大便潜血试验免疫法测定血红蛋白和转铁蛋白的临床应用张萍1赵守库1（通讯作者）

大便潜血试验免疫法测定血红蛋白和转铁蛋白的临床应用张萍1赵守库1（通讯作者）

张文迎吴娟蔡小华刘莉莉2

张文迎吴娟蔡小华（中山大学附属第一医院黄埔院区检验科广东广州510700）

【摘要】目的探讨大便潜血试验免疫法测定血红蛋白和转铁蛋白的临床应用价值。方法选择本院2012年5月至2013年4月期间收治的消化道出血患者50例作为观察组，选择体检健康者50例为对照组，对其临床资料进行回顾性分析。结果血红蛋白法及转铁蛋白法在对消化道出血的病例检测时，阳性检出率分别为84%和90%。结论大便潜血试验免疫法测定血红蛋白和转铁蛋白在临床值得推广应用。

【关键词】大便潜血免疫法血红蛋白法转铁蛋白法

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）21-0132-02

大便潜血试验对诊断以及筛选消化道出血、胃肠道恶性肿瘤有重要意义，目前,临床上应用的大便潜血检测的方法主要有化学法和免疫法两种。在临床应用中,我们发现每种方法都有其优势,同时也存在着测定方法上的局限性，在过去一直使用化学法检测大便潜血,其中的邻甲苯胺法是中华医学会全国临床检验方法学术讨论会于1983年推荐的方法，但临床结果易出现假阳性；近些年采用的血红蛋白单克隆抗体免疫法较传统的化学法而言，具有灵敏度高，特异性好的优势，而且测试结果不容易受食物和药物的影响,但也会出现假阴性现象;另外，最近几年，转铁蛋白单克隆抗体免疫法的应用也逐渐增多[1]。现选取本院2012年5月-2013年4月门诊随机抽取的50例消化道出血的患者进行研究，并将门诊体检正常的50例患者设置为对照组，对使用免疫法测定血红蛋白和转铁蛋白的结果进行回顾性分析，以期为免疫法的临床诊治提供指导性依据。报告如下：

1一般资料与方法

1.1一般资料观察组50例大便样本来自本院住院及门诊患者中，经内窥镜确诊为消化道出血的患者,年龄24岁至62岁,平均年龄35.3±1.2岁，其中，男性30例,女性20例；对照组50例大便样本来自本院体检健康的人，年龄23至58岁，平均年龄38.1±1.6岁，其中男性28例，女性22例。

1.2仪器与试剂血红蛋白法和转铁蛋白法检测试纸均由万华普曼生物工程有限公司提供。

1.3方法对观察组及对照组的全部100例患者的大便标本先后分别使用血红蛋白法和转铁蛋白法进行大便潜血试验，血红蛋白法及转铁蛋白法操作均按试剂说明书操作。

2结果

血红蛋白法及转铁蛋白法的假阳性率为4%及6%，假阴性率为16%和10%，对消化道出血的阳性检出率分别为84%和90%。

表1.两种方法大便潜血试验结果例(%)

组别n血红蛋白法阳性数血红蛋白法阴性数转铁蛋白法阳性数转铁蛋白法阴性数

对照组502（4%）48（96%）3（6%）47（94%）

观察组5042(84%)8（16%）45(90%)5（10%）

3讨论

临床中，常使用潜血试验作为检测消化道出血、慢性胃肠道出血及恶性肿瘤早期诊断的常用筛选指标,其中，由于免疫法具有灵敏度高、特异性强、操作简便的特点而逐渐被临床医生所接受。Greegar[2]认为,常规体检中如果加入大便潜血试验及内窥镜检查，那么，一些结肠癌和直肠癌在早期就可以被检出，从而可以提高这些癌症的治愈率，并且，早期对肠道肿瘤诊断，不仅可以提高治疗后5年的生存率并且有机会保留具有生理功能的肛门，因此，大便潜血试验具有十分重要的意义。1864年Vandeen[3]首先发明了愈创木脂法检测大便潜血,后来相继出现了联苯胺法、匹拉米洞法、孔雀绿法、邻-联甲苯胺法等,它们的检测原理是通过血红蛋白中的亚铁血红素催化过氧化氢释放新生态的氧,使上述色原显色，但化学显色法易受动物血、蔬菜、铁剂等含有类似物质的食物影响，而呈假阳性反应。

血红蛋白免疫法采用特异的人血红蛋白单克隆抗体镶嵌于纤维素膜上,当粪便中有人血红蛋白时，会与之结合，再利用相应的抗体显色进行测定[4]。免疫法虽然具有高度的敏感性,但当过量的血红蛋白出现时，会导致存在的抗原过剩，从而出现假阴性结果。在观察组50例患者中，血红蛋白法有8例在潜血试验出现假阴性,原因可能是这些大便标本的血红蛋白在消化道内存留时间较长时,珠蛋白链快速被胃酸水解,在小肠被蛋白酶降解,血红蛋白可能被充分降解或消化完全，而失去与单克隆抗体特异性结合的抗原决定簇，同时体外胃肠道内细菌的作用也可使粪便中血红蛋白免疫失活,导致假阴性结果的出现。据报道,当样本血红蛋白含量过高或过低时,试验结果均为阴性,只有含量在3～300Lg/mL时才为强阳性反应，如怀疑为假阴性反应时，应增加大便样采集量或减少缓冲液量以提高混悬液中的血红蛋白的浓度,或采用转铁蛋白法检测试纸,以提高结果的准确性[5]。

转铁蛋白属于β1球蛋白，其总量约占血浆蛋白总量的0.3%到0.5%之间，主要合成部位在肝脏，在机体内，其主要通过细胞的内吞作用，运载细胞外的铁进入细胞内，由于铁可以作为细胞内酶的辅基，因此转铁蛋白的存在对细胞的生长及存活较为重要。当患者消化道出血时，血清中的铁蛋白会随着血液进入到胃肠道中，并随粪便排出体外。但一般情况下，粪便中转铁蛋白的稳定性高于血红蛋白，因此，当粪便中的血红蛋白在肠道或者体外环境下被破坏，或者出血量很少时，可以采用粪便转铁蛋白检测是否存在消化道出血的情况，并且，以转铁蛋白作为检测指标可能更为敏感。

目前，血红蛋白法只能定性检测,仅给出阳性或阴性结果,不能对消化道出血患者的治疗效果进行观察。在肠道自身的稳定性及抗菌能力都方面，转铁蛋白均优于血红蛋白,并且转铁蛋白不会被细菌降解、胃酸消化，因此，血红蛋白法和转铁蛋白法有很好的互补性，建议临床综合使用。

免疫法是将来的发展方向,本文结果显示，在大便潜血试验时,血红蛋白和转铁蛋白均具有很高的检出率,若临床配合使用，更有助于提高消化道出血等疾病的检出率。

参考文献

[1]韩淑娥,于培霞.要加强对粪便常规检验的重视[J].中国药物与临床,2011,11(11):1307-1308.

[2]夏长虹，武子涛，盛剑秋，等.粪便转铁蛋白试验在提高消化道出血检出率中的作用[J].胃肠病学和肝病学杂志，2009,18(9):804-806.

[3]梁华英，黄胜，肖伟泉，等.大便潜血试验免疫法测定血红蛋白和转铁蛋白的临床应用[J].检验医学与临床，2009，6(14):1141-1142.

[4]吴鹏,李艳,陈进,等.联合免疫法和化学法检测粪便隐血的临床应用评价[J].检验医学,2010,25(3):176-178.

[5]贺宝爱,李安均,王卓.便潜血免疫法与化学法联合检测对消化道出血的诊断价值[J].中国疗养医学,2010,19(4):367-369.