血清游离轻链检测在多发性骨髓瘤的临床意义

血清游离轻链检测在多发性骨髓瘤的临床意义

赵雪芸徐宁王强王艺任秀莲

赵雪芸徐宁王强王艺任秀莲（内蒙古包头市中心医院血液科014040）

【摘要】目的探讨血清游离轻链(sFLC)检测对于多发性骨髓瘤(MM)诊断的临床意义。方法选择2012年8月至2015年10月在我院收治的32例初发MM患者；正常对照26例，为我院体检中心体检结论正常的健康人。采用免疫比浊法测定病例组及对照组sFLC-κ、sFLC-λ，计算sFLC-κ/λ比值(rFLC)，比较两组间差异。同时检测病例组尿轻链(uFLC)、血清总轻链(sTLC)、免疫固定电泳(IFE)、血清蛋白电泳(SPE)，分别与血清FLC检测法比较敏感性。结果病例组sFLC及rFLC与正常对照组比较有明显统计学差异(P<0.001)。32例初发MM患者sFLC、rFLC31例阳性，阳性率96.9%；应用血清总轻链法检测有24例检测出异常轻链，检出率为75%，两组检出率比较存在统计学差异(P<0.05)。应用尿轻链测定法检测25例存在异常轻链，检出率为78%；应用SPE检测有26例为阳性，阳性率为84%，以上两种检测方法与血清FLC法检出率比较均存在统计学差异(P<0.05)。应用血清IFE检测法有30例为阳性，阳性率为93.8%，与血清FLC法检出率比较无统计学差异(P>0.05)。结论sFLC检测是一种高度敏感的定量检测方法，与免疫固定电泳结合，可以提高疾病检出率，有助于MM患者的诊断。

【关键词】多发性骨髓瘤；血清游离轻链；血清游离轻链比值【中图分类号】R2【文献标号】A【文章编号】2095-9753（2016）4-0108-02

多发性骨髓瘤(multiplemyeloma,MM)是一种恶性克隆性浆细胞肿瘤,主要特征是正常免疫球蛋白分泌受抑制，出现了单克隆B淋巴细胞恶性增殖,产生大量单克隆免疫球蛋白分子（Ig）,Ig由2条重链和2条轻链构成。轻链分为κ、λ型。正常人sFLC维持在一定范围,当MM患者产生大量单克隆Ig分子,其分泌的单克隆轻链明显多于重链,从而在血液中出现FLC。免疫比浊法是一种高敏感定量测定sFLC的技术,其单克隆抗体特异性结合于免疫球蛋白轻链与重链的结合区,因此可以精确测定sFLC数值,测定血清κ、λFLC并结合κ/λ比率（rFLC）对于鉴别MM有重要意义[1]。

在临床上已将sFLC测定用于包括MM在内的浆细胞病的诊断、监测及其预后判断［2］。本研究利用全自动免疫分析仪,采用散射比浊法测定MM患者及正常健康人血清中κFLC和λFLC水平,并计算rFLC,同时检测病例组尿轻链、总轻链、免疫固定电泳(IFE)、血清蛋白电泳(SPE)，分别与血清FLC检测法比较敏感性。探讨血清FLC在MM患者临床诊断中的意义。

材料与方法临床资料2012年08月至2015年10月我科初治的MM患者共32例，病例诊断符合张之南等主编《血液病诊断及疗效标准》第三版的MM诊断标准[3]。选择2012年8月至2015年10月在包头市中心医院血液科收治的32例初发MM患者,男19例,女13例，中位年龄64.5岁(44－81岁)，其中IgG型17例（IgGκ型7例，IgGλ型10例），IgA型10例（IgAκ型6例，IgAλ型4例），轻链型5例（κ轻链型2例，λ轻链型3例）。正常对照26例，为包头市中心医院体检中心体检结论正常的健康人，其中男16例，女10例，中位年龄62岁（40-80岁）。促凝管抽取初治MM患者及正常对照清晨空腹静脉血6ml，标本要求无脂血、溶血,37℃静置2小时，1500转/分离心5分钟，吸取上层血清,-20℃冻存。

仪器及方法血清k、λ轻链检测：采用美国Beckman公司的IMMAGE800全自动特定蛋白分析仪及血清κ、λ轻链测定试剂盒，总轻链、尿轻链试剂盒，应用免疫散射比浊法测定血清中κ、λ轻链值，计算游离κ/λ比值，检测总轻链值、尿轻链值。血清蛋白电泳及免疫固定电泳检测：采用法国sebia全自动电泳分析仪，及原装配套血清蛋白电泳、琼脂糖凝胶免疫固定电泳试剂盒，严格按照试剂盒说明书操作。

统计学处理全部数据用统计分析软件SPSS17.0分析，病例组与对照组均数比较采用配对样本t检验，P<0.05为差异有统计学意义。计数资料用配对设计四格表的卡方检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

结果病例组血清κFLC、λFLC明显高于正常对照组(P<0.001)(表1)。病例组rFLC与正常对照组比较差异有统计学意义（P<0.001）。

32例初发MM患者sFLC、rFLC31例阳性，阳性率96.9%；应用血清总轻链法检测有24例检测出异常轻链，检出率为75%，以上两组检出率以配对设计四格表的卡方检验做统计比较存在统计学差异(P<0.05)。应用尿轻链测定法检测25例存在异常轻链，检出率为78%；应用SPE检测有26例为阳性，阳性率为84%，以上两种检测方法与血清FLC法检出率分别以配对设计四格表的卡方检验做统计比较存在统计学差异(P<0.05)。应用血清IFE检测法有30例为阳性，阳性率为93.8%，与血清FLC法检出率以配对设计四格表的卡方检验做统计比较无统计学差异(P>0.05)。

结论sFLC检测是一种高度敏感的定量检测方法，与免疫固定电泳结合，可以提高疾病检出率，有助于MM患者的诊断。

讨论MM是骨髓中恶性浆细胞过度增殖,导致血清或尿液中出克隆性Ig或其轻链、重链的一种疾病。SPE、IFE、uFLC、sTLC等检测方法为诊断多发性骨髓瘤及疗效评价的主要指标，但前两者都是定性检测，对疾病的治疗监测不能量化，且与sTLC均有敏感性不高的缺点，部分轻链型患者因其轻链未达测定范围，从而导致患者漏诊。尿轻链数值受肾小球滤过率影响，稳定性较血清FLC差，且尿轻链测定需留取24小时尿液，而血清FLC测定应用全自动生化分析仪自动分析，方法简便易于掌握。因此近年来sFLC的检测备受关注。血清FLC的浓度取决于其合成与肾脏清除代谢之间的动态平衡。当正常人的多克隆免疫球蛋白增多和(或)肾脏功能受损时，因血清κ和λ型游离轻链会同时增长，固κ/λ比值不变。

相反，在骨髓瘤患者中，一种单克隆免疫球蛋白轻链异常过度增生，另一种轻链的生成受到抑制，结果κ/λ比值会明显异常。因此κ/λ比值异常可提示MM克隆性增殖[4]。2006年国际骨髓瘤协作组把FLC比率变化纳入新的评定标准中,测定血清FLC被认为在MM的诊断及疗效评估中具有重要的指导意义[5]。本研究通过实验验证初诊MM患者较正常健康人的sFLC明显增高，rFLC差异有统计学意义，对于MM患者sFLC阳性检出率高于SPE、IFE、uFLC、sTLC阳性检出率，经配对设计四格表的卡方检验验证了SPE、uFLC、sTLC与sFLC阳性检出率差异有统计学意义，提示sFLC测定的敏感性较其他检测方法高。IFE与sFLC阳性检出率比较无明显差异。本研究由于入选病例数量较少，随访时间尚短，没有做sFLC在疾病治疗预后等方面的全面研究，在今后的工作中将进一步完善。综上所诉，sFLC检测是一种高度敏感的定量检测方法，与免疫固定电泳结合，可以提高疾病检出率，有助于MM患者的诊断。

参考文献[1]DraysonM,TangLX,DrewR,etal.Serumfreelight-chainmeasurementsforidentifyingandmonitoringpatientswithnonsecretorymultiplemyeloma.Blood,2001;97:2900-2902.[2]HardingSJ，MeadGP，BradwellAＲ，etal．SerumfreelightchainsimmunoassayasanadjuncttoserumproteinelectrophoresisandimmunofixationelectrophoresisinthedetectionofmultiplemyelomaandotherB-cellmalignancies．ClinChemLabMed，2009;47(3):302－304．[3]张之南，沈悌主编.血液病诊断及疗效标准，第三版．北京:科学出版社，1998:157－163．[4]KatzmannJA,ClarkRJ,AbrahamRS,etal.Serumreferenceintervalsanddiagnosticrangesforfreekappaandfreelambdaimmunoglobulinlightchains:relativesensitivityfordetectionofmonoclonallightchains.ClinicalChemistry,2002,48(9):1437-1444[5]DurieBG，HarousseauJL，MiguelJS，etal．Internationaluniformresponsecriteriaformultiplemyeloma．Leukemia，2006;20(9):1467－1473．作者简介：赵雪芸女1982年11月最高学历:硕士研究生主治医师工作单位：内蒙古包头市中心医院