APTT检测的意义与抗凝剂坚固的应用

APTT检测的意义与抗凝剂坚固的应用

夏鸫武晶晶

夏鸫武晶晶

郑州市儿童医院检验科郑州市儿童医院NICU河南省郑州市

摘要：抗凝剂对APTT检测有一定的影响，随着血液与抗凝剂比例下降，检测结果显著缩短，这是由于枸橼酸钠属于碱性抗凝剂，适当的抗凝剂比例使得血浆的ph值更有利于凝血酶的活性升高。

关键词：APTT检测；意义；抗凝剂

正文：

APTT是检测内源凝血系统诸凝血因子缺陷和相关抑制物的筛选试验，也是当前用于凝血因子、肝素抗凝治疗以及狼疮抗凝物质检测的主要手段。

不同的部分凝血活酶、不同的活化剂和不同的激活时间对各种凝血因子缺陷、对肝素和对狼疮抗凝物质的敏感性相差很大。例如，检测APTT的试剂中，所用活化剂（白陶土、硅藻土、鞣花酸）不同，他们对检测肝素、狼疮抗凝物质和因子Ⅷ、Ⅸ的敏感性不同。

（1）活化部分凝血酶时间测定（APTT）原理：37℃条件下，以白陶土激活因子Ⅻ和Ⅺ，以脑磷脂（部分凝血活酶）代替血小板第三因子，在Ca2+参与下，观察乏血小板血浆凝固所需的时间，即为活化部份凝血活酶时间，是内源凝血系统较敏感和常用的筛选试验。

（2）参考值：男性：37s±3.3s（31.5～43.5）s；女性：（37.5±2.8）（32～43）s.受检者的测定值较正常对照延长超过10s以上才有病理意义医学|教育网搜集整理。

（3）临床意义：①对内源凝血途径因子缺乏较CT敏感（血小板异常不影响APTT），能检出Ⅷ：C小于25%的轻型血友病。对凝血酶原、纤维蛋白原缺乏则不够敏感，故APTT延长的最常见疾病为血友病。此时可进一步作纠正试验，即于患者血浆中加入1／4量的正常新鲜血浆、硫酸钡吸附血浆或正常血清，再作APTT，如正常血浆和吸附血浆能纠正延长的结果而血清不能纠正，则为因子Ⅷ缺乏；如吸附血浆不能纠正，其余两者都能纠正，则为因子Ⅸ缺乏；如三者都不能纠正，则为病理性循环抗凝物质。②在使用肝素治疗时，多用APTT监测药物用量，一般以维持结果为基础值的2倍左右（1.5～3.0倍）为宜（75～100s之间）。③血管性血友病：由于患者vWF缺陷，使FⅧ不稳定，导致FⅧ：C活性减低，故APTT延长。不同类型vWDFⅧ：C活性降低不一样，故APTT延长的程度也不同。④异常抗凝物增多；血友病A患者长期输注FⅧ，可产生FⅧ抑制物，引起APTT延长。一些患者存在狼疮抗凝物（LAC），使APTT延长。⑤纤溶亢进：原发性和继发性纤溶亢进（如DIC），产生大量的FDP，使APTT延长。

临床实验室常用血液抗凝剂的特点及应用

在实验室检验中有许多检测项目的血液标本是需要抗凝才可以检测的，而抗凝剂种类较多，实际应用中要根据不同的需要进行选择，才能获得理想的效果。目前我科常用的抗凝剂有肝素、乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）、枸橼酸盐、氟化钠等4种，现将它们的特点及应用分别叙述如下：

1、肝素

在抗凝治疗中，选择的肝素制剂﹑APTT反应盒组成﹑检测方法﹑抗凝方法及个体差异和所患疾病的不同，且合并使用其它抗凝药如华法令等因素，都可以影响肝素抗凝效果。临床上通过统计学方法来估测肝素水平与APTT的线性关系及评估以上因素影响抗凝的程度。直接影响肝素抗凝的因素：肝素分子链及分子量，在使用途径上，普通肝素口服不吸收；在用法上，其间断静注法出血发生率明显高于连续静脉注射法；疾病状态。

2、乙二胺四乙酸盐（EDTA盐）

EDTA盐有钾、钠、锂盐，国际血液学标准化委员会推荐使用的是EDTA-K2，其溶解度最高，抗凝速度最快。EDTA盐可在100℃下干燥，抗凝作用不变。此抗凝剂不影响白细胞计数及大小，适用于一般血液学检测。但如果抗凝剂浓度过高，渗透压上升，会造成细胞皱缩。EDTA溶液pH与盐类关系较大，低pH可使细胞膨胀。EDTA-K2可使红细胞体积轻度膨胀，采血后短时间内平均血小板体积非常不稳定半小时后趋于稳定。EDTA-K2使Ca2+、Mg2+下降，同时使肌酸激酶、碱性磷酸酶活性降低，EDTA-K2的最佳浓度为1.5mg/ml血液，如果血少，中性粒细胞会肿胀分叶消失；血小板会肿胀、崩解，产生正常血小板的碎片，使分析结果产生错误。EDTA由于能抑制或干涉纤维蛋白凝块形成时纤维蛋白单体的聚合，不适于凝血和血小板功能检测，也不适用于钙、钾、钠及含氮物质的测定。此外，EDTA能影响某些酶的活性和抑制红斑狼疮因子，故不适合制作组化染色和检查红斑狼疮细胞的血涂片。

3、枸橼酸盐

枸橼酸盐主要是枸橼酸钠，其抗凝原理是能与血液中的Ca2+结合形成螯合物使Ca2+失去凝血功能，凝血过程被阻断，从而阻止血液凝固。枸橼酸钠有Na3C6H5O7?2H2O和2Na3C6H5O7.11H2O两种晶体，通常用前者配成3.8%或3.2%的水溶液，测定血沉用3.8%枸橼酸钠抗凝，抗凝剂与血液比例为1：4；凝血试验需用3.2%枸橼酸钠抗凝，比例为1：9。大部分凝血试验都可用枸橼酸钠抗凝，它有助于Ⅴ因子和Ⅷ因子的稳定，并且对平均血小板体积及其他凝血因子影响较小，可用于血小板功能分析。

4、氟化钠

氟化钠（NaF）中的氟离子可与Ca2+结合形成螯合物而发挥抗凝作用，但其抗凝能力较其他抗凝剂弱，氟离子可抑制糖酵解中的烯醇化酶，防止糖酵解，若未加氟化钠，血标本中的葡萄糖含量将以每小时6%的速度下降，而在有氟化钠存在的条件下，血糖浓度在25摄氏度的条件下可以稳定24h，4摄氏度可以稳定72h，临床上常用EDTA-K2和NaF一起作为抗凝剂用于血糖测定。

总结：

我们要对抗凝剂有全面的了解包括它们的特点和作用大小等，根据它们的特点从而选择适当的抗凝剂。不仅要选择适当的抗凝剂而且要严格控制抗凝剂的量还有温度、PH值、周围环境等都能影响抗凝剂的作用。可见抗凝剂对临床检测结果有非常大的影响。

参考文献：

[1]李雪梅，王惠萱，杨光辉，等.抗凝剂不同比例对凝血三项检测结果影响分析［j］.西南国防医药，2003，13（4）：387388.

[2]肖秀林，陈红宇，王昌富，等.pt和aptt样本采集顺序和保存温度的探讨［j］.上海医学检验杂志，2001，16（2）：104.

[3]黄小群，余小青，叶宇钊.血凝仪测定PT、APTT影响因素的探讨[J].工企医，2006，19（3）：28-29.