应用亚甲兰显示石蜡切片中幽门螺杆菌

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应用亚甲兰显示石蜡切片中幽门螺杆菌

范银仓

自从上个世纪80年代初,Mashall和Warren从慢性胃病患者的胃黏膜中分离出幽门螺杆菌后,人们逐渐认识到幽门螺杆菌是胃炎、消化性胃溃疡的主要致病因素之一,人们从胃黏膜涂片、分离培养、尿素酶试验、试纸条、血清幽门螺杆菌抗体检测,都做了大量的试验方法的研究,但可靠性最好的仍是通过石蜡经过特殊染色来观察幽门螺杆菌,此种方法也较多。如:苏木素-伊红、硝酸银和Giemsa染色体等,但这些方法都有缺陷,为此我们通过用亚甲兰染色方法获得较好的效果。

1材料与方法

1.1标本来源选用2006年所有因消化道症状来我院接受胃镜检查的患者,在胃窦部取活检组织两块,通过10%福尔马林固定,常规石蜡包埋,切片厚4μm,每例切片三张,标本分别进行苏木素-伊红染色和亚甲兰染色、硝酸银染色。

1.2苏木素-伊红染色液常规配置,亚甲兰染液、硝酸银染液均购自福建三强生物化工有限公司。

1.3染色步骤⑴石蜡切片常规脱水;⑵滴入亚甲兰染液,使其浸置1分钟;⑶水洗;⑷自然干燥或吹干;⑸用透明中性树胶封固。

2结果

2.1亚甲兰染色使幽门螺杆菌呈蓝色,背景呈深蓝色,形状呈弧形、S形或海鸥展翅状,一般聚集成群、单个散在或片状分布于胃黏膜或腺体之中。

2.2苏木素-伊红染色呈红色、硝酸银染色呈黑色,形态同上。

3讨论

三种染色结果阳性率基本一致。

在常规苏木素-伊红染色中,由于幽门螺杆菌是一种较弱的嗜苏木素菌,着色较浅,形态不清,隐约可见,幽门螺杆菌较少时,不注意往往会漏诊,而亚甲兰染色显示幽门螺杆菌呈浅蓝色,形态结构清晰,镜下易被找到。经应用证实本法染色操作简单,染色时间短,试剂来源方便、期效长、价格便宜、染色结构可靠稳定,克服了其他方法如硝酸银染色方法操作复杂、不易掌握且试剂必须新鲜、价格较贵;尿素酶试剂条不能直接观察幽门螺杆菌等缺点,所以易被基层医院接受,更有利于推广使用,对于诊断幽门螺杆菌更具有实用价值,对临床医师提高胃病的治疗效果有所帮助。