免疫固定电泳在96例骨髓瘤肾脏病患者诊断中的意义

免疫固定电泳在96例骨髓瘤肾脏病患者诊断中的意义

郑瑾李倩徐叶

郑瑾李倩徐叶（上海中医药大学附属普陀医院检验科上海200062）

【摘要】目的探讨免疫固定电泳(IFE)对骨髓瘤性肾脏疾病诊断的价值。方法用血清蛋白电泳及免疫固定电泳技术对763例肾内科不同程度肾功能损害住院患者进行检测。血清蛋白电泳检测采用琼脂糖电泳，血清及尿液免疫固定电泳检测采用琼脂糖电泳加免疫固定技术。结果763例患者血清经蛋白电泳筛选出48例M蛋白，检出率为6.2%。763例患者经免疫固定电泳筛选出96例患者血清及尿液出现M蛋白，检出率为12.5%。96例患者血清及尿液经免疫固定电泳出现致密深染重链伴轻链成分，依据判断标准确认为多发性骨髓瘤（MM），经骨穿均被临床确诊为MM。结论免疫固定电泳能明确提示骨髓瘤肾病，适于作为肾脏疾病的常规检查项目，在诊断和鉴别诊断骨髓瘤肾损害中有重要意义。

【关键词】免疫固定电泳蛋白电泳骨髓瘤肾病

【中图分类号】R446.6【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）07-0019-03

多发性骨髓瘤MM是一种源于前B细胞的骨髓浆细胞恶性增殖性疾病[1]。恶性浆细胞分泌大量的单克隆免疫球蛋白，又名副蛋白（M蛋白）。一般来说，它可以分为IgG、IgA、IgM、IgD、IgE、游离轻链（Kappa或Lamda）及游离重链等7型[2]。电泳后，可呈现出一条有特征性的带（M）。骨髓瘤的患者多以骨病、肾病等继发病就诊，常被误诊为骨折、肾小球肾炎等疾病。据不同医院统计资料分析，误诊率可达54%～69.1%[3]，导致许多患者错过了最佳治疗时期。因此，寻找一种能明确地提示骨髓瘤肾病并可作为常规检测的项目，对早期诊断和治疗十分重要。为此，本研究对763例不同程度肾功能损害患者进行检测，研究免疫固定电泳检测在骨髓瘤肾病诊断和鉴别诊断作为常规检查项目的价值，提高肾内科医师对该病的认识，避免误诊和漏诊，提高MM的生存率。

材料和方法

1标本来源：选择我院2010年7月至2011年12月肾内科不同程度肾功能损害住院患者763例，原发性肾病综合征患者126例，肾衰患者(CRF)87例，其余不同程度肾功能损害550例。男426例，女337例,年龄36～85岁。其中96例经免疫固定电泳(IFE)均出现致密深染单克隆M蛋白。正常对照组50例经体检证实无肾脏疾病和其他慢性疾病。

2仪器及试剂：英国HelenaSPIFECOMBE全自动电泳分析仪和配套试剂，进行血清蛋白电泳、血清及尿液免疫固定电泳检测。

3方法：

抽取晨空腹静脉血2mL，分离血清，避免溶血和脂血。同时留取晨尿3mL。

1)血清蛋白电泳：取20μL血清标本于加样在琼脂糖凝胶板上电泳，扫描，报告结果。

2)免疫固定电泳：用生理盐水将样本按1:5稀释血清，尿液原倍。按操作规程进行免疫固定电泳，抗血清为抗IgG、IgA、IgM、抗κ、λ型血清50μl。观察结果。

3)判断标准MM按文献标准诊断[4]。

结果

1.763例患者血清经蛋白电泳筛选出48例M蛋白，检出率为6.2%。有96例患者血清及尿液经免疫固定均出现M蛋白，检出率为12.5%。96例患者血清及尿液经免疫固定电泳均出现致密深染重链伴轻链成分，依据判断标准确认为MM。96例患者经骨穿均确诊为多发性骨髓瘤。

2.二种方法对96例MM患者血清单克隆免疫球蛋白的检出率(%)见表1。

表1二种方法对血清单克隆免疫球蛋白的检出率（%）

3．血清免疫固定电泳分型：在96例确诊病例中，有71例多发性骨髓瘤患者经血清免疫固定电泳后呈现明显浓集条带，其中IgAλIgMλ型为9例（9.3%），IgAκIgAλ型为5例（5.2%），IgAκ型为17例（17.7%），IgMκ型为8例（8.3%），IgAλ型为36例（37.5%），IgAκ游离轻链κ型为4例（4.1%），轻链λ游离轻链λ双株峰型为2例（2%），游离轻链λ型为15例（15.5%）。（见表2）

表296例多发性骨髓瘤的血清免疫固定电泳分型

4.尿液免疫固定电泳分型：在96例确诊病例中，有25例多发性骨髓瘤患者经尿液免疫固定电泳后呈现明显浓集条带，其中游离轻链λ型为17例（17.7%），κ轻链型为8例（8.3%）。（见表3）

表396例多发性骨髓瘤患者尿液经免疫固定电泳分型

5.MM患者免疫固定电泳分型图谱见图1。

图1免疫固定电泳分型

讨论

免疫固定电泳是结合电泳技术的分离作用和单克隆抗体的特异性及高敏感性来检测血清中的单克隆免疫球蛋白，较其他方法准确、敏感、快速。血清蛋白电泳只能检测M蛋白带是否存在以及所处位置(α1至γ带之间)，而免疫固定电泳在检出单克隆成分的同时，可从电泳图谱上确定单克隆成分的类型，见图1。免疫固定电泳是血清蛋白质经琼脂糖凝胶分离后，用抗不同型免疫球蛋白的单克隆抗体孵育，与抗体结合的免疫球蛋白将沉淀在凝胶中，其他蛋白可被洗去。再用酸性结晶紫染色后即可在凝胶上显现出不同型的免疫球蛋白。免疫固定电泳酸性结晶紫染色对单克隆免疫球蛋白的检出率敏感性为25mg/l，能检测出非常少的单克隆成分，用于疾病的早期诊断效果好。

MM是浆细胞克隆性增生的恶性肿瘤。骨髓瘤肾病是多发性骨髓瘤引起的肾损害。临床表现为肾病综合征、急性肾衰、慢性肾衰、肾小管功能不全。肾外表现有：全身骨痛、感染、贫血及出血倾向、高钙血症等。在骨髓瘤细胞的基础上出现蛋白尿、尿本-周蛋白阳性。由于异常浆细胞恶性增生程度和浸润范围不一，其临床表现复杂多样，易误诊，延误病情。据报道20%的MM患者误诊为肾脏病变[5]。以肾衰为首发症状的MM起病往往比较隐匿，是造成骨髓瘤患者死亡最常见的原因之一。另外，骨髓瘤患者体内分泌的大量轻链蛋白在肾小管部位的沉积和损伤，从而引起的肾脏病变，它也是造成CRF的主要原因[6-7]。因此临床医师对患者复杂多样的病情仅仅考虑肾脏一般常见病、多发病的诊断，极易忽略MM的存在。

本研究中96例MM患者都以急、慢性肾功能衰竭为主要临床表现首诊，患者最初表现为蛋白尿或肾功能衰竭，而后才表现骨髓瘤症状。有71例MM患者经血清免疫固定电泳后呈现明显浓集条带，极易误诊为肾小球肾炎、肾功能衰竭。另外MM伴肾损害患者尿液中轻链检出率高，在96例确诊病例中，有25例多发性骨髓瘤患者经尿液免疫固定电泳后呈现明显浓集条带，其中游离轻链λ型为17例（17.7%），κ轻链型为8例（8.3%）。这可能与轻链蛋白分子量小，更易于从肾小球滤过至肾小管引起管型肾病有关[8]。因此本研究收集763例患者，采用血清及尿液标本同时进行免疫固定电泳的检测，以增加轻链病的检出率。

另外必须指出，骨穿虽是诊断此病的金标准，但因它是局灶性病变，一次骨穿很难查出瘤细胞，况且多发性骨髓瘤患者的瘤细胞形态多种多样，少部分患者的瘤细胞形态极不典型，很难用常规检查方法证实为骨髓瘤细胞[9-12]，而做免疫固定电泳就比较简单方便，而且容易判断结果。相对于骨髓涂片，肾脏活检等，免疫固定电泳检测的是血清及晨尿，标本采集方便，检测速度快，适合临床常规检测。因此，本研究对763例不同程度肾功能损害患者进行免疫固定电泳检测的研究后，建议将免疫固定电泳作为肾内科的常规检查项目，并且血清及晨尿标本同时送检，提高肾内科医师对骨髓瘤肾病的诊断，避免误诊和漏诊，提高MM的生存率。

参考文献

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