新型冬眠疗法治疗、护理方案成功救治重度烫伤后延迟复苏新西兰兔的研究

新型冬眠疗法治疗、护理方案成功救治重度烫伤后延迟复苏新西兰兔的研究

赵淑婷钟晓旻

赵淑婷钟晓旻（广州市红十字会医院烧伤整形外科广东广州510220）

【中图分类号】R644【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）27-0034-02

【摘要】目的研究一种安全、有效的救治严重烧伤病人的冬眠疗法。方法报导熊冬眠触发蛋白治疗及护理方法成功救治20例重度烫伤后延迟复苏的新西兰兔的研究。结果20例重度烫伤后延迟复苏的新西兰兔在两周后全部都仍然存活。讨论熊冬眠触发蛋白治疗及护理方法是安全、有效的救治重度烫伤后延迟复苏新西兰兔的新方法,将来它还能够成为一种救治重度烧伤病人的新药。

【关键词】熊冬眠触发蛋白护理方法重度烧伤

2012年度广州市医药卫生科技项目。项目编号20122A011017。

特大面积、特重度烧伤是最严重的创伤之一；补液复苏不及时是严重创伤后最常见的致命原因之一[1]；重度烧伤6小时后才进行规范的补液抗休克治疗，则称为延迟复苏。延迟复苏是严重烧伤后引起多器官功能衰竭并最终导致病人死亡的最主要原因。本课题的研究，拟用熊冬眠蛋白令严重烫伤、延迟复苏的新西兰兔进入冬眠状态，将其基础代谢率降到最低，大大提高其对严重烫伤及感染后缺血、缺氧的耐受能力，减轻全身炎症反应综合征引起的自身免疫损伤，从而减少多器官功能衰竭的发生，提高抢救成功率。用客观的数据说明冬眠蛋白治疗严重烧伤、全身炎症反应综合征兔子的临床效果，并为其疗效提供组织病理学、细胞学、分子生物学的依据。研究成果将为新药物冬眠蛋白的研究提供动物实验的依据。研究成果可以转化成产品（药物），用于严重创伤及严重感染病人的救治。

1.材料与方法

1.1动物模型的建立：50只新西兰兔。

随机选出40只新西兰兔，新西兰兔去毛后颈以下部分在90℃热水中烫35秒造成Ⅲ°烫伤创面，建立40只特大面积特重度烫伤新西兰兔模型；8小时经新西兰兔的兔耳朵静脉注入补液复苏治疗。将40只重度烫伤后延迟复苏的新西兰兔模型随机分成两组，治疗组及对照组各20只。另外10只新西兰兔为非创伤健康空白阴性对照组。具体分组如下：

（1）健康空白阴性对照组：无烫伤的健康兔子10只。

（2）对照组：重度烫伤、延迟复苏的兔子20只，不用冬眠蛋白治疗，常规补液治疗。

（3）治疗组：重度烫伤、延迟复苏的兔子20只，用冬眠蛋白治疗，常规补液治疗。

1.2通过动物实验，随机分组对比治疗组及对照组新西兰兔的死亡率，了解冬眠蛋白救治严重烧伤后延迟复苏新西兰兔的疗效。

1.3盲法设计和统计学方法

所有动物及标本采用随机编号，按照双盲设计进行检测，确保检测、分析者不知道标本的分组情况。本课题的实验设计采用了随机、重复的原则和双盲法，设计力求完美。统计学方法所有数据用SPSS17.0软件进行检验。

2.结果

治疗组20只新西兰兔两周后仍然全部存活，停药后全部恢复清醒，无1例出现器官功能不全。对照组20只新西兰兔死亡9只，死亡率达45%，存活的12只新西兰兔中6只出现肾功能及呼吸功能两个器官功能不全，3只单纯出现肾功能不全。

3.讨论

3.1对于单纯西医冬眠疗法治疗危重创伤（包括烧伤）的报导很多[2]，但是未见用冬眠蛋白救治危重创伤动物模型的报导（我们在广东及全国烧伤会议的交流论文除外）。既往我们将西医的冬眠疗法应用于危重烧伤病人的救治，取得了明显的疗效。但是，西医冬眠疗法所用的冬眠药、镇静药、毒麻药等对循环、呼吸系统影响较大，例如极易引起血压下降、心率失常甚至心跳骤停等，我们在临床上多次遇到这种情况，我们希望采用更为安全、有效、适用于全身炎症反应综合征、MODS伤员的的冬眠疗法。

3.2熊冬眠蛋白的发现。

熊胆是名贵的中药，2003年我们在对熊胆汁抗生素浓度及元素组成[3]进行研究时，发现其胆汁中有某种物质能在零下15度的冰箱中起到抗凝固结冰的作用，2004年成功分离提取出熊高特异性冬眠触发蛋白（bear-hibernationtriggerprotein/B-HTP）。2005年系统地掌握了该物质在熊肝内合成及分解代谢排出体外的三大途径。

国外对于冬眠蛋白的研究最早起于2005年，俄罗斯的科学家发现将冬眠动物的血液输入同种非冬眠动物的体内，可以令同种非冬眠动物进入冬眠状态。2006年俄罗斯及日本的科学家认为这种现象是血清中的冬眠蛋白引起的，并发现含有冬眠蛋白的血清能令异种动物进入冬眠状态。但是对血清中这种冬眠蛋白的具体结构及分离、提取方法，国外至今未见报道。

3.3熊冬眠蛋白的疗效研究。近年来我们将冬眠蛋白应用到家兔等烧伤动物模型的救治当中，取得了很好的疗效。2007年我们将冬眠蛋白用于治疗重度烫伤家兔，取得非常惊人的疗效，发现冬眠蛋白能够令重度烫伤、MODS的兔子在血氧饱和度只有40%-50%的情况下正常存活两周以上。我们将初步的研究成果写成论文《B-HIT冬眠疗法对特重度烫伤家兔的影响》，在2007年广东省烧伤年会及全国烧伤会议中第一次将研究成果介绍给烧伤科的同行们，引起了许多同行极大的兴趣。2008年我们将冬眠蛋白用于调节重度烫伤家兔免疫平衡的研究，发现冬眠蛋白能够改变重度烫伤家兔的免疫平衡，减少家兔休克期血管内皮的免疫损伤。2009年，我们将冬眠蛋白用于重度烫伤低血容量性休克家兔的救治及降低大面积烫伤家兔超高代谢率的研究，同样取得了非常好的效果。现在我们进一步将研究成果应用到重度烧伤、延迟复苏的新西兰兔模型身上。

3.4关于从中药熊胆（汁）中提取出冬眠蛋白的研究，国内外皆未见报导。我们的研究，发现了熊胆中疗效最神奇的成份—熊冬眠触发蛋白。熊冬眠时对氧气的需求还不及熊安静睡眠时的1/4，而有时甚至是下降到正常的5%左右。药监局登记在案的所有含熊胆的药物及保健品当中，没有任何一种提及这样神奇的疗效。

3.5我们的研究能真正解决“活熊取胆（胆汁）”的问题。我们已经成功分离和提纯了熊冬眠蛋白，只要进一步明确蛋白质的三级结构，就能够通过生物合成的方法，以端粒分解酶解螺旋后的蛋白质的一级结构为模板，复制并大量生产熊冬眠蛋白，或生产与其结构、功能相近的替代物，而不必再通过“活熊取胆（胆汁）”来提取熊冬眠蛋白。同样的，熊胆（汁）中其他有效成分也可以通过先分离提纯、再确定疗效、然后确定结构、最后生物合成批量生产的方法解决。

参考文献

[1]钟晓旻,李孝建,刘锡麟.特重度烧伤新生儿延迟复苏的补液治疗.国际医药卫生导报。2004,10(16)50～52.

[2]乔亮,杨惠忠,王文奎,许伟石.冬眠合剂对严重烫伤新西兰兔肺损伤的保护作用.中华烧伤杂志，2008,24（4）251～253.

[3]钟晓旻.元素平衡保健医学.广东：广东经济出版社.2003:1～16.