高效液相色谱法分析硫酸庆大霉素注射液C组分条件的选择

高效液相色谱法分析硫酸庆大霉素注射液C组分条件的选择

洛丽高丽娜

洛丽高丽娜（辽宁省鞍山市食品药品检验所114006)

【摘要】高效液相色谱法分析硫酸庆大霉素注射液C组分中各种因素的影响，如色谱柱、流动相配比。在上述研究基础上建立了以甲醇：水：甲酸（70：25：5）为流动相系统，在16min内即可完成样品分析，且C1峰与相邻杂质峰获得了良好分离。

【关键词】高效液相色谱硫酸庆大霉素甲酸

【中图分类号】R96【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）06-0281-01

【Abstract】theHPLCmethodfortheanalysisofCofgentamycinsulfateinjectioncomponentsofvariousfactors,suchasthechromatographiccolumn,mobilephase.Onthebasisoftheabovestudyestablishedmethanol:water:formicacid(70:25:5)asthemobilephasesystem,canbecompletedin16minsampleanalysis,andtheC1betweenpeaksobtainedgoodseparation.

【Keywords】HPLCgentamycinsulfateacid

硫酸庆大霉素是多组份的氨基糖甙类抗生素，4个主要成份为C1、C1a、C2a和C2，1]。采用高效液相色谱法测定硫酸庆大霉素注射液C组份，其难度在于C1峰与其大量其它杂质峰重叠，影响了组份测定的准确性。本文通过分析各国药典现行硫酸庆大霉素C组份的高效液相色谱法，考察了不同型号的色谱柱，流动相醇水比例，用甲酸代替冰醋酸及不同的前处理方法对硫酸庆大霉素C组份保留行为的影响，建立了甲醇：水：甲酸（70：25：5）为流动相系统成功地测定了硫酸庆大霉素注射液C组份，使C1峰与杂质峰分离良好。本法适用于硫酸庆大霉素注射液的质量控制，并为庆大霉素产品质量的改进，提供了依据。

1、实验方法

1.1药品与试剂

硫酸庆大霉素标准品（中国药品生物制品检定所），硫酸庆大霉素（东北制药总厂），硫酸庆大霉素注射液（市售），硫乙醇酸、异丙醇、冰醋酸、甲酸、甲醇均为色谱纯。

1.2高效液相系统

Waters2695型高效液相色谱仪，紫外检测器，色谱柱：WatersC18（250mm×4.6mm），流速：1.0ml/min，波长：330nm，进样量：10ul。

1.3方法

以甲醇：水：甲酸（70：25：5）为流动相，经色谱分离，采用归一化法计算各组份的百分数。

2、结果与讨论

2.1不同色谱柱的影响

以流动相甲醇：水：甲酸（70：25：5），流速1.0ml/min，测定3种不同厂家的色谱柱对硫酸庆大霉素C组份保留行为的影响。色谱柱对庆大霉素C组份的分离效果相当，但保留时间以Waters柱最合适。可见，采用Waters较为理想。

2.2流动相中醇水比例的影响

硫酸庆大霉素C组份对流动相中醇水比例十分敏感，甲醇浓度减少可使C1峰与相邻峰较好分离，但分离时间长。随着甲醇浓度的增大，分析周期缩短，但C1峰与相邻峰重叠，相对保留时间以甲醇：水：甲酸（70：25：5）为最佳[2]，分析周期恰当。

2.3流动相中冰醋酸的影响

从流动相中甲醇比例降低有利于C1峰与相邻峰分离得到启发，将冰醋酸改为甲酸以增加流动相极性，达到了预期的分离效果。在甲醇：水比例不变的前提下，将冰醋酸改为甲酸，C1峰与相邻峰能完全分开，且重现性好，结果更为准确。

3、小结

甲醇：水：甲酸（70：25：5）为流动相系统，对硫酸庆大霉素注射液样品中C组份相对比率的测定，即可C1峰与其相邻峰分开，又可使分析时间适宜，16min内即可完成样品分析，且重现性好，结果准确可靠，为硫酸庆大霉素注射液质量控制及质量标准的改进，提供了新的依据。

参考文献

[1]胡昌勤等：高效液相色谱流动相对庆大霉素C组份保留行为的影响中国抗生素杂志1994：19（1）：21～24

[2]中国药典HPLC分析庆大霉素组分条件的系统研究1995；二部：905