地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用

地中海贫血筛查及地贫基因分型在产前诊断中的应用

柏芹

深圳市罗湖区妇幼保健院检验科518001

摘要：目的探讨血常规筛查、血红蛋白电泳、地贫基因诊断在孕产妇中的应用。方法随机抽取2018年1月至2018年6月来我院产检的1000名孕妇，以地贫基因诊断结果为金标准，对血常规指标（MCV、MCH）以及血红蛋白电泳对诊断地中海贫血的检出率进行比较，并且分析地中海贫血的基因类型。结果1000份标本中，确诊为地中海贫血的有71例，其中缺失型α地贫基因：-SEA缺失型杂合子31例，-α3.7缺失型杂合子19例，-α4.2缺失型杂合子2例；β地贫基因：CD41-42突变杂合子9例，IVS-Ⅱ-654突变杂合子3例，-28突变杂合子3例，CD17突变杂合子1例；非缺失型α地贫基因：QS突变杂合子1例，WS突变杂合子1例。αβ复合型地中海贫血1例，为-SEA/CD41-42基因型。血常规指标（MCV、MCH）异常，地贫检出率为63%；血红蛋白电泳异常，地贫检出率为49%；二者联合，地贫检出率为91%。结论地中海贫血诊断在产前诊断中具有重要意义，血常规参数与血红蛋白电泳相结合，地贫的筛查率和检出率均会提高。

关键词地中海贫血；血常规参数；血红蛋白电泳；地贫基因

地中海贫血是由于血红蛋白的珠蛋白链有一种或几种的合成受到部分或完全抑制所引起的一组遗传性溶血性贫血【1】。其中，α珠蛋白基因缺失或缺陷，导致α珠蛋白链合成减少或缺乏，称为α地中海贫血。β珠蛋白基因缺陷导致β珠蛋白链合成减少或缺乏，称为β地中海贫血。α地中海贫血根据发生的不同程度分为静止型或标准型α地中海贫血、血红蛋白H(HbH)病、血红蛋白Bart胎儿水肿综合征。β地中海贫血是常染色体显性遗传，可分为轻型、中间型、重型三种。广东是地中海贫血的高发地区之一，因此，对孕妇进行地贫筛查，对地中海贫血的早期预防具有重要意义。

1资料、方法

1.1对象2018年1月-2018年6月来我院产检的1000名孕妇，年龄在21-40岁之间，平均年龄31岁，对其血常规参数(MCV、MCH)，血红蛋白电泳，地贫基因结果进行分析。

1.2血常规采集研究对象2ml外周静脉血，EDTA-K2抗凝。用SysmexXE-5000全自动血液分析仪进行检测，MCV<80fl和/或MCH<27pg者，进行基因检测。

1.3血红蛋白电泳分析采集研究对象外周静脉血2ml，肝素钠抗凝。用Sebiacapillary2毛细管电泳及其配套试剂（法国sebia公司）对外周静脉血进行血红蛋白电泳分析。质控品及标本检测均按仪器及试剂说明书操作。HbA2<2.5%，HbA2>3.5%判定为阳性【2】，进行基因检测。

1.4地贫基因检测采集研究对象2ml外周静脉血，EDTA-K2抗凝。用地贫基因试剂盒（深圳亚能生物技术公司）检测外周静脉血地贫基因。用Gap-PCR和PCR-RDB方法检测常见的3种缺失型α-地贫（--SEA、-α4.2、-α3.7）和3种非缺失型α-地贫（HbCS、HbWS、HbQS）以及17种常见的β-地贫基因突变类型：-28（HBB:c.-78A>G）、-29（HBB:c.-79A>G）、CD17(HBB:c.-52A>T、CD41-42(HBB:c.126-129delTTC、CD43(HBB:c.130G>T)、CD43(HBB:c.130G>T)、ΒE(HBB:c.79G>A)、CD71-72(HBB:c.216＿217insA)、IVS-Ⅱ-654（HBB:c.316＿197C>T）、-32（HBB:c.-82C>A）、-30（HBB:c.-80T>C）、CAP(HBB:c.-11＿-8delAAAC)、Initiationcondon(HBB:c.2T>G)、CD14-15（HBB:c.45＿46insG）、CD27-28(HBB:c.84＿85insC)、IVS-Ⅰ-1(HBB:c.92+1G>T)、IVS-Ⅰ-5（HBB:c.92+5G>C）、CD31(HBB:c.94delC)。质控品及标本检测均按仪器及试剂说明书操作【3】。

1.5统计方法经SPSS19.0分析数据，利用[n(%)]表示全部计数资料，进行χ²检验，对照结果有显著差异，P<0.05。

2结果

2.1红细胞参数筛查，筛查阳性者有99例，筛查率为9.9%，确诊为地贫的有63例，确诊率为49%；红细胞电泳筛查，筛查阳性者有97例，筛查率为9.7%，确诊为地贫的有48例，确诊率为49%；红细胞参数及血红蛋白电泳均为阳性的有55例，确诊为地贫的有50例，确诊率为91%。见表1

2.2α-地中海贫血基因分布本组1000例孕妇种检测出54例α-地中海贫血，其中aa/--SEA地中海贫血占的比例最大，有31例，具体分布见图1：

2.2β-地中海贫血基因分布本组1000例孕妇中检测出16例β-地中海贫血，其中CD41-42型地中海贫血占的比例最大，有9例。具体分布见图2：

2.4αβ复合型地中海贫血分布本组1000例孕妇中，检测出1例αβ复合型地中海贫血，为-α3.7/IVS-Ⅱ-654型。

3讨论

地中海贫血是遗传性慢性溶血性贫血症的一种，危害较大，临床出现率较高。其中危害最大的是重型地贫【4，5】。轻型地贫携带者，如不开展血液检查，则可能出现漏诊。对于携带了地中海贫血基因的人怀孕后新生儿患上地中海贫血的可能性要明显高于正常新生儿，严重情况下会导致肝脾肿大、智力发育迟缓，甚至可能出现死亡。因此，在孕前积极开展地贫基因检测，选择性受孕，对于保证婴儿健康有重要意义【6】。

本研究通过分析1000名产检孕妇的血常规、血红蛋白电泳、地贫基因的结果得出结论，红细胞参数（MCV、MCH）筛查，筛查率为9.9%，确诊率为49%；红细胞电泳（HbA2）筛查，筛查率为9.7%，确确诊率为49%；红细胞参数及血红蛋白电泳均为阳性的确诊率为91%。因此，笔者建议以红细胞参数、血红蛋白电泳为筛查指标，二者之一为阳性的可进行地贫基因检测，以提高筛查率和检出率。

本研究通过对71例确诊为地贫的基因类型进行分析，得出α-地中海贫血以aa/--SEA基因型为主，其次为-α3.7/αα型。β-地中海贫血以CD41-42为主。αβ复合型地中海贫血仅1例，为为-α3.7/IVS-Ⅱ-654型，不具有统计学意义。

综上所述，地贫初筛和地贫基因诊断是产前诊断重要检查，对地中海疾病的预防、诊断、治疗都具有重要的意义。

4参考文献

【1】叶任高，陆再英，等.内科学586-587.

【2】赖玉玲，黄丽芳，马美春，等.孕妇孕前地贫基因检测结果分析［J］实验与检验医学，2018，（6）：446-447.

【3】李育敏，李瑞，熊丹，等.血红蛋白A2筛查β地中海贫血的价值［J］临床检验杂志，2018，（6）:429-430.

【4】谢建渝，虞柯静，罗文梅，等.423例孕妇地中海贫血筛查及基因检测结果分析和临床意义［J］检验医学与临床，2014，11（10）1325-1330.

【5】李爱敏，唐曙明，陈海霞，等.血液学初筛表型阴性的孕妇地中海贫血基因检测结果分析［J］实验与检验医学，2015，33（5）：576-591.

【6】成明，李健，郭奇伟，等.厦门地区3715例地中海贫血基因检测结果分析［J］中国妇幼保健，2015，30（12）：1870-1872.