被动凝集半定量检测法在早期肺炎支原体感染诊断中的应用

被动凝集半定量检测法在早期肺炎支原体感染诊断中的应用

蒋可乾

蒋可乾（贵州省平坝县人民医院检验科561100）

【摘要】目的探讨被动凝集半定量检测法在早期肺炎支原因体感染诊断中的应用。方法采用被动凝集半定量检测法检测182例疑似肺炎支原体感染患者血清中肺炎支原体并进行检测、对比、分析。结果182例疑似肺炎支原体感染患者血清中阴性70例；（1：40）阳性56例，（1：80）阳性32例，（1：160）阳性23例，（≥1：320）阳性7例；阳性共112例，总阳性率为61.54%。其中第一次检测为抗体阳性、低滴度（1：40）的患者中有23例与一周后随访再次检测，有5例为阳性，且滴度均为了：160以上。结论被动凝集法试验结果为（≥1：160）高效价滴度时及虽第一次检测为阴性或低滴度阳性但一周后滴度有四倍以上升高的，可为早期肺炎支原体感染的临床诊断提供有价值依据。

【关键词】被动凝集法早期感染抗肺炎支原体抗体

【中图分类号】R446【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2013）22-0310-02

肺炎支原体（MYcoplasmapneumonia,MP）是一种介于病毒和细菌之间，能自行繁殖的最小原核生物，它无细胞壁、不易染色，是引起小儿呼吸道疾病的常见病原体之一，亦可导致心、脑、肾、肝、胃肠道、血液等肺外各种器官损害，因此准确检测MP抗体是早期诊断和治疗支原体肺炎的关键。本研究采用被动凝集法检测MP抗体进行分析，探讨被动凝集法在早期肺炎支原体感染诊断中的应用。

1材料与方法

1.1标本采集：2011年1—12月本院门诊及住院182例有明显呼吸道症状、持续剧烈咳嗽及X线胸片示肺部呈不同程度炎症表现的疑似肺炎支原体感染患者血清。

1.2试剂：采用（日本）富士瑞欧株式会社会生产的赛乐迪亚—麦克II试剂盒（被动凝集法）。

1.3检测方法：被动凝集定量检测法：该方法为检测MP的总抗体I（IgG+IgM+IgA）。具体操作：向凝集反应板（12×8）第一孔加入100ul标本稀释液，第2～12孔各加入25ul标本稀释液，第1孔加入25ul待检血清，后从第1～12孔进行倍比稀释，第2孔加入1滴（25ul）未致敏因子，第3～12孔各加入1滴（25ul）致敏因子，第3～12孔最终稀释倍数（1：40）、（1：80）、（1：160）、（1：320）、（1：20480），充分混匀后反应板加盖，室温（18℃～25℃）放置3h，观察读取凝集反应结果。

1.4结果判读标准

表1被动凝集法检测肺炎支原体结果判定标准

2.2在第一次检测为MP抗体阴性和低滴度（1：40）的126患者中有23例于一周后随访再次检测，有5例为阳性，且滴度均为1：160以上。

肺炎支原体肺炎的显著临床表现为：青霉素、头孢类抗生素治疗无效而大环内酯类抗生素治疗疗效显著。通过治疗后随访患者治疗性况显示：MP抗体滴度在这方面160以上阳性患者均可诊断为肺炎支原体肺炎患者。

3讨论

肺炎支原体是介于细菌与病毒之间，能独立存活的最小微生物，由于MP自身生长条件苛刻、生长慢[1]，作为金标准的真培养法，难以在临床上推广。目前国内外最常用的检测方法是血清抗体检测。本课题采用（日本）富士瑞欧株式会社会生产的赛乐迪亚—麦克II试剂盒（被动凝集法）。该试剂以人造红色颗粒作为载体，应用特异性免疫凝集原理，当血清中存在肺炎支原体抗体时，抗原抗体反应使载体颗粒凝集，因它利用明胶而不是用动物红细胞为载体，故能清除非特异性反应，凝集图像清晰，诊断MP感染具有敏感度高，特异性强，重复性好，操作简单，无需特殊仪器等优点。缺点是检测的为总抗体，对于低滴度患者尚需进行检测一周后随访，若MP抗体滴度有4倍以上上升才可判断为现症感染。

被动凝集虽检测MP总抗体。但当结果为高效价滴度（1：160～≥1：320）时可为临床对肺炎支原体感染的早期诊断提供有力依据，做到早发现、早治疗，以避免肺炎支原体感染的大流行和严重并发症发生。

综上所述，应用被动凝集法检测MP抗体呈高效价滴度时对疑似肺炎支原体感染患者的早期诊断和临床治疗具有重要意义。

参考文献

[1]张卓然.生物学和微生物学检验[M].3版.北京：人民卫生出版社，2003：289-290.