HP抗体免疫印迹法分型对胃肠道疾病的诊断价值

HP抗体免疫印迹法分型对胃肠道疾病的诊断价值

袁雪菲韩娟邵迎春杨慧程云飞孟艳任传路

（解放军第100医院检验科江苏苏州215007）

【摘要】目的：用免疫印迹法对幽门螺杆菌抗体（HelicobacterPylori，Hp）分型（Ⅰ型和Ⅱ型）的结果进行比较分析。方法：搜集我院100例被诊断为胃肠道不适(包括慢性胃炎，胃溃疡，胃癌等)患者和100例无症状的健康体检者血清，采用Hp分型检测试剂盒对幽门螺杆菌抗体Ⅰ型和Ⅱ型进行统计结果：被诊断为胃肠道不适患者HpⅠ型抗体阳性率明显高于健康体检者(P<0.01)，胃肠道疾病患者HPⅡ型抗体阳性率低于健康体检者阳性率（P<0.05)结论：免疫印迹法可以作为检测幽门螺杆菌的初筛方法，并且HpⅠ型（CagA\VacA）比HpⅡ(UreB\UreA)型对胃肠道疾病的诊断和治疗具有更高的临床价值。

【关键词】免疫印迹法；幽门螺杆菌；胃肠道疾病

【中图分类号】R573【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）01-0188-02

ThevalueofimmunoblottingintypingHelicobacterPyloriantibodyfortheDiagnosisofGastrointestinalDiseases

YuanXuefei,HangJuan,ShaoYingchun,YangHu,ChengYunfei,MengYan,RenChuanlu*

Depart.ofLab.OfNo.100hospital,Suzhou,215007,China

【Abstract】ObjectiveToanalyzeandcomparethetype(typeⅠandtypeⅡ)ofHelicobacterpyloriantibody(Hp)byimmunoblottingmethod.Methods100patientsdiagnosedasgastrointestinaldiscomfort(chronicgastritis,gastriculcer,gastriccancerandsoon)and100asymptomatichealthypeoplewereselceted,usingthedetectionkitfortypingHpantibodyoftypeⅠandtypeⅡ.ResultsDiagnosedwithgastrointestinaldiscomfortinpatientswithtypeⅠantibodypositiverateismorehigherthanhealthysubjects(P<0.01).ThepositiverateoftypeⅡantibodyinpatientswithgastrointestinaldiseasesislowerthaninhealthypersons(p<0.05)ConclusionImmunoblottingmethodcanbeusedasascreeningmethodintypingdetectionofHpinfection.HptypeⅠ(CagA\VacA）hashigherclinicalvalueinthediagnosisandtreatmentofgastrointestinaldiseasesthantypeⅡ(UreB\UreA).

【Keywords】Immunoblotting;Helicobacterpylori;Gastrointestinaldiseases

幽门螺杆菌是慢性活动性胃炎，消化性溃疡以及胃癌等胃肠道疾病的重要致病因子[1-2]。人群中Hp的感染已非常普遍，越来越受到人们的重视。有文献报道，目前正常人群的感染率已超过70%[3-4]，因此找到具有致病性的Hp分型对临床上早期诊断和治疗具有重大意义，以减少误诊和漏诊。本研究是为了探讨Hp抗体分型的免疫印迹法可以作为检测幽门螺杆菌感染的筛查方法，HpⅠ型（CagA\VacA）阳性对胃肠道疾病的诊断和治疗具有重要价值。

1.资料与方法

1.1一般资料

随机抽取2013年1月至2014年11月到我院100例被诊断为胃肠道不适患者和100例健康体检人群。男86例，女114例，年龄均在23～65岁，其中慢性胃炎49例，胃溃疡28例，胃癌23例。

1.2试剂

深圳伯劳特生物制剂有限公司的幽门螺杆菌抗体分型检测试剂盒（免疫印迹法）。

1.3方法

用带有分离胶的真空采血管抽取静脉血2ml，待凝固后分离血清，血清标本保存于2～8度冰箱，该试剂盒检测的结果不受自身抗体，溶血，脂血，黄疸等的影响。严格按照试剂盒操作步骤进行检测，最后判读结果。

阴性结果：显示区带仅出现质控带，未见任何一条阳性区带，表示被检者血清中无Hp抗体。Ⅰ型Hp抗体阳性：CagA、VacA区带中任意一种或两种同时出现。Ⅱ型Hp抗体阳性：仅UreA和UreB区带中任意一种或同时出现，未见CagA、VacA区带。

2.结果

2.1对我院被诊断为胃肠道不适患者和无症状的健康体检者的Hp分型进行比较，测出CagA、VacA、UreA、UreB4种分型。被诊断为胃肠道不适患者的HpⅠ型阳性率明显高于健康体检者，而健康体检者的HP2型阳性率又高于胃肠道不适患者,结果差异显著，（P<0.05）见表。

2.2对两组的阳性率，灵敏度进行比较，通过本实验研究统计胃肠道不适患者的HpⅠ型阳性率达到66%，健康体检者的HpⅡ型阳性率达到72%（表1）。而根据本试剂盒产品性能评价，与尿素呼吸试验（UBT）结果（认为系“金标准”）[5-6]对比，敏感性达到96.7%,说明其敏感性较好。

3.讨论

幽门螺杆菌是一种高度适应的只能生活于胃粘膜粘液内层的细菌，胃窦为其定植的最佳部位。Hp感染与慢性浅表性胃炎或萎缩性胃炎之间的病因关系已充分确立。流行病学资料还表明胃癌发病率与其也有很大相关性[7]。

本实验统计Hp感染的胃肠道不适患者，其血清Hp抗体显示可能有一种或两种菌型感染，该组HpⅠ型阳性率占69%，明显高于无症状健康组27%。说明在Hp现症感染中以HpⅠ型为主，也有极少部分抗体阴性。而无症状的健康体检组HpⅡ型阳性率72%，高于胃肠道不适组44%。说明Hp抗体分型可以用于筛查Hp感染的胃肠道不适患者，具有临床指导意义。

近年来多数研究表明与空泡形成毒素（VacA）和细胞毒素相关蛋白(CagA)相关的Ⅰ型Hp感染致病力强，感染后易引起胃部疾病，与疾病的关联程度高。感染后极易引起慢性胃炎，胃溃疡，十二指肠炎，胃消化不良等症状，应该予以重视。而与尿素酶亚单位A/B抗体（UreA/UreB）相关的Ⅱ型HP感染致病性弱，一般不易引起胃部严重疾病，与疾病关联程度低，但是也应该注意防范，定期复查。经临床验证与尿素呼吸试验（UBT）结果对比，敏感性达到96.7%。所以综上认为免疫印迹法可以作为幽门螺杆菌的感染初筛方法,能更有效的预防胃肠道疾病。

有文献显示，Elisa法检测患者对CagA重组片段的免疫反应，发现75.3%的胃及十二指肠病患者血清抗体阳性，100%的十二指肠溃疡者血清抗体阳性[8]。说明Ⅰ型Hp容易引起溃疡，癌症等，而Ⅱ型Hp多表现为无症状的胃部不适，胃炎等情况[9]，综上所述幽门螺杆菌抗体分型中的Ⅰ型致病性更强。

【参考文献】

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[2]XiaHH,YuWongBC,TalleyNJ,etai.Helicobacterpyloriinfectioncurrenttreatmentpractice[J].ExpertOpinPharmacother,2001,2(2):253-266.

[3]钟华敏，骆明勇，谢永强等.某地区儿童幽门螺杆菌感染病原学研究[J].国际检验医学杂志，2011,32（13）：1414-1416.

[4]张凤娟，江月萍，赵清喜.幽门螺杆菌vacA及cagA基因型与胃疾病的关系[J].青岛大学医学院学报，2010,46（2）:98-100.

[5]杨才明，陈玉忠.～(13)C-UBT和～（14）C-UBT等七种诊断幽门螺杆菌感染检测技术比较与评价[J].标记免疫分析与临床，2012,19（2）:126-128.

[6]胡伏莲，周殿元，贾博琦.幽门螺杆菌感染的基础与临床[M].北京：中国科学技术出版社，1997:：152-153.

[7]周丽雅，宋志强.幽门螺旋杆菌感染与胃癌[J].中华内科杂志，2014,53（5）：349-351.

[8]KuipersEJ,Perez-PerezGI,MeuwissenSG,etal.Helicobacterpyloriandatrophicgastritis:importanceofthecagAstatus[J].JNatlCancerInst,1995,87(23):1777-1780.

[9]BackertS,MoeseS,SelbachM,etal.Phosphorylationoftyrosine972oftheHelicobacterpyloriCagAproteinisessentialforinductionofascatteringphenotypeingastricepithelialcells[J].MolMicrobiol,2001,42(5):631-644