数字化色谱指纹谱技术在六味地黄滴丸药材鉴定中的应用效果评价

数字化色谱指纹谱技术在六味地黄滴丸药材鉴定中的应用效果评价

吴冰

吴冰

（广西壮族自治区柳州市中医院药学部545001）

【摘要】目的：探究数字化色谱指纹谱技术在刘伟地黄滴丸药材鉴定中的应用效果。方法：将马钱苷以及丹皮酚作为定性定量因子，相对保留值α为判断依据，建立RP-HPLC数字化指纹谱。以CH3OH-0.2%甲酸水溶液作梯度洗脱为流动相，流速为1mL/min，检测波长为220nm。结果：预先选定色谱，建立药材和之际的数字化色谱指纹谱，制定稳定可控的制剂指纹谱，对比空白样品，更加深入探究制剂中用以鉴定药材的特征峰群。结论：通过数字化色谱指纹谱技术在刘伟地黄滴丸药材鉴定中的应用效果较好，经证实是切实可行的。

【关键词】数字化色谱；指纹谱技术；六味地黄滴丸；高效液相色谱法

【中图分类号】R95【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）34-0362-01

六味地黄滴丸是一种新型中药药剂，主要以我国传统中药组方为基础，对于治疗肾阴亏损、腰膝酸软、头晕耳鸣以及盗汗等症状有着显著疗效，是临床应用较为普遍。将药材制造成水溶性的成滴丸剂型能够加强药物的溶解性以及稳定性，充分发挥药效，在实际应用中更加符合广大肾阴亏损患者治疗需要，改善患者生活质量。由此，本次研究主要以六味地黄滴丸的数字化色谱指纹谱作为研究基础，对两种药材进行色谱指纹谱鉴别，建立复方酮药材之间的联系，发现可用以鉴定药材的特征峰群，提供科学依据。

1.仪器与材料

所选用仪器主要有Agilentl100高效液相色谱仪，G1314ASK32OOH超声仪检测器；选购国药集团化学试剂有限公司的甲醇试剂，甲酸等试剂为分析纯，水为重蒸水；六味地黄滴丸为江苏颐海药业集团有限公司出厂，隐形样品为江苏颐海药业集团有限公司提供，所选用对照品为马钱苷（批号：110855-200203）和丹皮酚（批号：809-200501），选自中国药品生物制品鉴定所。

2.结果

2.1色谱条件

研究需要建立在一定的色谱条件下，其中色谱柱：InertsilODS-3（3.8mm×210mm，5）；保护住：phenomenexC18（ODS）（3.2mm×38mm，5）；流动相：CH3OH（A）-0.2%甲酸水溶液梯度洗脱（0～35min，3%～40%A；35～55min）；流速为1mL/min，波长检测为220nm。

2.2溶液配制

首先取6g滴丸粉，采用20mL70%甲醇超声提取5次，每次12min，合并滤液，滤液干燥后采用甲醇定容15mL，并经0.5微孔滤膜过滤；按照规定处方采取一定剂量的山茱萸以及牡丹皮中药材，精确称定药材质量，遵循复方相同制备处理，经0.5微孔滤膜过滤；选取适量厂家提供阴性样品，遵循复方加入马钱苷得到山茱萸样品，加入丹皮酚得到牡丹皮样品。

2.3数字化色谱仪指纹谱的建立

采用HPLC技术对六味地黄滴丸、牡丹皮以及山茱萸药材进行梯度风力分析，得到色谱峰值，利用相对保留值α以及相对面积之RA，得出相对保留值指纹谱，对比阴性样品，找出药材特征峰群。

2.4结果

比较分析α值在0.512/0.628.0.715/0.952以及1.125等不同区间内，药材同成品中存在不被阴性干扰的共有峰，可以将其看作是山茱萸在六味地黄滴丸中的特征峰，用以鉴别药材质量；采用丹皮酚作为参照依据，通过数字化色谱指纹谱对比分析，可以得出α值在0.355/0.246/0.482以及1.125时，药材同六味地黄滴丸中有不被阴性干扰的共有峰，可将其看做牡丹皮在六味地黄滴丸中的特征峰，鉴定牡丹皮药材质量。

3.讨论

随着医学水平的提高，对于六味地黄制剂的质量研究更多采用方中山茱萸以及牡丹皮作为主要成分，将马钱苷和丹皮酚作为定性定量指标，以此来全面反映中成药中含有大量复杂中药成分的质量优劣，科学合理的控制六味地黄滴丸内在质量[1]。本次研究中建立的六味地黄滴丸指纹图谱，经过科学方法检验，表明此方法较为稳定，具有较强可靠性以及专属性。由于六味地黄滴丸制备工艺复杂，由此导致不同批次之间存在不同程度的差异，但就指纹图谱而言，整体特征峰群一致，采用指纹谱鉴别六味地黄滴丸质量方法可行，具有实际意义[1～3]。

由于六味地黄滴丸是一种中成药，其中含有成分复杂，为了更加全面反映制剂全貌，观察检测波长，分贝对210、220、240、275nm等波长进行分析，结果表明220nm波长色谱峰多型好，故选择240nm波长。

本次研究中采用HPLC技术对六味地黄滴丸、山茱萸以及曼丹皮药材进行梯度分离分析，得到了大量色谱峰，通过相对保留值α以及相对面积值组成了数字化色谱指问普，对比阴性样品，明晰制剂中坚定药材的特征峰群，此方法切实可行，值得临床推广应用。

【参考文献】

[1]安叡，朱丽萍，王莹等.数字化色谱指纹谱技术在六味地黄滴丸药材鉴定中的应用[J].中成药，2010，22（01）:3-6.

[2]张振海，贾晓斌，陈彦等.丹皮酚羟丙基甲基纤维素包衣颗粒的稳定性研究[J].中成药，2012，02（09）:1804-1806.

[3]《时珍国医国药》2012年1～12期总目次[J].时珍国医国药，2012，3（12）:3220-3238.