新的天然免疫实验性治疗体外系统模式的应用

新的天然免疫实验性治疗体外系统模式的应用

郭峰

郭峰（上海长海医院输血科血液免疫研究实验室200433）

【摘要】目的我们通过构建体外生物制剂（如菌苗）枸橼酸抗凝新鲜血液的天然免疫治疗系统模式，可帮助确定生物药品(如细菌多糖类)调控血液天然免疫炎症反应的机制与作用点,我们己做了大量研究工作.为了在医疗研究方面得到共识与应用,在本文例举了一个应用范例,说明可利用在肿瘤天然免疫治疗机制实验研究上,这是一种系统免疫学生物制剂机理体外实验方法,在一定范围内可代替动物免疫治疗实验,简便可行,可推广应用与验证,希望引起关注与兴趣。

【关键词】天然免疫治疗体外系统模式淋巴瘤生物制剂大肠杆菌菌苗CD55分子血液天然免疫炎症反应细胞因子

系统免疫学是现代免疫学重要的研究方向和领域,对生物免疫调节剂(包括菌苗和瘤苗)机理提倡用系统免疫学方法进行横向网络联系的深入研究[1].我们的研究也证明血液中免疫系统是由补体等可溶性天然免疫子系统,红细胞天然免疫子系统,血小板天然免疫子系统,白细胞天然免疫和适应性免疫子系统组成,这些子系统之间存在网络关系.外来抗原进入血液,激发这些子系统的一系列天然免疫反应和适应性免疫反应,这是一种系统免疫反应.这种系统血液免疫学研究属於现代系统免疫学.我们在试管正常人枸橼酸抗凝新鲜血液中加入灭活癌细胞(S180)作用1小时可引发红细胞CD35分子表达量明显下降,白细胞CD35分子表达量明显上升。灭活大肠杆菌加入后可激话白细胞释放IL-8和IL-12等细胞因子含量上升,[3,4,5]抗原在枸橼酸抗凝新鲜血中可重演血环循中的系统免疫反应。

这些研究表明:枸橼酸抗凝新鲜血液是一个充满活力和生命的全血细胞悬液，这是一个血的生命系统和血液系统的体外仿真模型。在一个更加一体化的这种体外血的生命系统中可溶性物质各种血细胞和免疫记忆细胞之间,有完整的生物信息网络,外来抗原可激活这一信息网络,使血液中各免疫子系统之间免疫反应信息(如CD35和各种细胞因子指标)有强烈的变化[2-5]。这使我们联想到可以利用这一实验模型做淋巴瘤菌苗天然免疫治疗系统免疫学机理体外实验研究.现将研究结果简述如下供读者参阅。

1.研究方法

一共有11例淋巴瘤患者的枸橼酸抗凝新鲜的血液样本进行了测试。(1):新鲜血液大肠杆菌菌苗实验组：0.2毫升（热灭活）大肠杆菌（6×109/ml）悬液与0.6毫升枸橼酸抗凝新鲜血液混合充分.(2):新鲜血液的对照组：0.2毫升生理盐水与0.6毫升新鲜枸橼酸抗凝全血混合充分，在37℃孵育1小时，然后离心5分钟，每分钟2000转。在新鲜的血液免疫反应后的全血细胞CD55和CD59的表达量，用流式细胞仪单克隆荧光抗体直接染色法测定每种血细胞的荧光平均强度,统计每种血细胞的CD55和CD59的荧光平均强度,算出每种血细胞CD55和CD59的荧光平均强度差异的t值和p值。

2.研究结果

新鲜血液大肠杆菌疫苗的实验组平均荧光强度的全部表达所示：854.30±171.21（粒细胞CD55），65.06±23.52（粒细胞上CD59），49.59±10.60（淋巴细胞CD55），35.40±16.79（淋巴细胞CD59），15.57±2.79（红细胞CD55），90.53±29.9（红细胞CD59）。新鲜血液对照组的平均荧光强度的表达所示：1071.77±214.3（粒细胞上CD55），54.02±15.56（粒细胞上CD59），46.79±16.56（淋巴细胞CD55），34.50±11.35（淋巴细胞CD59），13.59±3.19（红细胞CD55），87.51±22.20(红细胞CD59）。在新鲜血液大肠杆菌菌苗的实验组中粒细胞CD55的表达水平（854.30±171.21）明显低于新鲜血液对照组中粒细胞CD55表达水平（1071.77±214.30）（t=2.6287，P<0.05）。新鲜血液大肠杆菌菌苗的实验组红细胞CD59的表达水平（90.53±29.90）略高于新鲜血液对照组红细胞CD59的表达水平（87.51±21.80）。

3.讨论

CD55分子是补体衰变加速因子,可以保护细胞不受补体活化破坏,肿瘤患者肿瘤细胞CD55分子表达量高,补体活化不易破坏肿瘤细胞(6),而肿瘤患者粒细胞CD55分子表达量高,粒细胞不易破碎释放LI-8等促炎细胞因子.我们实验发现大肠杆菌（菌苗）可调节全血细胞CD55,CD59等分子和粒细胞等释放IL-8和IL-12等细胞因子(7)。本研究表明大肠杆菌（菌苗）治疗有降低淋巴瘤患者血液中粒细胞补体调节蛋白CD55分子表达量,有使粒细胞容易破裂而释放IL-8等细胞因子的放大作用,可增强系统血液天然免疫炎症反应,杀死癌细胞。我们可以设想灭活大肠杆菌和灭活癌细胞制成的混和瘤苗治疗有增强各种细胞因子对抗肿瘤细胞的适应性免疫反应的正调节作用,提高瘤苗抗癌的适应性免疫治疗效果.各种生物天然免疫调节剂(包括中药免疫调节剂多糖类)可以直接在体外血液生命系统模式中被快速识别,激话各种血细胞,释放多种细胞因子,促进一系列天然免疫炎症反应,这是一种系统血液天然免疫反应。

4.结论

这种天然免疫实验性治疗肿瘤体外系统模式可应用在多种生物制品的天然免疫活性机制研究和测试上。这种系统血液天然免疫学研究方法属於现代系统免疫学的新方法,具有理论与实际应用价值[4,5,7],根据研究目的,可设计不同研究内容和指标的体外系统模式应用在不同生物免疫调节剂治疗机理的研制与监测方面以及各种中药免疫调节多糖研制上[8]。这种研究方法具有我们研究思路的特色,希望引起关注和研究兴趣[4,8,9]。

参考文献

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[3]郭峰.崭新的系统血液固有免疫学研究.中国医药生物技术.2010.5(1):3-14.

[4]郭峰.现代系统免疫学的形成与发展.中国免疫学杂志.2010.26(1):88-91.

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[7]郭峰.临床实用的新思路和新方法:体外血液生命系统药物治疗个体化试验.临床医学工程杂志.2011.18(1):4-6

[8]郭峰.浅谈开展中医药现代系统免疫学研究的重要性.深圳中西医结合杂志.2010.20(1):8-10.

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