实时pcr检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值分析粟明

实时pcr检验在高危型人乳头瘤病毒中的诊断价值分析粟明

粟明汤海平

（洪江市人民医院湖南怀化418116）

摘要：目的研究在高危型人乳头瘤病毒中运用实时pcr检验的效果。方法选取我院2017年12月到2018年6月就诊的184名hpv高危感染患者作为研究对象。分别使用第二代杂交捕获检验（HCⅡ）和实时pcr检验，然后比较两种检验方法的诊断价值。结果实时pcr检验和第二代杂交捕获检验（HCⅡ）对CIN-HPV的阳性检出率分别为90.63%和87.50%，并无明显差异P＞0.05；而对于慢性宫颈炎或鳞状上皮病变的阳性检出率则依次为60.00%和33.33%，具有统计学意义p＜0.05；实时pcr检验与HCⅡ的阳性检出率分别为71.74%、63.04%，差异显著p＜0.05，总符合率为81.25%。CINⅡ期和CINⅢ期的宫颈病变之间存在良好的相关性。而且实时pcr检验的灵敏性和特异性比HCⅡ更好。结论对于高危型人乳头瘤病毒的诊断，实时pcr检验和第二代杂交捕获检验均可收获理想的效果，但是实时pcr检验的灵敏性和特异性更胜一筹。

关键词：实时pcr检验；高危型人乳头瘤病毒；第二代杂交捕获检验；

人乳头瘤病毒即HPV，是一种球状DNA病毒，具有极强的传染性，其不仅能够引起皮肤粘膜的鳞状上皮增殖，同时还是诱发宫颈癌的关键因素。经研究发现，绝大多数的宫颈癌标本中均可检测出HPV的DNA。高危型HPV主要是16型以及18型，以往临床上通常采用HC人乳头瘤病毒即HPV，是一种球状DNA病毒，具有极强的传染性，其不仅能够引起皮肤粘膜的鳞状上皮增殖，同时还是诱发宫颈癌的关键因素。经研究发现，绝大多数的宫颈癌标本中均可检测出HPV的DNA。高危型HPV主要是16型以及18型，以往临床上通常采用HCⅡ法进行检测，但是近几年来实时pcr检验技术也开始活跃于大众视野中，并且收获了较为理想的效果。选取我院2017年12月到2018年6月就诊的184名hpv高危感染的患者作为研究对象，深入分析了在高危型人乳头瘤病毒中运用实时pcr检验的效果。详细的研究过程如下文所述：

1基线资料以及诊断方法

1.1基线资料

选取我院2017年12月到2018年6月就诊的184名hpv高危感染患者作为研究对象，年龄最小为29岁，年龄最大为49岁，平均年龄为（41.26±2.72）岁。

1.2诊断方法

实时pcr检验：通过实施荧光pcr酶标仪和pcr试剂盒展开检验，把样本的酸碱度调至7.4，然后将反应液加入其中，混合均匀之后倒入pcr仪器之中展开扩散，操作的整个流程必须严格遵循试剂说明书进行，若循坏阈值没有到37，则可以判定为高危型人乳头瘤病毒DNA阳性。

第二代杂交捕获检验（HCⅡ）：第一步先对宫颈脱落细胞实施采样，将其放到保存液当中。然后凭借RNA探针对其实施杂交，获取DNA-RNA的杂交体，并完成和特异性抗体的结合，促使抗体磷酸化。最后在采集信号的同时对发光强度的大小进行测定。倘若HPV负荷量在1.0pg/mL以上，则可判定患者HPV阳性。整个操作过程必须严格按照试剂说明书进行。

1.3统计学处理

高危型人乳头瘤病毒感染者的所有诊断数据全部使用SPSS20.0统计学软件进行精准的分析处理。所有患者的HPV阳性检出率以及符合率等计数资料均使用百分比表示，并展开卡方检验。倘若P的值未超过0.05，则差异存在统计学意义。倘若P的值超过了0.05，则差异不存在统计学意义。

2结果

2.1各个程度宫颈病变的HPV检出率

病毒感染者的临床病理资料表明，有64例患者存在程度不一的宫颈病变，其中共60例患者患有慢性宫颈炎或存在鳞状上皮病变。对CINⅠ期、CINⅡ期以及CINⅢ期的患者们进行实时pcr检验以及第二代杂交捕获检验后发现，阳性检出率分别为90.63%（58/64）和87.50%（56/64）。然而对于慢性宫颈炎或鳞状上皮病变的阳性检出率则依次为60.00%和33.33%，实时pcr检验的检出率明显较高（p＜0.05）。

2.3宫颈上皮内瘤样病变检测

检验后发现，CINⅡ期和CINⅢ期的宫颈病变之间存在良好的相关性（r2=0.937）。而且与第二代杂交捕获检验相比，实时pcr检验的灵敏性和特异性更加理想。

3.讨论

所谓的高危型人乳头瘤病毒，指的是生殖道感染HPV的病毒，其中以16型和18型最为常见。感染高危型HPV的危害性极大，不仅会使得HPV病毒基因表达失调，还会使得人体基因陷入混乱，甚至激活细胞癌基因[1]。

当前医学界发现的HPV基因型已超百种，病毒致病能力各不相同。以往临床上常常使用第二代杂交捕获检验法应对HPV-DNA，效果较为理想，对许多宫颈疾病患者的早期诊断和及时治疗起到了极大帮助。然而随着医疗技术的飞速发展，实时pcr检验应运而生，这种检测方式操作简便，能够保证荧光信号的增加和pcr产物的增加完全同步，不仅降低了操作人员的工作量，而且灵敏性也很高，可以避免许多人为性系统误差[2]。

经过本次调查调查研究发现，实时pcr检验和第二代杂交捕获检验（HCⅡ）对CIN-HPV的阳性检出率分别为90.63%和87.50%，并无明显差异P＞0.05；而对于慢性宫颈炎或鳞状上皮病变的阳性检出率则依次为60.00%和33.33%，p＜0.05。实时pcr检验与HCⅡ的阳性检出率分别为71.74%、63.04%，差异显著，总符合率为81.25%。CINⅡ期和CINⅢ期的宫颈病变之间存在良好的相关性。而且实时pcr检验的灵敏性和特异性比HCⅡ更好。

综上所述，对于高危型人乳头瘤病毒的诊断，实时pcr检验和第二代杂交捕获检验的均可收获理想的效果，但是实时pcr检验的灵敏性和特异性更胜一筹。

参考文献

[1]王琳，梁红芬.实时荧光PCR在高危型人乳头瘤病毒检验中的诊断价值分析[J].牡丹江医学院学报，2015，12（3）：91-93.

[2]古旭东，薛春玲，汪云霞等.实时荧光PCR法在高危型人乳头瘤病毒检验中的诊断价值研究[J].现代诊断与治疗，2016，27（15）：2889-2890.