HPLC法测定益肾灵颗粒中淫羊藿苷的含量

HPLC法测定益肾灵颗粒中淫羊藿苷的含量

黄颖

黄颖(江西省鹰潭市人民医院江西鹰潭335000)

【中图分类号】R917【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2009)25-0057-02

【摘要】目的建立测定益肾灵颗粒中有效成分淫羊藿苷含量的方法。方法采取高效液相色谱法测定,经乙腈一水为流动相,检测波长为270mm，柱温为25℃。结果淫羊藿苷在2.8-28.0ug/ml(r=0.9999)范围内呈良好线性关系，淫羊藿苷的平均回收率为98.11%(RSD=0.73%,n=5)。结论方便简便，分离效果好，结果准确可靠，可以用于检测益肾灵颗粒的质量。

【关键词】益肾灵颗粒淫羊藿苷HPLC

益肾灵颗粒是由枸杞子、女贞子、淫羊藿、附子、金樱子、韭菜子、补骨脂等中药组成。具有益肾壮阳的功效。用于肾亏阳痿、早泄、遗精、少精、死精。其主药之一淫羊藿的主要有效成份为淫羊藿苷，目前尚末对其进行定量检测，为有效控制该制剂的质量，笔者采用高效液相色谱法对益肾灵颗粒中淫羊藿苷的含量进行了测定，结果令人满意。

1仪器与试药

1.1仪器：LC-10A高效液相色谱仪，包括SPD-10AVP紫外检测器（日本岛津公司）；ANASTAR色谱数据系统（美国TS公司）。

1.2试药淫羊藿苷对照品（中国药品生物制品检定提供），益肾灵颗粒（河北万岁药业有限公司生产，三批批号分别为071112、080109、080324）；水为超纯水，乙醇、乙腈均为色谱纯。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱：Shim-packVP-ODS(250mm×4.6mm,5um),流动相：乙腈-水（30∶70）；流速：1.0ml/mim;检测波长；270mm;柱温：25℃；进样量：20ul。

2.2标准曲线的绘制准确称取淫羊藿苷对照品1.4mg,置25ml容量瓶中，加75%乙醇溶液溶解并稀释至刻度，即得浓度为56ug/ml的对照品储备液。分别精密吸取该储备液0.5、1.0、2.0、4.0、5.0ml，置于10ml容量瓶中，加75%乙醇溶液配制成浓度为2.8、5.6、11.2、22.4、28.0ug/ml的对照品溶液，并按“2.1“项下色谱条件分别进样20ul，测定峰面积积分值，并以峰面积积分值（A）为纵坐标，浓度（C）为横坐标进行性回归，得回归方程为A=27569.38C+6275.3(r=0.9999),线性范围为2.8-28.0ug/ml.

2.3供试品溶液的制备精密称取样品1g,置于锥形瓶中，精密加入75%乙醇溶液50ml，超声提取30mim，过滤，精密量取连续滤液15ml，用75%乙醇溶液定容于25ml容量瓶中，即得。

2.4精密度试验精密吸取“2.3”项下溶液20ul，按“2.1”项下色谱条件重复进样6次，测定淫羊藿苷色谱峰面积积分值，结果RSD=1.02%(n=6)

2.5稳定性试验精密称取样品1g，按“2.3”项下方法制备成供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件于0、2、4、6、8h时，分别进样20ul，测定淫羊藿苷峰面积积分值，RSD=1.05%(n=5，结果表明，样品溶液在8h内稳定。

2.6重现性试验取同一批样品（批号：071112）5份，分别按“2.3项下方法制备成供试品溶液，并按“2.1”项下色谱条件平行测定5次，结果，平均含量为769.56ug/g,RSD=0.94%.

2.7加样回收率试验准确称取已知含量的样品适量，并准备加入一定量的淫羊藿苷对照品，按“2.3”项下方法制备成供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样，测定峰面积积分值，计算回收率，结果详见表1。

2.8样品含量测定精密称取3批样品各1g，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，均按“2.1”项下色谱条件进样20ul，分别测定峰面积积分值，以外标法计算淫羊藿苷含量，结果详见表2

3讨论

曾试过乙腈一水（25∶75）作为流动相，结果淫羊藿苷与邻近峰分离不理想，最后改用本方法后，峰形对称，且分离度较好。

实验结果表明，本方法操作简便、分离效果好，重现性高、结果准确可靠，具有实际应用意义。为此可用高效液相色谱法对益肾灵颗粒中淫羊藿苷的含量进行测定来控制本品的质量。

参考文献

[1]中国药典（一部）[S]，2005年版，2005∶577.

[2]苗明三，李振国，现代实用中药质量控制技术[M].北京，人民卫生出版社，2006∶966.

[3]扬戒娇，柱层析一高效色谱法测定乳增宁片中淫羊藿苷含量[J]，中国药房2004，15（9）∶565.