CIK联合同步放化疗治疗中晚期宫颈癌的临床研究

CIK联合同步放化疗治疗中晚期宫颈癌的临床研究

景文江1，2赵新汉（通讯作者）2马武1张淑莲1

景文江1，2赵新汉（通讯作者）2马武1张淑莲1

（1西安交通大学附属3201医院陕西西安710000）

（2西安交通大学第一附属医院陕西西安710000）

【摘要】目的：探讨细胞因子诱导的杀伤（cytokineinducedkiller，CIK）细胞联合同步放化疗治疗中晚期宫颈癌的临床疗效。方法：将48例中晚期宫颈癌癌患者进行随机分组：研究组24例，给予同步放化疗+CIK细胞治疗；对照组24例，给予同步放化疗。比较两组患者的免疫功能、生活质量、近期疗效及不良反应。结果：经过治疗后，治疗组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值及CD16+CD56+显著上升，CD8+细胞显著下降，与治疗前相比差异有统计学意义（P＜0.05）；对照组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+与治疗前相比差异无统计学意义（P＞0.05）。研究组生活质量评分改善79.2%，明显高于对照组的54.2%（P＜0.05）。研究组客观有效率为91.7%，对照组为75%，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。治疗组和对照组的1年生存率分别为95.8%vs83.3%，明显降低了同步放化疗不良反应。结论：CIK细胞联合同步放化疗可以提高中晚期宫颈癌患者的近期疗效、改善患者免疫功能及生活质量，降低同步放化疗不良反应。

【关键词】宫颈癌；同步放化疗；CIK细胞

【中图分类号】R73【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2016）04-0201-03

宫颈癌是一种发生在子宫颈上皮的恶性肿瘤，其发病率在我国居女性恶性肿瘤第一位[1]，早期宫颈癌以手术为主，ⅡB-ⅣA期晚期宫颈癌以同步放化疗为主的治疗模式已成为标准方案[2]，由于同期放化疗只能杀死一定比例肿瘤细胞，很难清除微小残留灶，且化疗后患者机体免疫功能受到不同程度的损伤；近年来，自体细胞免疫治疗成为治疗恶性肿瘤的研究热点，研究表明[3]，细胞因子激活后的杀伤细胞即CIK细胞具有提高肿瘤患者机体免疫力，清楚体内微小残留病灶的作用。本研究通过CIK细胞联合同步放化疗治疗中晚期宫颈癌，皆在探讨CIK细胞在宫颈癌治疗中的有效性和安全性。

1.资料与方案

1.1一般资料

病例入选标准：①按照国际妇产科联盟（FIGO）分期标准ⅡB-ⅣA期患者；②宫颈活检标本病理证实为宫颈鳞癌、腺癌、腺鳞癌；③KPS评分≥70分；④无严重心肺、肝肾等内科疾病；⑤血常规、肝肾功、输血四项、乙肝系列、心电图检查正常。

收集我院2013年3月～2014年5月ⅡB-ⅣA期宫颈癌患者48例，年龄32岁～72岁，随机选取24例行同步放化疗组；24例行同步放化疗联合CIK细胞治疗组

1.2治疗方法

两组均给予直线加速器6mV的X射线进行三维适形体外放射治疗，分割剂量每次1.8～2Gy，每日1次，每周5次，共25次，组织量达50Gy后行192Ir近距离照射，1次/周，总剂量30-32Gy，放疗开始第1天给予顺铂20～30mg/m2,d1-2;紫杉醇135mg/m2,d1,3～4周为1周期，共进行4周期。

1.2.1CIK细胞培养与回输研究组于化疗结束后4周通过血细胞分离机采集外周血单个核细胞约50ml，制备成单个核细胞悬液，调节密度4～6×109/L，加入IFN-γ，置于37℃、5%CO2培养箱培养24小时，然后分别加入IFN-γ、CD3McAb及IL-2继续培养，隔日一次。以采血之日作为第1天，培养至第8、9天时取少量CIK细胞对其进行细菌、真菌及内毒素检测第1次检测，并检测其表面标志物，然后将细胞混悬于生理盐水中回输，回输中第3次，进行细菌检测，每次输注细胞数为1.5～6.3×109个，隔日一次，共输注6次。注意观察输注中患者有无寒颤、发热、过敏等不良反应

1.3观察指标及疗效判定

观察指标包括两组患者免疫功能、生活质量、近期疗效、生存率和不良反应。使用流式细胞仪进行治疗前后T细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、NK细胞（CD16+CD56）的变化。应用KPS评分评价患者生活质量变化；近期疗效根据美国国立癌症研究所实体瘤疗效评价标准（RECIST），分为完全缓解（CR）、部分缓解（PR）、稳定（SD）和进展（PD），客观有效率（ORR）=CR+PR；不良反应分级参考RTOG常用毒性标准，收集从入组到CIK细胞治疗后4周发生的不良反应。

1.4统计学分析

采用统计学软件SPSS17.0版软件进行数据分析，计数资料比较采用χ2检验，计量资料以均数±标准偏差（x-±s）表示，以P＜0.05为具有统计学意义

2.结果

2.1T淋巴细胞亚群变化

研究组患者CIK细胞结束后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+显著上升，CD8+细胞显著下降，治疗前后差异均有统计学意义（P＜0.05）。对照组治疗结束后，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及CD16+CD56+与治疗前相比差异均无统计学意义（P＞0.05）。

表1治疗组和对照组治疗前后T细胞亚群和NK细胞比较（x-±s）

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2.3近期疗效

所有患者治疗结束后2月，研究组和对照组有效率分别为91.7%和75.0%，有统计学差异（P＜0.05）。两组患者随访至2015年8月31日，随访满1年，1年生存率分别为95.8%和83.3%，有统计学差异（P＜0.05）。

2.4不良反应

两组患者的不良反应主要为骨髓抑制（白细胞下降、贫血、血小板下降）、放射性直肠炎及膀胱炎。因同步放化疗后给予CIK细胞治疗，主要观察血常规为两组治疗结束后1周复查，研究组不良反应发生率低于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。研究组仅有1例（4.17%）患者输注CIK细胞时出现发热（37.6℃），给予吲哚美辛肛门纳入后1小时恢复正常，24小时未再出现发热。

表3两组患者不良反应发生率比较（治疗结束后1月）

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3.讨论

宫颈癌是女性生殖系统中最常见的恶性肿瘤，手术、放疗和化疗治疗手段对于早期宫颈癌患者有效，同步放化疗对于中晚期患者，虽然能提高患者生存率，降低远处转移率，但同步放化疗骨髓抑制和胃肠道反应明显增高[4]，而且放化疗在杀灭肿瘤病灶同时损害患者的免疫功能，肿瘤患者免疫功能下降导致机体免疫监视功能降低，容易发生肿瘤的复发及转移，对于局部晚期化疗患者而言，如何在提高化疗效果的同时改善机体的免疫功能显得尤为重要，张蓓等[5]进行恶性妇科肿瘤放和（或）化疗联合CIK治疗与单纯化疗对比试验，得出CIK能增强免疫功能改善临床症状。

近年来过继免疫治疗已逐渐成为肿瘤的生物治疗研究热点，其中CIK细胞临床应用较多。CIK细胞是将人体外周血单个核细胞在体外加用多种细胞因子（如CD3McAb、IL-2、IFN-γ、IL-1等）共同培养增殖后获得的一群异质细胞，是目前自体免疫细胞治疗的主要类型之一，属于新一代过继性T细胞免疫治疗[6]CIK具有增殖快、抗瘤谱广（能高效杀伤化疗耐药的瘤细胞）、杀瘤活性高（活性为LAK的80倍）、副作用小（精确杀伤肿瘤细胞而不伤及正常细胞）等特点，对手术或放化疗后的患者效果尤其显著，能清除残留微小病灶，减少扩散复发、保肝升白、调节机体异常免疫环境，提高免疫力[7]。

T细胞亚群和NK细胞活性是反映肿瘤患者免疫功能的重要指标，根据T细胞表面分化抗原将成熟T细胞分为CD4辅助/诱导T细胞、CD8抑制/杀伤T细胞。肿瘤患者因机体免疫监视功能降低，常表现CD4+T细胞下降，CD8+T细胞上升，CD4+/CD8+比值下降，甚至倒置[8]。CD16和CD56是NK细胞的表面标志物，其表达下降提示机体NK细胞作用受抑制，细胞免疫功能下降，不能发挥有效杀伤肿瘤细胞的作用。

本研究治疗组患者在同步放化疗后给予CIK细胞后，患者外周血T淋巴亚群测定CD4+/CD8+比例升高，说明患者免疫功能得以恢复与提高，进一步杀伤放化疗后残存的肿瘤细胞，说明机体免疫功能改善，同时患者生活质量改善，提高了患者生存期减轻了同步放化疗后不良反应的发生，因本研究病例数少，需要进一步扩大样本量及观察患者远期效果。

【参考文献】

[1]郑晓霞，李琼珍，李玲等.宫颈癌预后状况及其影响因素分析[J].实用癌症杂志，2014，29（3）：314-316.

[2]彭秀兰，罗良志，姚世炳等.同步放化疗治疗中晚期宫颈癌的疗效分析[J].实用医院临床杂志，2014，11（6）：167-169.

[3]ChenR,DengX,WuH,PengP,Combinedimmunotherapywithdendriticcellsandcytokine-inducedkillercellsformalignanttumors:Asystematicreviewandmetaanalysis[J].IntImmunopharmacol,2014,22(2):451-464.

[4]杨宇星，程晓伟，余小元.同步放化疗治疗中晚期宫颈癌[J].医学理论与实践，2011，24（7）：756-757,766.

[5]张蓓.CIK细胞治疗妇科恶性肿瘤的近期疗效观察[D].山东：山东大学，2011.

[6]LinG,WangJ,LaoX,etal.Interleukin-6InhibitsRegulatoryTCellsandImprovestheProliferationandCytotoxicActivityofCytokine-inducedKillerCells[J].J

Immunother,2012,35(4):337-343

[7]PIEVANIA，BELUSSIC，KLEINC，eta1.EnhancedkillingofhumanBcelllymphomatargetsbycombineduseofcytokine—inducedkillercell(CIK)culturesandanti—CD20antibodies[J].Blood，2011，117(2)：510-518.

[8]ChenJ,HuangX,HuangG,etal.PreconditioningchemotherapywithCisplatinenhancestheantitumoractivityofcytokine-inducedkillercellsinamurinemelanomamodel[J].CancerBiotherRadiopharm,2012,27(3):210-220.