HPLC法测定制何首乌的含量

HPLC法测定制何首乌的含量

李佳睿1李娜2

李佳睿1李娜2

(1吉林省肿瘤医院吉林长春130000；2吉林省辽源市食品药品检验所吉林辽源136200)

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）31-0156-02

【摘要】目的对制何首乌进行质量控制。方法采用HPLC法测定制何首乌的含量。HPLC条件为色谱柱：SunFireTMC18（5μm4.6×150mm）Columm；流动相：乙腈-水（25：75）作为流动相；检测波长为320nm。柱温：30℃。结果HPLC测定制何首乌在0.408μg～4.488μg范围内呈良好线性关系。结论该方法简便易行，重现性好，可用于制何首乌的质量控制。

【关键词】制何首乌HPLC含量测定

【Abstract】Objective：ThequalitycontrolsystemofPolygonum.METHODS：HPLCmethodforthedeterminationofthecontentoffleece-flowerrootsystem.HPLCconditionscolumn：SunFireTMC18（5μm4.6×150mm）Columm；mobilephase：acetonitrile-water(25:75)asmobilephase；thedetectionwavelengthwas320nm。Columntemperature：30℃.Results：HPLCdeterminationoffleece-flowerrootsystemintherangeof0.408μg～4.488μgwaslinear.Conclusion:Thismethodissimple，reproducible，andcanbeusedforqualitycontrolofPolygonumsystem.

本实验采用《中国药典》2010版一部“制何首乌”含量测定项下的含量测定方法，采用高效液相色谱法测定制何首乌的含量，对药典方法加以简单数据说明，希望对药品检验工作人员有所帮助。

1方法

1.1仪器与试药

Waters2695高效液相色谱仪，2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷对照品，购于中国药品生物制品检定所（供含量测定用，批号：110844-200908）乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂均为优级纯。

1.2色谱条件

色谱柱：SunFireTMC18（5μm4.6×150mm）Columm；流动相：乙腈-水（25：75）作为流动相；检测波长：320nm[1，2]。柱温：30℃[1，2]；理论板数按制何首乌峰计算应不低于2000。

1.3溶液的制备

对照品溶液的制备：精密称取2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷对照品适量，加稀乙醇制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。

供试品溶液的制备：取本品粉末（过四号筛）约0.2g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇25ml，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，即得。

2系统适用性试验

（对照品图谱）（供试品图谱）

2.1线性关系考察

分别精密吸取对照品溶液（0.2mg/ml）2.0、6.0、10.0、14.0、18.0、22.0μl依次注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以进样量（μg）为横坐标X，制何首乌峰面积为纵坐标Y作图，得一直线，近似通过原点。其线性回归方程为y=709209x-103034,相关系数γ2=0.9995。结果表明，制何首乌在0.408μg-4.488μg范围内样品含量与峰面积呈良好的线性关系。

2.2精密度试验

精密吸取同一对照品溶液10μl，连续进样6次，测定制何首乌峰面积积分值，RSD为0.10%，所用仪器具良好的精密性。

2.3重复性试验

取同一供试品6份，分别按供试品溶液制备方法制成样品溶液，分别进行测定制何首乌含量，RSD为0.33%，本法具有良好的重现性。

2.4稳定性试验

取同一供试品溶液,依法分别于0、2、5、8、10、12小时进样，制何首乌峰面积积分值,RSD为1.01%，12小时内供试品溶液中制何首乌的含量基本稳定。

3样品测定结果

依正文方法测定三批样品，结果见表2。

表2制何首乌的含量测定结果

4结果

本实验根据《中国药典》2010年版一部制何首乌中含量测定项下，采用HPLC法测定三个不同单位提供的制何首乌的含量，辅以数据说明。结果方法稳定，可靠，灵敏度高，重现性好，方法操作简便易行。

参考文献

[1]国家药典委员会编.中华人民共和国药典2010版一部北京：化学工业出版社.

[2]国家药典委员会编.中国药典高效液相色谱图集第一卷北京：人民卫生出版社.