炎症因子IFN-γ和GM-CSF在EV-71相关重症手足口病早期诊断中的意义

炎症因子IFN-γ和GM-CSF在EV-71相关重症手足口病早期诊断中的意义

王海彬郭钧（通讯作者）仇卫兵胡利敏

王海彬郭钧（通讯作者）仇卫兵胡利敏

(宿迁市泗阳县人民医院儿科江苏宿迁223700)

【摘要】目的:EV-71感染引起的手足口病发病率高，可引起神经系统等并发症，造成高死亡率。本研究拟探讨某些炎症因子与重症手足口的发生相关。方法:将79例患儿分为EV/CA/EV+CA/其他病毒感染组（A/B/C/D组），同时选用10例正常体检患儿作为对照组（E组）。通过RT-PCR方法检测受试者咽拭子及血清中EV-71、CA-16及其他病毒的核酸表达，通过酶联免疫吸附法检测血清中如白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、集落刺激因子(GM-CSF)和干扰素γ(IFN-γ)分泌情况。结果:IL-1β,IL-6,IL-10和TNF-α在A/B/C/D组内无明显差异；GM-CSF及IFN-γ在A组较B/C/D组明显升高。结论:炎症因子IFN-γ和GM-CSF可应用于由EV-71感染引起的手足口病的早期诊断。

【关键词】EV-71；手足口病；炎症因子

【中图分类号】R725.1【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）09-0234-03

ThesignificanceofinflammatorycytokinesIFN-γandGM-CSFintheearlydiagnosisofsevereHFMDeffectedbyEV-71virus

WangHaibin,GuoJun（Communicationauthor）,QiuWeibing,HuLiming.

Departmentofpediatrics,SiyangPeople'sHospital,JiangsuShuqian,223700,China

【Abstract】ObjectiveEV71ledtooutbreaksofhand,foot,andmouthdisease(HFMD)withseveremortalitywithahighrateofneurologicalcomplications.OurstudywastoinvestigatetherelationshipbetweeninflammatorycytokinesandsevereHFMDinducedbyEV-71.Methods79patientswerepidedintoA/B/C/Dgroupsbythedifferentviruses:EV/CA/EV+CA/othervirus.Wedidthe10electionofhealthychildrenasnormalcontrolgroupfromphysicalexamination.WeusednasopharyngealswabsandserumsofparticipantstoexamineEV71,CA16,andotherpathogensbyRT-PCRkits.CytokinesofserumsamplesofparticipantsweredetectedusingELISAkits.ResultsLevelsofIL-1β,IL-6,IL-10andTNF-αhavenosignificantdifferenceamongA/B/C/Dgroupsinside;levelsofGM-CSFandIFN-γinAgrouparesignificantlyhigherthanB/C/Dgroups.ConclusionInflammatorycytokinesIFN-γandGM-CSFcanbeusedforearlydiagnosisofHFMDinfectedbyEV-71.

【Keywords】EV71;HFMD;nflammatoryfactors

手足口病是由肠道病毒引起的发热出疹性疾病[1]。EV-71引起的多伴有高热及肢体运动障碍，更易出现脑干脑炎及肺水肿等并发症[2，3]，严重时可导致患儿死亡[4]，因此重症患儿的早期诊断尤为重要。研究发现IL-6、TNF-α及IL-1β与脑干脑炎的发生相关[2]。在肺水肿手足口患儿血清中观察到IL-10及IFN-γ显著升高[3]。GM-CSF是判断疾病进展及指导早期治疗的关键指标[5]。此次研究该六种炎症因子水平变化与手足口病严重程度的相关性，拟为临床诊断及治疗提供更好的方法。

1.材料及方法

1.1病人采集

我们选择了2013年5月到6月之间在我院住院的79例手足口患儿作为实验组，将EV/CA/EV+CA/其他病原体感染的分别作为A/B/C/D四组，各有14、13、33、19例患儿。同时选取了正常体检的10名儿童作为对照组。五组儿童年龄及性别统计无显著差异。（见表1）

1.2病原学及炎症因子的检测

通过RT-PCR试剂盒（Takara，日本）检测受试者咽拭子和血清中EV-71、CA-16及其他病毒表达情况，用ELISA试剂盒（(Quantikine，R&DSystems，明尼阿波利斯，美国）检测炎症因子水平。所有标本均在患儿入院时采集，储存在4℃12小时后检测。

1.3统计分析

应用SPSS20.0统计软件对计量资料进行统计学分析，所有计量数据以均数±标准差（x-±s）表示。卡方检验用于分类资料，计量数据采用方差分析，组间比较采用q检验。P<0.05示差异有统计学意义。

2.结果

2.1手足口病患儿不同病原体感染引起的临床特点

四组患儿出疹天数及发热天数无显著差异（见表1）。患儿中共有14位出现脑炎或心肌损害并发症(见表2)。除D组2位患儿家长未同意使用激素或丙球治疗外，余并发症患儿均采用激素或丙球治疗。最终所有患儿均治愈出院。（见表2）。

3.讨论

手足口病是一种小儿常见病。EV-71感染可引起重症手足口病，病情进展快，死亡率高[4]。主要表现为神经系统和（或）肺脏受累，当出现这些症状时，已错过了最佳治疗时间。因此，我们正在寻找诊断其早期诊断指标。

已有研究发现在有脑炎的手足口病患儿与无脑炎患儿血清IL-1β，IL-6，TNF-α和IL-10水平未有明显差异[2,3,6]，此结果与我们的研究结果一致。可能的原因如下：（1）这四种炎症因子中的一种或多种可能与EV-71感染的患者严重程度有关，如有脑炎和（或）肺水肿等并发症，其可能比其他三组都升高。有报道显示IL-6，IL-1β和TNF-α在同时有脑炎及肺水肿患儿组明显高于其他各组[2]。另外IL-6和IL-10在EV-71感染的患者中均与肺水肿的发生发展有关[5]。然而，我们仅收集了8位脑炎患儿和6位心肌损害患儿，我们所检测出的结果可能与所选择的患儿病情较轻有关；（2）这四种炎症因子中的一种或多种可能在血清和（或）脑脊液中具有短期上升趋势。EV-71感染患儿早期肿瘤坏死因子-α可通过血脑屏障出现一过性升高[7]，而我们选择的病例发病天数均在1.8-2.1天之间，时间可能存在差异。

IFN-γ和GM-CSF炎症因子水平在EV-71感染组较其他B/C/D三组均升高，差别有统计学意义。有报告显示EV-71感染的重症中枢神经系统（CNS）并发症的患儿血清中GM-CSF水平较无并CNS感染的患儿和健康对照组显著升高[8]。分析如下：（1）EV-71感染的手足口病患儿血清IFN-γ和GM-CSF确实显著升高；（2）升高的IFN-γ和GM-CSF可长时间存在在血清中。IFN-γ在感染第一天后至六天内在血清中均维持一个很高的水平[9]。因此在疾病的早期，IFN-γ和GM-CSF可提示手足口病可能由EV-71病毒感染引起，且容易并发CNS感染和肺部并发症等。

我们仍需进一步探讨IFN-γ和GM-CSF在EV-71感染手足口病患儿病情发展中所起的作用。一些研究者已经报道，在临床症状出现后立即给予注射IL-6抗体，可成功减轻组织损伤并提高存活率[10]。那么，是否通过注射相应的抗体来对抗或降低炎性因子的水平可以减缓该病进展，我们将进一步深入研究。

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