PTENⅣS4基因多态性与间质性肺病的关系

PTENⅣS4基因多态性与间质性肺病的关系

徐会青

徐会青(内蒙古赤峰市敖汉旗医院呼吸内科024300)

【摘要】目的：研究PTEN抑癌基因与间质性肺病的关系；方法：选择内蒙古赤峰市敖汉旗医院呼吸内科间质性肺疾病患者51人及健康体检人群55人，应用病例-对照研究，聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术,分析PTENⅣS4基因多态性。非条件Logistic回归分析PTENⅣS4与间质性肺病发病的关系。结果：1.、PTENⅣS4基因突变型(+/+)频率为11.6%、显著高于对照组(+/+)频率9.5%，差异有统计学意义（P<0.05）;2.病例组对照组间PTENⅣS4野生型(-/-)、杂合型(-/+)、基因频率无统计学差异（P>0.05）3.PTENⅣS4突变型(+/+)为间质性肺病的保护因素（OR>1,P<0.05）;4.PTENⅣS4野生型(-/-)、杂合型(-/+)与间质性肺炎的发病无关（P>0.05）【结论】PTENⅣS4基因突变型(+/+)可能降低间质性肺病的发病风险。

【关键词】PTEN间质性肺病表皮生长因子受体

【中图分类号】R563【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）15-0033-02

前言：间质性肺病(InterstitiallungDisease，简称ILD)是以弥漫性肺实质、肺泡炎和间质纤维化为病理基本改变，病因可能与粉尘等因素以及免疫源性因素相关，近年对免疫因素与间质性肺病的关系日益成为研究热点，研究者们期望从免疫学角度找出致病因素，以及进一步的干预手段为临床工作奠定基础。PTEN（第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因）经多研究证实为抑癌基因，抑制癌细胞的原理与多种免疫源性介质相关，因此本文拟从免疫学角度研究PTEN与间质性肺病的关系。

国内外大量研究证实PTENⅣS4有抑制呼吸系统、消化系统、女性生殖系统肿瘤的作用，具体机制待进一步研究[1-3]本文选择PTENⅣS4位点研究其与间质性肺病的关系。

2资料与方法

2.1临床资料

选择2009-2013年内蒙古赤峰市敖汉旗医院呼吸内科间质性肺疾病住院男性患者51人，经肺部CT证实，平均年龄65.4±9.7岁;健康体检男性人群55人，平均年龄62.8±8.6岁，两组间性别、年龄无显著性差异，无亲缘关系。

2.2标本的采集

无菌操作下，抽取患者肘静脉血2～3ｍｌ,存放于抗凝管中,4℃冰箱保存,1周内提取外周血白细胞ＤＮＡ。

2.3分子生物学实验

DNA试剂盒（宝生物生物制品公司）提取外周血DNA，采用PCR-RFLP方法将PTENⅣS4位点基因分型。上游引物5′-GGGGGTGATAACAGTATCTA-3′,下游引物5′-CTTTATGCAATACTTTTTCCTA-3′(上海生工合成)。ＰＣＲ反应体系50μｌ,PCR反应条件:94℃预变性5min;然后94℃变性30s,58℃退火45s,72℃延伸1min,35个循环后,72℃继续延伸5min。行琼脂糖凝胶电泳后,凝胶成像仪下观察判断基因型[4]。

2.4统计学分析

数据用SPSS19.0软件进行统计学分析,两组间基因型频率比较采用χ2检验。以非条件Logistic回归法分析危险因素及保护因素

3结果

3.1分析基因型所得三种基因型：野生型(-/-)、杂合型(-/+)、突变型(+/+)

3.2PTENⅣS4多态位点的基因型频率分布

病例组及对照组PTENⅣS4基因型分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律,表明所选样本具有群体代表性。病例组PTENⅣS4基因野生型(-/-)基因频率17.6%高于对照组5.4%（P<0.05）、两组间杂合型(-/+)、突变型(+/+)频率分别为76.4%、5.8%及、80%、14.5%，两组间无统计学差异(Ｐ>0.05)。

表1病例组与对照组PTENⅣS4

基因型频率及等位基因频率分布[例数(%)]

组别ｎ-/--/++/+

病例组519(17.6)39(76.4)3(5.8)*

对照组553(5.4)44(80)8(14.5)

*与对照组比较，P<0.05

3.3PTEN基因型分布与间质性肺病发病风险相关性分析

非条件Logistic回归分析PTENⅣS4突变型(+/+)可能

为间质性肺疾病的保护因素（OR=3.796,P<0.05）

4讨论

PTEN是1997年发现的一种肿瘤抑制基因,间质性肺疾病与慢性炎症反应，吸烟，免疫因素有关，机制不明，PTENⅣS4基因降低间质性肺疾病的发病风险相关机制分析如下：

日本一项有研究证实吉非替尼对于晚期非小细胞肺癌的疗效确切，针对日本晚期非小细胞肺癌患者的回顾性分析和前瞻性研究中吉非替尼引起的间质性肺病的发生率分别为3.5%和5.8%[5]，吉非替尼是针对表皮生长因子受体的靶向抗肿瘤药物，表皮生长因子是一种很强的促有丝分裂因子，可刺激多种组织细胞分裂和增生，并能促进肿瘤细胞的浸润和转移[6]。由此推测，间质性肺病的发病可能与表皮生长因子受体有关。

有研究证实PTEN可抑制表皮生长因子受体引起的细胞迁移和侵袭，可能与其蛋白磷酸酶活性有关[7]。由此推测，PTENⅣＳ4降低间质性肺病的发病风险的机制可能为PTEN抑制表皮生长因子受体的一系列生物学变化从而抑制间质性肺疾病的发病。

目前对PTENⅣＳ4与间质性肺病的研究甚少，仍需大量临床研究探索其发病的危险因素及保护因素，为今后的临床工作奠定基础。

5结论

PTENⅣS4基因突变型(+/+)可能降低间质性肺病的发病风险。

参考文献

[1]LiJ,YenC,LiawD,etal.PTENputativeproteintyrosinephosphatasegenemutatedinhumananbrainbreastandprostatecancer[J].Science1997,275(5308):1943-1947.

[2]JiSP,ZhangY,VanCleemputJ,etal.DisruptionofPTENcouplingwith5-HT2Creceptorssuppressesbehavioralresponsesinducedbydrugsofabuse[J].NatMed.2006,12(3):324-329.

[3]LeslisNR,YangX,DownesCP,etal.PtdIns(3,4,5)P(3)-dependentandindependentrolesforPTENinthecontrolofcellmigration[J].CurrBiol,2007,17(2):115-125.

[4]张晓燕,王红静,贾西彪,PTENⅣＳ4基因多态性与子宫内膜异位症发病风险的关系[J],第三军医大学学报,2010,9(32):979-981.

[5]GemmaA.Drug-inducedinterstitiallungdiseaseinmoleculartargetedtherapy[J].IntJClinOncol,2012,17(6):533.

[6]王慧,肿瘤靶向药物相关的间质性肺病的研究进展[J].临床肿瘤学杂志,2013,4(18):372-375.

[7]蔡秀梅,PTEN抑制表皮生长因子受体突变体工H引起的细胞侵袭及其分子机制研究[D].复旦大学博士论文.