洛伐他汀保护同型半胱氨酸硫内酯对大鼠离体胸主动脉内皮损伤的机制研究

洛伐他汀保护同型半胱氨酸硫内酯对大鼠离体胸主动脉内皮损伤的机制研究

黄宁江阳晓黄海

黄宁江阳晓黄海

（永州职业技术学院湖南永州425100）

【摘要】目的：观察洛伐他汀保护同型半胱氨酸硫内酯（HomocyteineThiolactone,HTL）对大鼠离体胸主动脉内皮损伤的作用，并探讨其机制。方法：大鼠离体胸主动脉血管环与HTL共孵育，诱导血管内皮损伤，检测血管内皮依赖性舒张反应，观察洛伐他汀保护HTL诱导血管内皮功能损伤的作用。结果：给予不同浓度洛伐他汀(10,20,40μmol/L)可明显改善HTL对血管环EDR的损伤，与HTL损伤组相比均有显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）。结论：洛伐他汀呈浓度依赖性地拮抗HTL对血管内皮功能的损伤作用，其机制可能与抑制氧化应激，保护血管内皮的NO合成与释放有关。

【关键词】洛伐他汀；内皮依赖性舒张反应；HTL

【中图分类号】R453【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2015）10-0035-02

AresearchofLovastatinprotectionhomocysteinesulfurlactonesofratsinvitrothoracicaorticendothelialdamageHuangNingjiang,YangXiao,HuangHaiYongzhouVocationalTechnicalCollege,Hu’nanProvince,Yongzhou425100,China

【Abstract】ObjectiveObservationoflovastatinprotectionhomocysteinesulfurlactone(HTL)oninvitrothoracicaorticendothelialdamageinrats,andtoexploreitsmechanism.MethodsRatsinvitrothoracicaortavascularringwithHTLincubation,induceendothelialinjury,detectionofvascularendothelium-dependentrelaxingreaction,observationoflovastatinHTLinducedendothelialfunctioninjuryprotectionrole.ResultsGivendifferentconcentrationoflovastatin(10,20,40μmol/L)cansignificantlyimprovetheHTLdamageofvascularringEDR,comparedwithHTLinjurygrouphadsignificantdifference(P<0.05orP<0.01).ConclusionsLovastatinshowedaconcentrationdependentantagonismofHTLdamageeffectsonendothelialfunction,itsmechanismmayberelatedtotheinhibitionofoxidativestress,protectingvascularendothelialNOsynthesisandreleaseof.

【Keywords】Lovastatin;Endothelium-dependentrelaxingresponse;HTL

目前认为导致心、脑血管病独立危险因素之一是高同型半胱氨酸（HHcy）血症[1]，而致病主要病理学基础是HTL[2]。近年使用高HHcy动物模型或Hcy对细胞的损伤[3]，发现他汀类药物可保护HHcy引起的血管内皮功能损伤[4]，但他汀类保护HTL损伤血管内皮功能的作用，尚未见文献报道。本研究通过观察洛伐他汀保护HTL损伤大鼠离体血管内皮依赖性舒张反应的作用，探讨其可能的作用机制。

1.材料与方法

1.1材料

雄性大鼠，体重180±20g，由湘雅医学院实验动物学部提供。美国Sigma公司生产的洛伐他汀、超氧化物歧化酶（SOD）、HTL、L-N-硝基精氨酸甲酯（L-NAME）、乙酰胆碱（ACh）、苯肾上腺素（Phe）、N－乙酰半胱氨酸（NAC）、硝普钠（SNP）。

1.2实验分组

血管舒张功能的检测：戊巴比妥钠（30mg/kg，i.p）麻醉大鼠后，放血处死迅速开胸取出一段胸主动脉置于预冷的K-H溶液中，剪成血管环，通过生物信号采集系统进行记录。将待试药物加入浴槽中，分别检测非内皮依赖性舒张反应及EDR。

每组实验用6个血管环，分为①K-H液；②40μmol/L洛伐他汀；③30mmol/LHTL；④HTL+10μmol/L洛伐他汀；⑤HTL+20μmol/L洛伐他汀；⑥HTL+40μmol/L洛伐他汀；⑦HTL+0.05mmol/LNAC；⑧HTL+200U/mlSOD；⑨HTL+0.01mmol/L+L-NAME+40μmol/L洛伐他汀共9个组，分别检测血管环的EDR及非内皮依赖性舒张反应。

1.3统计学处理

用SPSS11.0软件进行统计学处理，数据以x-±S表示。组间差异比较用ANOVA及Newman-Student多元t检验分析，双侧P＜0.05为显著性差异。ACh或SNP引起的血管环舒张值与Phe（1?mol/L）引起的收缩值之比表示血管环的舒张百分率，计算半数有效量(EC50)及最大舒张百分率（Emax）。

2.实验结果

洛伐他汀及不同因素对HTL所致血管EDR损伤作用的影响，各组血管环的EDR在孵育前无明显差异。如表1、表2所示，经过90min孵育后，HTL使血管环EDR明显降低，Emax明显缩小、EC50显著升高，与正常对照组比，P＜0.01。洛伐他汀对照组与正常对照组比较无明显差异。血管环与洛伐他汀和HTL共同孵育，洛伐他汀(10,20,40μmol/L)浓度依赖性地减轻了HTL对EDR反应的损伤作用，与HTL损伤组比较，Emax明显升高，EC50明显降低，P＜0.05和0.01。NAC、SOD对HTL所抑制EDR反应也有显著保护作用，其效果类似洛伐他汀（40μmol/L）。NOS抑制剂L-NAME（0.01mmol/L）和HTL、洛伐他汀（40μmol/L）共孵，明显阻滞了洛伐他汀的抗HTL损伤作用，与洛伐他汀（40μmol/L）加HTL组比较P<0.01。

洛伐他汀、HTL及不同处理因素对血管非内皮依赖性舒张反应的影响血管环与各处理因素共孵90min后，分别检测SNP（0.3?mol/L）引起的非内皮依赖性舒张反应，结果显示各组测得舒张百分率比较无显著性差异（P＞0.05）。3.讨论

实验中，我们发现HTL（30mmol/L）与离体胸主动脉血管环孵育后，血管EDR明显降低，而对SNP诱导的血管非内皮依赖性舒张反应无明显影响，说明该浓度的HTL主要损伤血管内皮，这与我们先前已报道的实验结果一致[5]。HTL与不同浓度的洛伐他汀共同孵育血管环，洛伐他汀呈浓度依赖性地减轻了HTL对EDR的损伤作用。HTL对硝普钠引起的非内皮依赖性舒张反应无影响，提示HTL对血管EDR的影响可能主要与干扰了NO的合成或释放有关。

本研究和国内外学者的研究表明，洛伐他汀可以增加SOD活性而发挥抗氧化作用[4]。实验中，我们发现洛伐他汀显著保护了HTL对大鼠离体血管内皮功能的损伤，从而推测他汀类药物对高Hcy所致的血管内皮功能损伤有保护作用，其机制可能主要与保护NO释放，减少脂质过氧化产物的生成及抗氧化相关，其精确的机制尚有待进一步的研究。该研究手段为研究Hcy致病机制提供了新的方法，其结果为拓宽他汀类药物的临床应用提供了新的依据。

【参考文献】

[1]JiangX;YangF;TanH,etal.HyperhomocystinemiaImpairsEndothelialFunctionandeNOSActivityviaPKCActivation[J].Arteriosclerosis,Thrombosis,andVascularBiology.2005,25:2515-2521.

[2]JakubowskiH.PathophysiologicalConsequencesofHomocysteineExcess[J].J.Nutr,2006,136:1741S-1749S.

[3]胡允兆，董吁钢，翟玉锋等.辛伐他汀对同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞的毒性和炎症反应的影响[J].中华医学杂志，2006，86(32):2297-300.

[4]徐志红，陆国平，吴春芳.高同型半胱氨酸血症对内皮细胞炎症反应的促发作用及其干预性研究[J].中国动脉硬化杂志，2007，15（5）：353-357.

[5]LiuYH,YouY,SongT.etal.Impairmentofendothelium-dependentrelaxationofrataortasbyhomocysteinethiolactoneandattenuationbycaptopril[J].JCardiovascPharmacol.2007,50(2):155-161.

基金项目：湖南省教育厅高校科学研究项目（项目编号：10C0325）