贾得志聂梅杨东刘芳(胜利石油管理局滨海医院山东东营257237)
【中图分类号】R446.11+3【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)1-0117-02
【关键词】血细胞分析仪影响因素手工复检
本文重点讨论温度对血细胞分析各项参数的影响;白细胞计数、血红蛋白测定、血小板计数等复检原因及复检率。
1材料
1.1KX—21血细胞分析仪,成套试剂由东亚公司提供,质控物由四川通广公司提供。
1.2抗凝剂为0.37mol/lEDTA-K2。
1.3日本产奥林巴斯显微镜。
1.4镜检用白细胞稀释液为2%醋酸。
1.5镜检用血小板计数液为30g盐酸普鲁卡因,2g氯化钠,加蒸馏水至1L,溶解后加甲醛2.0ml,置棕色瓶中,4℃保存。
2方法
2.1用塑料注射器抽取静脉血1ml,立即加入含10ul抗凝剂的塑料试管中,加盖,轻轻摇匀,复检也用此抗凝血。
2.2KX—21血细胞分析仪按操作手册操作,所有试验均在3小时内完成。
2.3使用质控品,每日做室内质控,以此监视仪器工作状态。
2.4过程
2.4.1试剂准备:取同批号的溶血剂、稀释液分为三份,分别置5℃冰箱、20℃及35℃水浴箱控制温度。
2.4.2标本来源:取门诊体检正常人的20份静脉血。
2.4.3标本测试:将仪器换上5℃试剂,并导引试剂2次,接着背景计数3次,取上述20份标本进行检测其WBC、LY、MO、GR、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、PLT、PCT、MPV、PDW数值及WBC、RBC、PLT三个直方图,测试过程中对试剂采取保温措施,并尽量用空调使室温接近试剂温度。同上法,换上20℃、35℃试剂检测上述20份标本。
2.5白细胞和血小板复检按常规显微镜计数。
2.6高乳糜及高胆红素标本以1500r/min离心10min,尽可能完全晰出血浆,再加入等量的生理盐水,混匀后仪器测定。
2.7进行冷球蛋白定性试验[1]。
3结果
3.1检测结果
3.1.120℃与5℃条件下检测值比较,两条件下的RBC、PLT直方图未见明显异常,但WBC直方图差异很大,5℃条件下的WBC直方图比20℃条件下的WBC直方图明显左移。
3.1.220℃与35℃条件下检测值比较,两条件下的RBC、PLT直方图未见明显异常,WBC直方图差异很大,35℃条件下WBC直方图比20℃条件下的WBC直方图明显右移。
3.1.3统计分析:采用配对t检验,用t值和P表示,比较20℃与5℃和20℃与35℃条件下检测值差异的显著性及变化趋势。
3.2本院门诊及病房病人756例,其中白细胞复检65例,血红蛋白复检41例,血小板复检101例,白细胞分类复检165例,复检结果见表1,统计方法用配对t检验。
表1KX—21与复检结果比较
4讨论
4.1温度改变后各参数出现显著性差异的原因分析
4.1.1温度的改变对红细胞的体积影响较大。
4.1.2溶血剂中的表面活性剂易受温度的影响[2]。
4.2温度改变后各参数无显著性差异的原因分析
4.2.1白细胞、红细胞、血小板是由阻抗法原理检测的,当由细胞和电解质组成的混悬液通过计数小孔时,由于细胞是不良导体,每经过一个细胞就会产生一个瞬间的电阻变化,依靠变化次数表示细胞的数量,变化的大小反映细胞的大小,在所讨论的温度范围内,细胞的数量不会因温度的变化而变化,因此上述三参数受温度的影响较小。
4.2.2血红蛋白是采用氰化高铁血红蛋白比色法测定,该法特点是显色稳定,受温度影响较小。
4.2.3MCH是由公式HGB/RBC计算而来,因而同样受温度影响较小。
4.2.4PCT、MPV、PDW主要与血小板的结构紧密,受温度影响小有关。
4.3临床标本复检讨论
4.3.1白细胞计数复检引起白细胞计数增高的原因很多,如血小板聚集,有核红细胞增多,冷球蛋白在室温的非定形聚集等。
4.3.2血红蛋白的复检高乳糜血症、高胆红素血症、球蛋白增多症及白细胞大于100×109/L的标本都能使血红蛋白假性增高。我们主要依据MCHC大于350g/L作为复检指征。
4.3.3血小板计数的复检我们发现标本采集对血小板计数有较大影响,采血过程可促使血小板聚集,如穿刺不顺、组织液混入、混匀不均等。某些疾病标本影响更大,如糖尿病、肾小球肾肾炎等。
4.3.4白细胞分类的推片复检关于血细胞分析仪白细胞分类已有许多报道,本文未做深入探讨。有人认为在各种参数及直方图均正常的情况下,结合临床表现,仪器分类可做筛选手段。
实际工作中随着仪器指标的大量增加,不少仪器临床意义不明确或重复,而与此形成对照的是许多显微镜检查有明确价值的指标不断丢失。建议实验室应在重视仪器操作的同时,组织人力加强手工复检,确保为临床提供更多有价值的阳性参数。
参考文献
[1]王国丽,廖廷锡,董向惠,等.冷荨麻疹患者血清冷球蛋白等的检验[J].预防医学情报杂志,2001,17(5):385-386.
[2]周洪华等.溶血剂对血细胞形态的影响.中华医学检验杂志,1997,12(2):87.