在咽拭子淋球菌培养中四种混抗浓度的影响

在咽拭子淋球菌培养中四种混抗浓度的影响

温红光

温红光

梅县慢性病防治院,单位邮编，514011

【摘要】目的：咽拭子培养淋球菌在临床上应用越来越普遍，但阳性率偏低，本文尝试探索提高阳性率的简易方法。方法：收集本院2012年5月至2013年4月期间在本科进行咽拭子淋球菌培养的37份标本，用四种混抗浓度不同的TM平板同时培养，对所得结果进行统计分析。结果：分析表明，四种混抗浓度提高一倍，阳性率虽然无明显增加，但杂菌明显受抑制，更加容易找到疑似淋球菌菌落，在性病门诊中有一定应用价值。

【关键词】咽拭子；淋球菌培养；四种混抗；浓度；阳性率。

前言

由于人们性行为方式的改变，淋球菌(gonococcus)引起的咽喉部感染越来越多，咽拭子培养淋球菌在临床上应用也越来越普遍，但阳性率偏低，是检验科面临的一个问题[1]，其可能的原因之一是，咽拭子杂菌种类多，数量大，正常添加的四种混抗（英国OXOID公司生产，含万古霉素(Vancomycin)1.5mg，制霉菌素(Nystatin)6250IU,多粘菌素E(Colistinmethanesuiphonate)3.75mg,甲氧苄胺嘧啶(Trimethoprim)2.5mg）浓度不够，不能完全抑制杂菌的生长，起不到选择的作用。我们尝试用提高四种混抗浓度的方法制备TM平板，期望能够提高阳性率。

1资料与方法

1.1一般资料

病例选自本院2012年1月至2013年4月期间在本科进行咽拭子淋球菌培养的37份患者标本，其中男性患者1例，女性患者36例；年龄分布为19岁~39岁，平均年龄为22.2岁。

1.2标本采集与检测方法

对所有患者进行咽喉部分泌物拭取，由临床医师负责实施。拭子取得后立即送化验室进行接种培养，每份四种混抗标本均同时接种于三种不同标记的TM平板（简记为A，B，C）上并在相同条件下培养，培养条件为（35℃，CO2培养箱，___________48h）。其中A平板为商品TM平板，购买自广东省江门凯林公司，其四种混抗浓度为正常浓度；B和C平板为自制TM平板，其四种混抗浓度分别是正常浓度的二倍和四倍。配制方法是[2]：称取血红蛋白粉2.5克，研成粉末，置三角烧瓶中，加蒸馏水125毫升；称取G.C琼脂粉9克,置另一个三角烧瓶中，加蒸馏水125毫升.将这两个三角烧瓶在水浴上煮沸使之溶解,高压121℃10分钟灭菌后混合在一起，然后取二个三角烧瓶，分别标记为A瓶和B瓶，各加入上述培养基80毫升；取促淋生长剂一瓶和配套复溶液一瓶（按说明可用于配制500毫升TM培养基），混合使之溶解备用；取四种混抗一瓶（按说明可用于配制500毫升TM培养基），用3毫升移液管吸取灭菌蒸馏水3毫升加入瓶中使溶解备用；在前述培养基冷至约50℃时，往A瓶中加入促淋生长剂5毫升，四种混抗1毫升；往A瓶中加入促淋生长剂5毫升，四种混抗2毫升，混匀后各自倾注平板。

1.3培养结果

在A平板上，杂菌的生长普遍较多，常常有2-5种杂菌生长，要小心分辨才能找出夹杂其中的细小、圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色的疑似淋球菌菌落，经过进一步分离鉴定（转种血G.C

琼脂平板；涂片革兰氏染色为G-双球菌；氧化酶试验阳性；四糖发酵试验：葡萄糖+，麦芽糖-，蔗糖-，乳糖-。），确定是否为淋球菌生长。在上述病例的检测中，共检出1例淋球菌，阳性率2.7%。在B平板上，杂菌的生长明显受到抑制，杂菌生长较少，在阳性的标本上，很容易就能分辨出其中的细小、圆形、凸起、湿润、光滑、半透明或灰白色的疑似淋球菌菌落。在上述病例的检测中，亦检出1例淋球菌，阳性率2.7%。

在C平板上，杂菌的生长普遍稀少，抑制杂菌作用明显增强。上述标本的检测中，阳性病例也可见淋球菌生长，但淋球菌菌落也很细小，呈针尖状，怀疑其生长受到抑制。

2结果分析

从上述培养结果看，B平板培养结果虽然并不能比正常TM平板有更高的阳性率，但更加容易找到阳性菌落，从检验操作的角度来说，有一定的应用价值。C平板则虽然抑制杂菌效果好，但淋菌生长也可能受影响。

4讨论

咽拭子培养淋球菌在临床上开展时间不长，尚缺少相关的知识和经验，有待进一步积累经验和病例资料，探索提高检出率的方法。从本试验结果来看，提高四种混抗浓度是一种可以考虑的选择，虽然目前还没证据可提高检出率，随着检测病例的增加，将会有更多证据，所以还应该继续探索试验。试验成本不高，每个平板成本仅约3元钱，比购买的商品TM平板（8元/个）更加便宜。

从理论上分析，咽拭子培养淋球菌可能要和其它奈瑟氏菌比如卡他奈瑟氏菌[3]以及脑膜炎双球菌[4]相鉴别，但从已有资料看，至今还没有在病人样本中检测到这两类菌。如果在以后的检测中遇到了，可考虑用低温（28℃）生长试验和糖发酵试验鉴别。

【参考文献】

[1][3][4]吴志华主编现代性病学.广东人民出版社.1996.97～129.

[2]叶顺章,张木友主编现代性传播疾病实验诊断技术.广东科技出版社.1999.18～41.

[5]何晓青．卫生防疫细菌检验[M]．北京：新华出版社，1989．199—200．

[6]中华人民共和国卫生部卫生防疫司．性病防治手册[M]．南京：江苏科学技术出版社，1993．31—38．

[7]陆永绥，张伟民．临床检验管理与技术规程[M]．杭州：浙江大学出版社．2004．917～919．

作者简介：姓名：温红光（出生1958年11月），性别，男，民族，汉，籍贯，广东省梅县，单位：广东省梅州市梅县慢性病防治院,学历，大专职称，主管检验师研究方向。地址：广东省梅州市梅松路37号梅县慢性病防治院检验科单位邮编，514011，电话：13536703989作者简介：姓名：温红光（出生1958年11月），性别，男，民族，汉，籍贯，广东省梅县，单位：梅县慢性病防治院,单位邮编，514011，单位所在城市，广东省梅州市学历，大专职称，主管检验师研究方向。