响
取NIH小鼠60只,雌雄各半,随机分为空白对照组、复方丹参滴丸组(3.6g生药/kg)和心脑血康胶囊低剂量组(1.28g生药/kg)、中剂量组(2.56g生药/kg)、高剂量组(5.12g生药/kg),共5组,每组12只。每天灌胃给药1次,连续7天,于末次给药后2小时将各组动物用腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg进行麻醉,用医用橡皮膏贴在耳廓上去毛,将小鼠腹向下固定在小鼠观察台上,耳廓表面滴加少许液体石蜡。将观察台置于解剖显微镜载物台上,在透射光下,用15×5倍镜先观察并记录小鼠耳廓细动脉、细静脉管径,然后滴加0.1%去甲肾上腺素(NA)一滴,再观察其耳廓细动脉、细静脉管径,比较同一部位滴加NA前后耳廓微循环毛细血管口径的变化。
2.2对实验性高脂血症大鼠血脂水平及抗脂质过氧化作用的影响
取SD大鼠60只,雌雄各半,按体重随机分成正常对照组、模型对照组、阳性药物对照组(辛伐他汀0.004g/kg)和心脑血康胶囊低剂量组(0.64g生药/kg)、中剂量组(1.28g生药/kg)、高剂量组(2.56g生药/kg),共6组,每组10只。自实验开始,模型对照组、辛伐他汀阳性药物对照组和心脑血康胶囊3个剂量组,每只动物每天给予等足量高脂饲料,正常对照组以相同方式给予基础饲料,饲料给予量与高脂饲料相同。同时给药组大鼠每天灌胃给予相应剂量的药物,给药容积为10ml/kg,正常对照组和模型对照组给予等体积的生理盐水。连续给药30天,每周称体重1次,于末次给药后1小时(实验前禁食不禁水12小时)从大鼠眼眶静脉丛取血,离心、分离血清,在全自动生化分析仪上测定TC、TG、HDL-C、LDL-C含量;在紫外-可见分光光度计上测定MDA含量和SOD、GSH-Px的活性。
2.3统计学处理实验数据均以均数±标准差(x-±s)表示,用spss13.0forwindows统计软件包进行ANONA单因素方差分析。p<0.05为差异有显著性统计学意义。
3结果
3.1对小鼠耳廓微循环的影响
从表1结果可见,心脑血康胶囊高剂量能减轻由NA诱导的血管收缩而引起的微循环障碍,与空白对照组比较有显著性差异(p<0.05)。由此表明,心脑血康胶囊可能具有明显的改善微循环的作用。
表1心脑血康胶囊对滴加NA前后小鼠耳廓细动、静脉差值的影响(x-±s)
注:与空白对照组比较,*:p<0.05,**:p<0.01。
3.2对高脂血症大鼠体重的影响
从表2结果可见,与正常对照组比较,模型对照组大鼠体重从给药2周开始显著降低(p<0.05)。与模型对照组比较,各组大鼠体重均有不同程度的增长,心脑血康胶囊高剂量组在给药3周后大鼠体重明显增长,具有统计学意义(p<0.05);低、中剂量组大鼠体重虽有增长但不明显。结果表明,心脑血康胶囊可能对饮食性高脂血症大鼠体重的降低具有明显的改善作用。
表2心脑血康胶囊对高脂血症大鼠体重的影响(x-±s)
注:与正常对照组比较,△:p<0.05;与模型对照组比较,*:p<0.05。
3.3对高脂血症大鼠血脂水平的影响
从表3结果可见,与正常对照组比较,模型对照组大鼠血清TC、TG、LDL-C水平明显升高,HDL-C水平明显降低,具有显著性差异(p<0.01),说明高脂血症模型造模成功。与模型对照组比较,心脑血康胶囊高剂量血清TC、TG、LDL-C的含量显著降低(p<0.05),HDL-C的含量显著升高(p<0.05)。结果表明,心脑血康胶囊能显著地抑制大鼠高血脂水平的升高,可能对大鼠高脂血症有明显的防治作用。
表3心脑血康胶囊对实验性高脂血症大鼠血脂水平的影响(x-±s)
注:与正常对照组比较,△△:p<0.01;与模型对照组比较,*:p<0.05,**:p<0.01。
3.4对高脂血症大鼠血清中MDA含量和SOD、GSH-Px活性水平的影响
从表4结果可见,与正常对照组相比,模型对照组大鼠血清MDA含量明显升高(p﹤0.01),SOD和GSH-Px水平明显降低(p﹤0.01)。表明造模后的高脂血症大鼠伴有脂质过氧化损伤。心脑血康胶囊中、高剂量组可明显降低大鼠血清MDA含量,升高GSH-Px的活性(p﹤0.05~0.01);其中高剂量组还能明显升高SOD活性(p﹤0.05)。结果表明,心脑血康胶囊能降低高脂血症大鼠血清MDA的含量,提高SOD和GSH-Px的活性,提示心脑血康胶囊可能通过抑制机体脂质过氧化作用,增加抗氧化能力,以减轻由高脂血症引发的氧化损伤。
表4心脑血康胶囊对饮食性高脂血症大鼠SOD和MDA的影响(x-±s)
注:与正常对照组比较,△△:p<0.01;与模型对照组比较,*:p<0.05,**:p<0.01。
4讨论
心脑血康胶囊具有活血祛瘀,改善机体微偱环、降血脂、抗氧化等功效,主要用于气血瘀滞、高脂血症引起的心脑血管疾病。本实验结果表明,心脑血康胶囊5.12g生药/kg剂量能明显扩张小鼠耳廓微循环,具有一定的扩张微血管、改善机体微循环的作用。通过观察心脑血康胶囊对实验性高脂血症大鼠模型的影响试验显示,心脑血康胶囊2.56g生药/kg剂量能显著改善高脂血症大鼠的体重,降低高脂血症大鼠的血脂水平,降低血清MDA的含量和提高SOD、GSH-Px的活性,其中1.28g生药/kg剂量也能明显降低MDA的含量和GSH-Px的活性,具有一定的调节血脂、抗脂质过氧化的作用,提示心脑血康胶囊可能通过抑制机体脂质过氧化,增加机体清除氧自由基的能力,以减轻由高脂血症引发的氧化损伤。
参考文献
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