ABXPentra60血细胞分析仪检测原理及各项参数的临床意义

ABXPentra60血细胞分析仪检测原理及各项参数的临床意义

陈立民1李晓燕2

ABXPentra60血细胞分析仪检测原理及各项参数的临床意义

陈立民1李晓燕2（1河南开封市中医院475000；2河南省医药学校475000）

【中图分类号】R446.11+1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）19-0119-03

【关键词】血细胞分析仪电阻抗光散射贫血直方图散点图

血细胞常规分析（血Rt）是临床实验室检查最常用的项目之一，血Rt结果直接影响着临床对疾病的诊治，随着检测技术的发展，及计算机数字化分析的运用，血Rt项目从以前的几项发展到今天的二十甚至三十余项，不但省去了以前大量费时费力的体力劳动而且检测速度更快，更准确更可靠，检测项目更多临床意义更大。本文就我科新近的一台全自动血细胞分析仪—ABXPentra60（以下简称P60）检测原理及各项参数的临床意义进行简要分析，希望对临床诊治疾病有所帮助。

一、性能

P60有CBC和CBC+5DIFF两种模式可报告26项参数，两种模式检测速度均为60测试/小时。根据有关实验室对P60准确度、精密度分析数据显示P60日内精密度CV%<2%日、间精密度CV%<3%、总重复率CV%<3%符合相关要求。白细胞分类与人工分类相关性分析中中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞的P均>5有良好的相关性。对异常细胞、有核红细胞均能检出，是台较好的血细胞分析仪。

二、检测原理

P60检测时血液分成三部分进行不同的稀释检测：RBCHbPLT及相关项目检测；WBC嗜碱性粒细胞的检测；中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞的分类计数。检测过程运用了电阻抗原理、光散射原理、双鞘流技术（ABX专利）等。

1、RBCHbPLT及相关项目检测

取血液10μl分两次稀释成1：10000后通过两端具有稳定电流的微孔，由于细胞是不良导体通过时效空感应区内电阻增加于是瞬间电压差变化产生一个脉冲信号脉冲大小随细胞体积而变化及电阻抗原理（也称Coulter原理），脉冲信号经放大、阈值调节、甄别、整形后送入计数系统分析后可得出：RBCPLTHCVMPVRBC直方图PLT直方图

Hb测定：Hb从溶解的RBC中释放与KCN结合形成氰化高铁血红蛋白在550nm出比色得出结果。

2、WBC嗜碱性粒细胞的检测

取血液10μl加嗜碱细胞溶血素2000μl将RBC迅速溶解并对嗜碱细胞进行染色以区分与其他细胞，然后以鞘流方式进行两次检测：一次利用电阻抗检测细胞体积大小，一次利用0度角光照射细胞着色后的细胞透光度减弱光散射较强，综合两次检测数据得出WBCBASO%

3、中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、单核细胞分类计数

取血液25μl加嗜酸细胞染液1000μl和稀释液1000μl35℃孵育12s嗜酸染液能对白细胞脂质、蛋白组分进行活体染色同时固定细胞形态使其保持自然状态四种细胞的着色程度依次是嗜酸、中性、单核、淋巴，之后以鞘流方式进行电阻抗、光散射检测（所谓的双鞘流）。以横轴表示细胞体积大小纵轴表示细胞光散射强度可得到白细胞分类散点图。

嗜酸性粒细胞着色最强而位于最上方散点表示细胞出现的频率

中性粒细胞着色次于嗜酸由于其胞和的分叶使其散射增强位于嗜酸下方

单核细胞胞核核质疏松散射较弱位于中性细胞下但其体积较大而位于右侧

淋巴细胞胞体较小散射最弱因此位于左下方

异型淋巴细胞介于淋巴与单核之间

巨大不成熟细胞胞体大而且散光强度较弱位于单核细胞右侧

4、计算得出的参数

血Rt报告单中由系统计算的参数有：HCTMCHMCHCRDWPCTPDWNEU#ESO#BASO#LIC#MON#ALY#LIC#

计算公式分别为：

HCT=MCV×红细胞个数在全血中的比例

PCT=MPV×血小板个数在全血中的比例

RDW=KSD/MCV其中K是系统常数SD是RBC大小分布范围标准差，由RBC直方图得出

PDW=KSD/MPV其中K是系统常数SD是PLT大小分布范围标准差，由PLT直方图得出

MCH=Hb/RBCMCHC=Hb/HCT

NEU#ESO#BASO#LIC#MON#ALY#LIC#分别是NEU%ESO%BASO%LIC%MON%ALY%LIC%×WBC所得

三、分析参数的临床意义

正确分析试验数据，准确用于临床才能充分发挥仪器的效能。很多医师看血Rt报告单仅限于RBCHbWBCPLTNEU%ESO%BASO%LIC%MON%其他项目很少注意，一下对那些不太注意但对临床诊治疾病有意义的项目作简单介绍：

1、RDWMCVMCHMCHCRBC直方图在贫血中的应用

根据MCVMCHMCHC可对贫血进行初步形态学分类（见表1）

表1MCVMCHMCHC在贫血形态学中的应用

RDW还可用于贫血病因学鉴别诊断，例如：肾性贫血RDW正常肝性贫血RDW增高。值得提出的是MCV与RDW结合分析对贫血的鉴别诊断有重要意义，不同病因引起的RBC病理变化体现在MCV、RDW的不同。例如：在缺铁性贫血和轻型β地贫中由于Hb合成障碍Hb含量减少导致细胞体积减小都表现为MCVMCHMCHC减低但缺铁贫RDW明显增高而轻型β地贫RDW大致正常。根据MCVRDW可对贫血进行形态学分类（见表2）

表2MCVRDW在贫血形态学分类中的应用

另外RDW对缺铁贫有特殊的诊断价值如患者检查结果为MCV降低而RDW大致正常基本可以排除缺铁贫的诊断，甚至有文献报道在33%的隐性缺铁贫病例中即使没有明显的RBCHb降低仍可见RDW异常。

RBC直方图以横轴表示细胞以及纵轴表示不同体积的红细胞出现的相对频率。正常人红细胞体积分布曲线呈正态分布峰顶在82fl—96fl之间体积主要分布在50fl—200fl之间,分析报告时应注意主峰的位置峰基地宽度及是否有双峰出现，小细胞时主峰左移大细胞右移，细胞均一峰基底较窄不均一时峰基底变宽，出现双峰说明有两个细胞群存在，IDA经治疗有效时可出现峰底更宽的类似双峰图形，巨幼贫经治疗有效时打细胞与正常细胞同时存在也可见双峰现象。图1是几种常见贫血RBC直方图

2、MPVPDW的临床意义

众所周知PLT是巨核细胞胞浆剥落的碎片，在骨髓中从4倍体到32倍体巨核细胞均能产生PLT，高倍体产生的PLT体积大凝血功能强低倍体产生的PLT体积小凝血功能弱，在高MPVPLT群中大PLT多凝血功能强，但在低MPV时即使无PLT明显降低临床也可能出现出血倾向；MPV↑见于：①PLT破坏增加而骨髓代偿功能良好者。②造血功能抑制解除后。MPV↑是早血功能恢复的首要表现。MPV↓鉴于：①骨髓早血功能不良，PLT生成减少。②有半数白血病患者MPV↓。③MPV随PLT个数持续下降是骨髓造血功能衰竭的指标之一。另外对于是骨髓病变造成的PLT↓如MDS（骨髓增生异常综合征），还是外周血中抗体所致的PLT破坏过多而减少如：ITP（特发性血小板减少性紫癜）有一定的鉴别作用，骨髓病变时巨核细胞多限于2倍体、4倍体血小板生成减少，即使生成体积也小，而ITP是由PLT破坏过多引起的为了代偿巨核细胞增生，产生的PLT体积大。

PDW↑见于：急性髓性白血病、巨幼贫、慢粒、脾切除、巨大PLT综合征、血栓性疾病等。

3、白细胞散点图的临床应用

P60报告中还有一个散点图是大家关注较少的一部分，只是关注细胞分类，细胞的百分比是依此图为基础的图中不但显示各类细胞的多少还显示了这些细胞形态分布情况，正常分类的细胞群紧密聚集成团个群之间界限明显，当细胞形态学异常时表现为细胞群位置的漂移，如果位置漂移过大，将影响细胞的分类，从而导致细胞分类的不可靠。图2是P60报告的散点图，图3是其结构图，了解散点图对掌握细胞形态的变化有重要作用，图中各线所代表的阈值见表3。

表3阈值分布表

阈值作用阈值作用

NOLMN报警区通道数MN单核与中性的拐点

NON区分噪音与中性左区RM区分单核与单核右区

LL区分淋巴左区与淋巴RN区分中性与中性右区

LN区分中性与中性左区NL区分淋巴与中性

NOE区分噪音与嗜酸RMN区分单核右与中性右

LMN区分中性、淋巴、单核NE区分中性与嗜酸

LMD异淋与单核下拐点PLNLN报警区通道数

FNENE报警区通道数

FMNMN报警区通道数

四、结束语

应用血细胞分析仪的目的是在于筛选，通过仪器将正常或无明显形态变化的样本视为正常不用镜检，再好的仪器也代替不了人工镜检，镜检仍是血细胞形态病理变化的金标准。在工作中我们对提示异常的标本进行人工镜检，在分析报告单时应以人工镜检结果为准。

参考文献

[1]朱晓峰,姚彦.ABXPentra60准确度、精密度的评价.实用医技杂志2004年10月第11卷上半月版：2240—2241

[2]ABXPentra60中文操作手册.2版.

[3]罗春丽,刘体含.临床检验基础.2版—北京：人民卫生出版社.

[4]从玉隆,乐家新.在论血细胞分析技术进展与临床应用.中华检验医学杂志.07,4：365—370.

[5]陈文彬.诊断学—6版.北京.人民卫生出版社2004.

[6]刘春.生化检验质量与报告时间满意度的分析.青岛医药卫生2010年42卷第5期.