AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的临床意义

AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测在原发性肝癌诊断中的临床意义

张宁宇吕向阳

张宁宇吕向阳穆彩琴(大连市第二人民医院116011)

【中图分类号】R730.4【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2013)29-0205-02

【摘要】目的探讨血清中AFP-L3，GP73，DCP，GPC3四种肿瘤标志物在原发性肝癌中的诊断价值及联合检测的意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法和化学发光法检测了63例原发性肝癌(PLC)，48例良性肝病和40例正常体检者血清中AFP-L3，GP73，DCP，GPC3的含量并进行相关的分析。结果PHC患者中的AFP-L3，GP73，DCP，GPC3均显著高于良性肝病和正常体检者。四者联合检测时的敏感性和诊断准确性均比单项检测高。结论应用AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测可大大提高原发性肝癌的检出率。

【关键词】原发性肝癌AFP-L3GP73GPC3肿瘤标志物

原发性肝癌(Primarylivercancer,PLC)指肝细胞或肝内胆管细胞发生癌变，是临床上常见的消化系统恶性肿瘤之一。在全球肿瘤患者致死率中高居第3，其中我国肝癌死亡人数占全球肝癌死亡人数的45%～50%[1]。起病隐匿，早期多无明显的症状体征，但疾病进展迅速。而早发现，及时治疗可显著地改善患者的预后。血清甲胎蛋白(AFP)检测诊断原发性肝癌的临床价值已得到普遍肯定，但其阳性率不是很高，30%～40%的PLC患者呈阴性或低浓度[2]，给临床造成漏诊或误诊的机会增多。为了提高PLC的检出率，AFP-L3，GP73，DCP，GPC3联合检测，有望提高PLC诊断的阳性率，评价它们在PLC诊断中的临床意义。

1、资料与方法

1.1临床资料收集大连市第二人民医院2011年4月—2013年3月住院患者血清标本116例。其中PLC组63例，男40例，女23例，平均年龄(46.81±5.30)岁。良性肝病组48例，男35例，女13例，平均年龄(50.01±8.35)岁。正常对照组40例，男25例，女15例，平均年龄(43.38±6.03)岁。所有病例均根据临床病史，经实验室检查，B超，CT，MRI等确诊。

1.2检测方法采用化学发光法检测AFP-L3和DCP，该试剂盒由北京热景生物技术有限公司提供，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定GP73和GPC3，试剂由上海泛柯生物提供。所有操作均按说明书上严格执行。

1.3统计分析采用SPSS18.0统计学软件进行分析，所有数据以均数±标准差(-x±S)表示，P<0.05为具有统计学意义。

2、结果

2.1AFP-L3，GP73，DCP，GPC3的检测结果

表1各组血清AFP-L3、GP73、DCP、GPC3的检测结果(-x±S)

注：与良性肝病组相比，★P<0.05；与对照组相比，▲P<0.05。

2.2AFP-L3，GP73，DCP，GPC3在各组中的阳性检出率：

各种检测参数的阳性界值为AFP-L3(%)≥10%，GP73＞60ng/ml，DCP＞400mAu/ml,GPC3＞300ng/l.PLC组各标志物阳性率与良性肝病组及对照组比较，均有显著性差异(P＜0.05)。见表2。

表2血清AFP-L3、GP73、DCP、GPC3阳性检出率[n(%)]

3、讨论

已有研究表明，AFP是目前临床最主要、应用最广泛的PLC早期筛查血清标志。但慢性肝炎，肝纤维化，肝硬化中仍有1/3出现AFP升高，有1/3的HLC患者AFP不升高，因此开发新的可靠的分子标志物具有重要临床意义。AFP根据不同的糖链结构异质性分为3种类型，即AFP-L1，AFP-L2和AFP-L3。AFP-L1，主要见于良性肝病，AFP-L2主要见于孕妇，AFP-L3则常见于HLC。甲胎蛋白异质体(AFP-L3)可与小扁豆凝集素(LCA)结合，为核心岩藻糖基化AFP，其与AFP的比值(AFP-L3%)被临床用于HLC早期诊断和预后判断。AFP-L3%对判断预后，监测肿瘤清除率及HLC术后复发均有重要价值[3]。

高尔基体蛋白(GP73)是1种Ⅱ型高尔基体跨膜糖蛋白，主要表达于人类多种组织的上皮细胞，正常肝脏组织表达甚微。在诊断早期肝癌的敏感度也优于AFP，在AFP阴性肝癌患者中其阳性率也高达57%，表明GP73是PLC早期诊断及AFP阴性肝癌诊断的有效标志[4]。同时，PLC患者体内维生素K缺乏或利用障碍,导致产生未羧化的异常凝血酶原,即脱-r-羧基凝血酶原(DCP),又称维生素K缺乏或拮抗剂Ⅱ诱导蛋白。它的表达水平与肝癌患者肿瘤大小和数量，浸润程度及转移密切相关。高水平的DCP与患者预后较差高度相关，其也是判断PLC术后复发的1项重要指标[5]。近期还发现，DCP不仅有生长因子样作用，可促进血管内皮细胞增殖和迁徒，还能促进血管生成因子类物质，提示其与肿瘤发展密切相关[6]。磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)则是1种参与细胞增殖和胚胎发育的细胞膜糖蛋白，在近80%肝癌组织中及55%左右的肝癌患者血清中可检测到GPC3表达，肝硬化及健康人组织和血清中几乎均无表达。文献报道，GPC3诊断小肝癌敏感度优于AFP(56.3%比31.3%)，GPC3表达水平与血清AFP无相关性，在AFP水平正常的患者中有1/3的阳性率[7]。此外，GPC3可与肝素结合生长因子等相互作用，参与肿瘤细胞的生长，且可通过激活胰岛素样生长因子Ⅱ信号通路诱导肿瘤形成。

综上所述，结合本组资料研究显示，PLC患者血清中的4组肿瘤标志物联合检测的阳性率明显高于良性肝病组和对照组，高于4种肿瘤标志物单独检测的阳性率。显示联合检测对PLC具有一定的诊断价值，作为PLC诊断的可信赖指标，提高了PLC的检出率，其阳性率可达92.1%，四项肿瘤标志物相互补充，对早期的诊断和治疗均有重要的临床意义。

参考文献

[1]李永利，马洪滨，郭静霞，等.甲胎蛋白异质体L3预警原发性肝癌的研究.中华实验和临床病毒学杂志，2008，22：336—338.

[2]PerkinsGL，SlaterED，SandersGK，etal.Serumtumormarkers[J].AmFamPhysician2008，68(6):1075—1082.

[3]FerlayJ，etal.Estimatesofworldwideburdenofcancerin2008：GLOBOCAN2008.IntJCancer，2010，127；2918—2927.

[4]MaoY，YangH，XuH，etal.Golgiprotein73(GOLPH2)isavaluableserummarkerforhepatocellularcarcinoma.Gut，2010，59：1687—1693.

[5]ShiinaS，TateishiR，AranoT，etal.Radiofrequencyablationforhepatocellularcarcinoma：10-yearoutcomeandprognosticfactors.AmJGastroenterol，2012，107：569—577.

[6]GaoFJ，CuiSX，ChenMH，etal.Des-gamma-carboxyprothrombinincreasestheexpressionofangiogenicfactorsinhumanhepatocellularcarcinomacells.LifeSci.2008，83:815—820.

[7]ZhangQ，XiaoQ，LinZ，etal.Developmentofacompetitiveradioimmunoassayforglypican-3andtheclinicalapplicationindiagnosisofhepatocellularcarcinoma.ClinBiochem，2010，43：1003—1008.