比较临床生化检验中改良终点法和原终点法的应用效果

比较临床生化检验中改良终点法和原终点法的应用效果

黄俊生

黄俊生(河南省濮阳市妇幼保健院检验科457000)

【摘要】目的：比较临床生化检验中改良终点法和原终点法的应用效果。方法：运用改良终点法与原终点法进行实例检测，评价两种检测方法的相关性、精密度严格依据NCCLS制定的评价方案。结果：两种检测方法检验结果差异不大（P＞0.05）；改良终点法在批内CV和总CV测定中，正常浓度下高于原终点法，异常浓度下低于原终点法，差异显著（P＜0.05）。结论：临床生化检验中改良终点法的精密度均比原终点法优，极大节约了成本，值得推广。

【关键词】改良终点法原终点法生化检验

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2014）20-0064-02

在临床生化检验中，终点法是实验室最常用的一种检测方法，它计算待测物浓度的方法为混合样品和试剂，反应一定时间后达到平衡点（终点）。一点终点法和两点终点法是终点法的两个主要类型[1]，依据方法学理论，我们在对程序进行测定的过程中将改良一点终点法设计了出来，同时以氧化酶法对血清葡萄糖进行测定为例，依据NCCLS制定的评价方案，比较分析了改良终点法和原终点法的相关性，并评价了二者的精密度，现报告如下。

1.材料和方法

1.1检验材料

所用仪器为MODULARDPP全自动生化分析仪（德国罗氏），在测定时保证仪器的工作状态良好；所用试剂为LotNo.522UN/2标准血清（英国RANDOX公司）和Level2-780UN,Level3-597UE质控血清（英国RANDOX公司），所用试剂盒为液体单试剂型（氧化酶法）葡萄糖测定试剂盒（德国罗氏，Lot：68159801）；所用标本为血清标本，这些标本均没有溶血、脂浊等，1h内完成所有检测；葡萄糖标准液的精确规格[2.00g/dl(111.00mmol/L)]。

1.2检验方法

1.2.1相关性比较

定标时运用RANDOX标准血清，室内质控在每次测定中必不可少。原终点法的测光点、波长、样品量、试剂量R1、反应方向、单点定标如表1所示。依据NCCLS制定的评价方案，每天将10份临床标本收集起来，这些标本的葡萄糖浓度有高、中、低三个类型，按1-10号顺序分别运用改良终点法与原终点法测定，然后按10-1的顺序分别运用改良终点法与原终点法测定，取两次测量结果的均值。进行10d的连续测量，标本数为100份，运用配对t检验及直线回归分析两种方法所得结果。

表1改良终点法与原终点法的程序参数设置（葡萄糖测定）

1.2.2精密度在对精密度进行测算时严格依据美国国家临床实验室标准化委员会（NCCLS）制定的评价方案，将2份质控血清选取出来，其中一份具有正常的浓度，另一份具有异常的浓度，对其进行复溶，复溶时严格依据说明书，然后将其在塑料管中分装，每管250μl，在-20℃的温度下将封闭管口的两种液体冷冻保存，每次使用前和使用后分别让其融化到室温和丢弃，每次使用过程中双份测定每份浓度的质控血清，试验做到定时定点，每天2批，上下午各1次，共进行20d的测定，同时进行室内质控，计算出批内的不精密度，然后计算出总不精密度。

1.3统计学分析本次所有调查数据均采用软件SPSS20.0进行统计分析，其各项临床指标分别采用均数或百分比表示，用t或卡方检验，当P<0.05时表示其差异具有统计学意义。

2.结果

2.1相关性回归方程为y=1.0112x－0.0381，r=0.9992（n=100），改良终点法与原终点法测定结果之间的差异不显著（P＞0.05）。

2.2精密度正常浓度下改良终点法测定的批内CV和总CV均明显比原终点法高（P<0.05），异常浓度下改良终点法测定的批内CV和总CV均明显比原终点法低（P<0.05）。具体见表2。

表2改良终点法与原终点法测定的精密度结果比较

3.讨论

近年来，在生化分析中，终点法得到了日益广泛的应用，总蛋白双缩脲法、葡萄糖氧化酶法等是临床生化检验中的常用实验，极具代表性[2]。通常情况下，临床手工操作完成终点法。我们在对终点法进行改良的过程中严格依据了其检测原理，即减半混合样品和试剂量，前提是样品和试剂的比例保持不变，在终点前（仪器测光前）将等量的水加入其中均匀稀释，然后对其吸光度进行测定。在将水加入第二试剂的情况下，在全自动生化分析仪上，我们可以使单试剂终点法和双试剂终点法相互转换；在第三试剂中注水的情况下，双试剂终点法和三试剂终点法也可以相互转换。

随着全自动生化分析仪的日益广泛的应用，生化分析的智能化、微量化日益突出，目前广大检验工作者的一个工作和研究重点就是在对检测方法进行有效的改良的过程中运用先进的检测设备，从而将试剂成本减少到最低限度[3]。我们在临床生化检验工作中对终点法进行了改良，经室内质控及室间质量评价所获取的临床效果是极为令人满意的，通常情况下不需要稀释高浓度标本，这是因为测定线性范围较宽，同时可以将原终点法中所使用的试剂量减半，从而达到了将实际成本减少到最低限度的目的。总之，在临床生化检验中高浓度时改良终点法的精密度均比原终点法优，极大节约了成本，值得在临床广为推广。

参考文献

[1]朱延清.反应曲线在临床生化检验中的应用[J].国际检验医学杂志,2011,(12):1368-1371.

[2]黄健,张刘冬.改良终点法在临床生化检验中的应用探讨[J].海南医学,2010,(22):46-47.

[3]沈燕.无添加剂管、普通促凝管、分离胶促凝管在临床生化检验中对比分析[J].当代医学,2013,(26):72-73.