天麻药材高效液相色谱指纹图谱分析

天麻药材高效液相色谱指纹图谱分析

赵瑞

赵瑞（六安市中医院药剂科安徽六安237000）

【摘要】目的通过对天麻药材的高效液相色谱指纹图谱进行研究，进一步对天麻的质量进行有效控制。方法采用高效液相色谱法，以甲醇作为流动相，色谱柱的柱温保持在30℃，流速设定在1毫升每分钟，色谱柱的检测过程中波长为21纳米。结果产地不同的天麻有着相似的成分和种类，但是不同的是其相对含量和绝对含量有所不同。天麻样品的相关系数和夹角的余弦系数与其产地以及采收时间有着一定的联系。结论高效液相色谱指纹图谱分析法能够为天麻药材质量的控制提供鉴别依据，值得深层次挖掘研究。

【关键词】天麻药材高效液相色谱指纹图谱分析

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2014）35-0027-02

天麻是草本植物的块茎，其味比较甘甜，具有息风和平肝的功效，是中药的一种，在我国的分布范围较为广泛。随着中药现代化的发展，对其质量的控制已经成为现代化进程中的主要环节，由于中药具有整体性和多组分的特点，虽然单一指标的测定较为重要，但是还需要对其复杂化学成分中的综合性进行测定，需要通过几种成分全面评价中药的有效性和专属性。指纹图谱分析法作为中草药提取物质量控制的有效方法被很多国家认可，在国际使用方面也有一定的成果，我们需要结合国际实践建立起具有中药特色的指纹图谱质量控制体系。

1资料与方法

1.1一般资料

在对天麻的指纹图谱进行分析的过程中需要用到的仪器有高效液相色谱仪（Agilengt1200），包括二级管阵列紫外检测器、自动进样系统、色谱采集系统等。使用到的试剂有甲醇、乙醇、醋酸等，还有一些试剂是分析纯，用到的水为双蒸水。

试验中使用的天麻分别在全国不同产地进行取样，经六安市食品药品检验所检测，结果为药用植物天麻。主要采购了十批天麻样品，来源地分别是云南、西藏、安徽、四川和陕西。

1.2方法

首先测定天麻素的含量，紧接着建立对照指纹图谱，然后对共有指纹峰进行分析，最后对天麻中的主要成分进行定量分析。

1.2.1含量的测定方法

采用高效液相色谱法，以甲醇作为流动相，色谱柱的柱温保持在30℃，流速设定在1毫升每分钟，色谱柱的检测过程中波长为21纳米。配置一定量的溶液，对溶液进行配置时，先将取出的天麻药材进行粉碎处理，称取0.5克的天麻，然后在称取的天麻中加入30%左右的甲醇，对制备的溶液进行过滤，取得过滤的滤液加入1%的冰糖醋将其配置成15毫升的溶液作为试品溶液使用。吸取对照品溶液和供试品溶液在其中注入高效液相色谱仪，在一定时间内记录其色谱图的变化情况。

1.2.2指纹图谱建立和分析方法

对不同批量的药材和天麻对照药材进行上样分析，记录色谱的变化情况。还可以将天麻素作为对照品，将对照药材作为指纹对照品，建立天麻药材相应的指纹图谱。

2结果

通过分析得到天麻药材指纹图谱。

图1天麻药材高效液相色谱指纹图谱

图中共有峰有16个，共中峰有5个，主要构成是天麻素，但是由于天麻素的出现过早，所以在测定的过程中选择了峰面积较大并且出峰时间相对稳定的15号峰为基础峰。在十批天麻样品中检测出了指纹峰有16个，相对峰的面积不同，从而表明产地不同的天麻有着相似的成分和种类，但是不同的是其相对含量和绝对含量有所不同。

以共有峰的相对峰面积作为参数评价天麻样品高效液相色谱指纹图谱的相似度，得到的结果见下表：

表1共有峰指纹图谱相似度的分析

样品编号样品收集时间相似度分析天麻素含量

相关系数夹角余弦系数

M12010-05-270.87730.75980.3678

M22010-03-210.93120.86640.4335

M32010-03-300.88650.77860.3861

M42010-04-150.87660.74960.3154

M52010-04-200.93790.88040.4987

M62010-05-250.84970.69070.6254

M72010-05-270.97650.89131.1021

M82010-08-240.53870.30970.1721

M92010-05-110.78650.56040.8656

M102010-03-300.92950.84560.4209

MD对照2010-11-171.00001.00000.4265

通过对共有峰相似度的分析可以得到样品的相关系数和夹角的余弦系数与其产地以及采收时间有着一定的联系。

3讨论

天麻作为一种名贵药材，其销量和应用都较为广泛，产地和品种不同的天麻其内在质量往往存在一定的差异性。中药中使用的天麻成分主要是天麻素。通过本次对天麻指纹图谱进行分析可以得到，不同批次的天麻面积不相同时其相对峰的差异也是非常大的。同类天麻样品中不出现个别峰，一定程度上和其生长环境有密切联系。通过对相似度的分析和天麻素含量的分析可以看出图谱相似度降低的原因在于个别指纹峰的影响。要对天麻素内在物质群的整体力量进行考虑时，质量控制的指标不仅仅限制在天麻素上，需要结合指标图纹的方式对天麻的质量进行控制。

在分析过程中，我们建立了天麻素成分共有模式，确定了天麻素的特征峰，此种方法在天麻质量控制中有着较强的操作性和稳定性，能够为天麻质量控制和质量评价提供参考价值。在试剂配比中，通过试验表明甲醇醋酸水溶液作为流动分离溶液有着最佳的效果。随着近年来中药成分的不断增加，利用指纹图谱对中药的质量进行控制，使得指纹图谱的整体性和模糊性更好的发挥其利用价值，从而符合中药质量控制的整体性要求。与单一成分的药品质量控制相比，这种控制方法更为科学，在以后的研究中，需要对中药指纹图谱的质量控制进行深层探究，为我国药品质量的提高奠定基础。

参考文献：

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