Sebia毛细管电泳仪系统结合MCV、MCH对506例产前孕妇地中海贫血的检测分析

Sebia毛细管电泳仪系统结合MCV、MCH对506例产前孕妇地中海贫血的检测分析

庞丹凤罗元标杨希

庞丹凤罗元标杨希（北流市人民医院广西北流537400）

【摘要】目的探讨Sebia毛细管电泳仪系统结合MCV、MCH在检测产前孕妇地中海贫血中的作用。方法应用法国Sebia毛细管电泳仪系统进行血红蛋白电泳检测和用XT-1800i全自动血球计数仪检测平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞浓度（MCH）。结果共检测产前孕妇506例,共检出地中海贫血和异常血红蛋白病患者89例,占17.59%(89/506)。结论全自动电泳系统具有很高的分辨率,避免人工操作的某些技术及客观条件的误差,结合红细胞参数MCV、MCH，用于高危人群产前孕妇地中海贫血的筛查简单、方便、快捷,取得了良好的效果。

【关键词】产前检查地中海贫血血红蛋白电泳

Sebia毛细管电泳仪系统是近年引进的多功能蛋白电泳检查的仪器,其从标本的检测到打印出检验结果,用计算机控制程序替代了人的手工操作,避免了人工操作的某些技术及客观条件的误差。可用于多种蛋白电泳测定,血红蛋白(Hb)电泳就是其测定的项目之一。Hb电泳常用于诊断地中海贫血和异常血红蛋白病,广西是地中海贫血的高发区,故血红蛋白电泳检查更显重要。本院将全自动蛋白电泳系统应用结合红细胞参数于产前妊娠妇女地中海贫血检查,取得了良好的效果。现将2011年3月至2011年12月所检测的506例妊娠妇女产前检查的Hb电泳测定结果分析报道如下。

1资料与方法

1.1资料来源2011年3月至2011年12月在本院例行产前检查的孕妇506例,孕周12～20周,年龄20～43岁。

1.2方法及诊断标准

1.2.1平均红细胞体积（MCV）、平均红细胞浓度（MCH）检测：孕妇组抽取静脉血2mL,真空采血管为乙二胺四乙酸二钾(EDTA-K2)抗凝管。用XT-1800i全自动血球计数仪，试剂为希森美康公司生产的配套试剂，MCV小于82fl为减少，MCH小于27pg为减少。

1.2.2血红蛋白电泳检测：所有受检者取枸椽酸钠2ml抗凝血，均采用Sebia毛细管电泳仪系统扫描测定HbA、HbA2、HbF含量。HbA2：小于2.2%为减少，HbA2大于3.5%为增高。所有标本尽量当天检测,不能当天检测的留4℃保存次日检测。严格按照仪器和试剂盒说明书进行电泳和扫描各电泳区带结果，试剂为该公司生产的配套Hb电泳试剂。

1.2.3诊断标准：地贫分型:根据电泳的结果及HbA、HbA2、HbF多少进行分型。β地贫表型筛查阳性:MCV<82fL,MCH＜27pg，HbA2>3.5%,HbF>2%,其中二项阳性者。静止型、标准型α地贫HbA2相对偏低小于2.2%，MCV、MCH降低，需基因加以确认。中间型α地贫也称HbH病，MCV、MCH降低，血红蛋白电泳出现HbH或HbBart,s带，HbA2降低。其他异常Hb因未做进一步鉴定,故只按Hb电泳区带所处位置分组报告。

2结果

筛查506例孕妇中,检出地贫89例，占17.5%。检出轻型β-地中海贫血(HbA2或HbF轻度增高，MCV、MCH降低)55例,检出率为10.86%,疑静止型、标准型α-地中海贫血（HbA2＜2.2%，MCV、MCH降低）23例，检出率为4.54%，需基因确认。中间型α-地中海贫血(HbH病)1例,检出率为0.197%,另外检出异常血红蛋白HbCS5例,检出率为0.988%,检出异常血红蛋白HbE2例,检出率为0.395%,异常血红蛋白HbK组区带2例，检出率为0.395%。检出异常血红蛋白HbJ1例,检出率为0.197%,用全自动蛋白电泳系统扫描的结果将异常结果分成3组,分析各Hb组分的含量,见表1。

表1各组地中海贫血孕妇及异常Hb各Hb组分扫描结果和MCV、MCH结果

3讨论

3.1地中海贫血是我国长江以南各省发病率最高、影响最大的遗传病之一,广西是地中海贫血高发区。本组筛查506例孕妇中,检出地贫89例，占17.5%，筛查阳性与报道广东阳江地区孕产妇16.4%［1］和百色市孕妇地中海贫血的筛查结果显示,α和β地贫的总携带率为18.15%[2]接近，与广东省的β和α地贫的人群基因携带率分别是2.5%和4.2%[3]高出许多。本地区检出轻型β-地中海贫血(HbA2和或HbF轻度增高)55例,检出率为10.86%,α-地中海贫血23例，检出率为4.54%，地贫种类的分布与百色市孕妇地中海贫血的筛查结果α地中海贫血杂合子为11.41%,β地中海贫血为6.74%[2]、广东省的α地贫检出率为83%,β地贫为26%[4]有明显不同，本地区β地中海贫血高于α地中海贫血，存在地域差异。发现异常血红蛋白病10例,检出率为1.98%,说明异常血红蛋白病在孕妇人群中有较高的发病率。地中海贫血和缼铁性贫血均可呈小细胞低色素贫血，红细胸参数MCV、MCH表现相近：MCV＜82fl，MCH＜27pg。本文筛查方法虽能提高产前检查中地中海贫血诊断率，但缼铁性贫血能影响筛查的特异性。须对筛查出可疑地中海贫血患者进行地中海贫血基因检测的同时进行铁代谢检查情况。本组资料只统计了孕妇一方,如果孕妇筛查地中海贫血阳性,建议其丈夫也进行地中海贫血检测。

3.2Hb电泳在地中海贫血的筛查中起到了非常重要的作用，在毛细管电泳中，血红蛋白标本仍像在碱性缓冲液条件下在琼脂糖凝胶上那样电泳分离，但区别是整个电泳过程在石英毛细管中和高压条件下进行。HbF优先于HbA出现，因而HbA糖基化组份不会对HbA2值不产生干扰，因此毛细管电泳测得HbA2值通常很准确。根据高值确认β地中海贫血，也就有了很高的可信度，而我们筛查结果10.86%,也与报道的值高出许多。正常血红蛋白和常见血红蛋白变异体可在特定的“电泳区域”中辨认，很好将HbH、HbE、HbCS、HbS、HbK、HbJ在确定的电泳位置上分离，另外杂合子HbCS在常规的检验中极难检测到[5],而全自动毛细血管电泳无需额外成本和人力,电泳时直接出现增高的HbF区带和HbCS区带。有文献报道全自动琼脂糖凝胶电泳仪对β地贫,HbH病,HbCS和其它异常Hb病的诊断效果与基因诊断相当。本组发现异常血红蛋白病10例,检出率为1.98%，也说明了Sebia毛细管电泳仪系统在异常血红蛋白中达到较好的分离效果。

3.3传统检查Hb病一般采用醋酸纤维薄膜电泳法,其过程需要多次洗涤红细胞,制作血红蛋白液,然后点样、电泳,剪取各电泳区带、浸泡出血红蛋白液进行比色,最后计算出各种血红蛋白含量。而用全自动蛋白电泳系统检查Hb,可直接扫描出各种异常Hb的含量,尤其是HbF,而过去测定HbF是用碱变试验法测定出抗碱Hb含量然后进行推测的,事实上,抗碱Hb不只有HbF,HbBarts'也是一种抗碱Hb,故对于合并HbBart's的HbH患者,就无法测定出HbF的真正含量。用全自动蛋白电泳系统,仪器自动电样、电泳、染色,简化了操作程序,也提高了检测结果的准确性,全自动蛋白电泳系统检查β-地中海贫血、HbA2和HbF增高的特点让Hb电泳的结果一目了然，对于HbBart′s区带清晰,可定量HbBart′s水平,有效检测出各型α-地中海贫血。广西是地中海贫血高发区,对高危人群产前孕妇进行地中海贫血筛查显得尤为重要。全自动电泳系统用于检测地中海贫血具有很高分辨率,避免人工操作的某些技术及客观条件的误差,保证了Hb电泳各区带定量的准确性。另外，由于MCV、MCH的测定简单、准确，能较快速、准确地筛出杂合子，进一步提高了检出率。本试验检出异常血红蛋白病10例,而红细胞参数基本正常（MCV：5.9±11.9），MCH：25.4±6.2），纯合子仅有轻度贫血,生长发育也不受影响,但其与其他β-地中海贫血患者婚配,便有可能生下中间型和重型的地中海贫血患儿。由于基层医院条件制约，开展基因检测更是不可能，对地贫高发区，选择灵敏的地贫筛查方法更为重要，我市是地贫高发区,开展地中海贫血的宣传教育和孕妇筛查,对指导优生优育,提高人口素质有着重大意义。我们采用红细胞平均体积(MCV)、平均红细胞浓度（MCH）及毛细管血红蛋白(Hb)电泳三项联合检测地中海贫血的方法具有灵敏度、特异性强,在基层医院可广泛开展,是地中海贫血产前筛查的理想试验方法，从而提高筛查阳性率，避免漏诊，为基因诊断提供进一步检查依据。

总的来说,对于这一高发的地方病,只有进行大规模的筛查并检出携带者,采取各种有效的措施,才能更好的防止重型地贫儿的出生和保障患者的身体健康,进一步提高人民的生活质量。

参考文献

[1]林丽兰,吴杏喜,陈志晓.广东阳江地区孕产妇地中海贫血筛查结果分析[J].实用医技杂志,2008,(32):4539-4541.

[2]吴惠珍,常正义,韦凤莲,等.百色地区孕妇地中海贫血的产前筛查及产前诊断[J].中国优生与遗传,2007,26(2):50-51.

[3]谢杏梅，周剑英，刘娜，李坚，李东至.探讨我国南方地区孕妇β-地中海贫血的筛查标准[J].中国产前诊断杂志(电子版),2011,3(2):4-6.

[4]曾瑞萍,余升红,胡彬.α与β地中海贫血双重杂合子基因诊断[J].中华血液学杂志,1998,10(19):525.

[5]陈萍,龙桂芳,林伟雄,等.广西地区纯合子血红蛋白ConstantSpring的研究[J].中华血液学,2004,11(4):16-19.