(四川省阿坝州疾病预防控制中心四川阿坝624000)
【摘要】目的:分析肺结核患者采用不同检验方法的临床诊断价值。方法:随机选取我中心门诊40例肺结核患者为研究对象(观察组),并且选取同期在我中心门诊就诊的非肺结核患者35例作为对照组,分别采用皮肤结核茵素纯蛋白衍化物(PPD)、涂片结核菌检查以及聚合酶链反应(PCR)等三种不同的检测方法进行诊断,对比三种检验方法的诊断结果。结果:PCR诊断结核杆菌阳性率(70%)明显高于PPD检测(45%)、痰涂片结核菌检测(25%)。而PCR检测假阳性率(34.3%)也显著高于PPD检测(20%)、痰涂片结核菌检测(0%),差异对比均具有统计学意义(P<0.05)。结论:PCR检测诊断肺结核的灵敏度显著高于PPD试验以及涂片结核菌检查,而且该种检测手段操作较为简便,但是PCR检测也会出现假阳性情况,临床诊断时应该结合患者的临床体征、既往病史以及其他的辅助检查手段进行综合确诊,以防漏诊、误诊。
【关键词】肺结核;PPD检验;涂片结核菌检查;PCR检验
【中图分类号】R521【文献标识码】A【文章编号】2095-1752(2016)01-0078-01
结核病主要是由于结核杆菌感染导致的慢性传染性疾病[1]。肺结核患者往往起病比较隐匿,病情进展较慢,早期并不会表现出明显的临床症状,导致早期诊治难度较大。早期诊断,对于及时切断疾病传播途径,提高临床治疗效果,确保人们的生命健康安全,都具有极其重要的作用[2]。皮肤结核茵素纯蛋白衍化物(PPD)、涂片结核菌检查以及聚合酶链反应(PCR)都是临床诊断肺结核患者的常用检验方法,为了探讨有效的检测方法,本文选取了我中心门诊40例肺结核患者以及35例非肺结核患者早期诊断情况进行回顾性分析。
1.资料与方法
1.1一般资料
随机选取我中心门诊在2014年4月~2015年4月收治的40例肺结核患者为研究对象(观察组),其中男性28例,女性12例;患者年龄平均(47.5±1.7)岁。同时选取同期在我中心门诊就诊的非肺结核患者35例作为对照组,其中男性22例,女性13例;患者年龄平均(47.3±1.9)岁。两组患者的性别以及年龄等情况差异对比并没有统计学意义(P>0.05),可比性较强。
1.2方法
采用咽拭子深入肺部取其分泌物,或者取患者清晨深呼吸后咳出痰液作为检验标本进行PCR检查、痰涂片检查。
1.2.1痰涂片检查采集患者的痰标本后,立即进行痰涂片检查,在显微镜下应用改良齐一尼氏抗酸染色进行观察,如果100个视野中有3~9条,说明为阳性。
1.2.2PCR检测在5μL1N氢氧化钠溶液中加入0.5ml痰液,将其在放置在37℃环境下,40min后放在10000r/min条件下进行离心,5min后过滤上层清夜,并且采用生理盐水进行冲洗。然后分别取1ml血清、1ml胸水,而且应该离心沉淀,将50ul裂解液加入其中,并且进行持续10min沸水浴,然后放置在1000r/min条件下进行离心,持续5min左右。将15ul反应溶液添加到0.2ulTaq酶中,均匀混合后将石蜡油20ul加入其中进行封顶,然后加入5ul上清液就成为了TB-DNA模板。将其放置在10000r/min条件下进行离心,并且在55℃、90℃、72℃下分别扩增30s、30s、60s,循环总次数为35次。取PCR扩增液20ml放入2%琼脂糖凝胶中上样电泳,如果在紫外线下可以观察到橙黄色荧光带为160bp,说明为阳性。
1.2.3PPD检测将0.1mlPPD液经皮注射到患者的左前臂内侧,注意观察局部注射部位皮肤的变化,若3d后局部肿结直径介于5~10mm左右,说明结果显示阳性。
1.3统计学处理
本次采用SPSS16.0统计学软件进行数据处理,计数资料用%表示,采用χ2检验,计量资料用(x-±s)表示,采用t检验,P<0.05代表两组差异存在统计学意义。
2.结果
对比三种不同的检测方法可以发现,PCR诊断结核杆菌阳性率(70%)明显高于PPD检测(45%)、痰涂片结核菌检测(25%)。而PCR检测假阳性率(34.3%)也显著高于PPD检测(20%)、痰涂片结核菌检测(0%),差异对比均具有统计学意义(P<0.05)。具体见下表1。
3.讨论
痰涂片检查是临床最为常用的检测方法,但是该种检验方法的阳性检出率并不高,本次研究中痰涂片检验阳性率仅仅为25%。PPD也是一种常用的传统检验手段,该种检验手段最大的优点是操作简便,精度也比较高,但是检验结果很容易受到PPD液纯度、治疗史以及结核感染史等多方面因素的影响,假阳性率比较高。本次研究中,PPD检验阳性率为45%,虽然高于痰涂片检验,但是其假阳性检出率为20%,显著高于痰涂片检验结果(0%)。PCR阳性检出率最高达70%,显著高于其他两种检验方法,和我国大多数学者研究报道结果基本相符。PCR检验的优势在于操作简便,也具有较高的准确性,可在临床上广泛推广、应用。
【参考文献】
[1]刘成永,彭素真,王双.变色液体培养基在结核病早期诊断中的应用评价[J].实用医技杂志,2011,11(14):1268-1269.
[2]赵平,张淑芳,高文慧等.北京市朝阳区肺结核病患者细菌学检验结果分析[J].中国卫生检验杂志,2008,18(9):1821-1822.
[3]赵平,张淑芳,高文慧等.北京市朝阳区肺结核病患者细菌学检验结果分析[J].中国卫生检验杂志,2008,18(9):1821-1822.