尿亚硝酸盐还原试验和白细胞酯酶对细菌尿诊断和评价

尿亚硝酸盐还原试验和白细胞酯酶对细菌尿诊断和评价

李玉花

李玉花（吉林延边大学附属医院检验科吉林延吉133000）

【中图分类号】R446.12+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）19-0123-02

【摘要】临床诊断泌尿系统感染目前实验室以干化学白细胞酯酶试验(LeukocyteesteraseLE)和亚硝酸盐还原试验（NitreNit）作为筛查，以尿细菌培养作为金标准。但实际实验中60-80%尿培养结果阴性[1]、时间长、费用贵、增加细菌室的工作量。为了避免这些缺点、通过尿中检查Nit、LE和细菌培养进行比较。目的评价Nit、LE诊断细菌尿筛查中准确性和可信性。方法同时检查尿常规和尿细菌培养标本163例，标本取必须清洁的中段尿、晨尿，女性患者均要求清洗外阴部后留标本。用接种环尿接种到伊红美兰和血平皿，置350C18-24小时以后分通过尿中检查Nit、LE和细菌培养进行比较，离出纯细菌。结果根据Nit、LE选择性进行尿细菌培养，助于满足临床的需要。

【关键词】尿亚硝酸盐白细胞酯酶试验尿细菌培养

【Abstract】ObjectiveTheclinicaldiagnosisofurinarytractinfectioninthecurrentlaboratorydrychemicalleukocyteesterasetest(LeukocyteesteraseLE)andnitritereductiontest(NitreNit)asthescreeningofbacteriainurinecultureasthegoldstandard.However,theactualexperiment,theresultsofurineculturenegative60-80%[1],alongtime,costyou,increasetheworkloadofbacteria.Toavoidtheseshortcomings,byurineexaminationNit,LE,andbacterialculturetocompare,evaluateNit,LEdiagnosisofbacterialurinaryscreeningaccuracyandcredibility.Methods:Alsocheckurineandurinebacterialculturesamplesof163cases,samplestakenmustbeclean,midstreamurine,morningurine,femalepatientswererequiredtostayaftercleaningthevulvaspecimens.Ringvaccinationwereinoculatedwiththeurineandbloodeosinmethyleneblueplate,set350C18-24hoursaftertheisolationofpurebacterialResults:Nit,LEselectivityofurinebacterialculture,helptomeetclinicalneeds.

【Keywords】Urinarynitritebacterialcultureofurineleukocyteesterasetest

临床诊断泌尿系统感染目前实验室以干化学白细胞酯酶试验(LeukocyteesteraseLE)和亚硝酸盐还原试验（NitreNit）作为筛查，以尿细菌培养作为金标准。但实际实验中60-80%尿培养结果阴性[1]、时间长、费用贵、增加细菌室的工作量。为了避免这些缺点、通过尿中检查Nit、LE和细菌培养进行比较，评价Nit、LE诊断细菌尿筛查中准确性和可信性。同时检查尿常规和尿细菌培养标本163例，标本取必须清洁的中段尿、晨尿，女性患者均要求清洗外阴部后留标本。用接种环尿接种到伊红美兰和血平皿，置350C18-24小时以后分通过尿中检查Nit、LE和细菌培养进行比较，离出纯细菌，根据Nit、LE选择性进行尿细菌培养，助于满足临床的需要。

1实验对象和方法

1.1实验对象选择2007年1月至2008年2月在延边大学附属医院同时检查尿常规和尿细菌培养标本163例，标本取必须清洁的中段尿、晨尿，女性患者均要求清洗外阴部后留标本。用接种环尿接种到伊红美兰和血平皿，置350C18-24小时以后分离出纯细菌，根据革兰氏染色特点菌株选用BDPhoenixSystem-100（USA）进行鉴定。选用国产优利特800干化学分析仪和试剂条检查Nit、LE。

1.2结果判断细菌培养显示有意义细菌生长，且菌落计数革兰氏阳性球菌≥104CFU/Ml或革兰氏阴性杆菌≥105CFU/Ml为细菌培养阳性[2]。(当有2种致病菌生长时，选用菌落计数接近或≥104CFU/Ml的细菌为阳性统计菌，若有2种以上杂菌生长则被视为污染，重新送检)。为了明确尿培养和Nit、LE的相互关系，根据尿细菌培养阳性、Nit、LE求出敏感度、特异性、阴性预测值。

2结果

2.1泌尿系统感染的总体细菌分布163例尿细菌培养中，除11例（6.7%）有2种以上细菌生长视为污染，其余152例标本中分离出致病菌31例（20.4%），其中大肠埃希菌9例（29%）、铜绿假单胞菌6例（19.4%）、真菌4例（12.9%），其余分布如表1

表1尿培养阳性的细菌分布构成比

细菌种类感染菌株（%）

大肠埃希菌9（29）

铜绿假单胞菌6(19.4)

真菌4(12.9)

阴沟杆菌3(9.7)

克雷伯菌属2(6.5)

沙雷菌属2(6.5)

柠檬酸杆菌1（3.2）

肠杆菌属1（3.2）

葡萄球菌属3（9.7）

链球菌属1（3.2）

合计31（100）

2.2尿细菌培养和Nit、LE的相互关系

2.2.1尿细菌培养与Nit的关系152例尿培养中31例培养阳性标本中，Nit阳性11例，灵敏度35.5%；尿培养阴性、Nit阴性标本116例，特异性95.9%、阴性预测值85.3%。如表2

表2尿细菌培养与Nit相互关系

Nit尿培养

阳性阴性

阳性115

阴性20116

2.2.2尿细菌培养与LE的关系尿培养和LE两者同时阳性14例、灵敏度45.2%，两者阴性94例、特异性77.7%，阴性预测值84.7%。如表3

表3尿细菌培养与LE相互关系

LE尿培养

阳性阴性

阳性1427

阴性1794

2.2.3尿细菌培养与LE、Nit的关系尿培养与LE、Nit同时阳性的真阳性19例（61.39%）尿培养阴性9例，LE、Nit的真阴性90例（74.4%），阴性预测值88.2%。如表4

表4尿培养与LE、Nit的相互关系

Nit-LE尿培养

阳性阴性

阳性1931

阴性1290

2.2.4LE假阴性和假阳性分析在实际尿常规常发现LE结果与显微镜下沉渣不一致，即假阴性和假阳性。假阴性结果中PH＞6标本8例、其中RBC(+)标本6例，PH＜6标本5例。假阳性结果中RBC(+)标本16例、蛋白（+）1例、酮体（+）1例、尿糖（+）1例。

3讨论

由于传统的尿培养需要经过接种、菌落计数、纯培养、鉴定和药敏等步骤、时间长，即使是阳性报告也需要2天出报告。而且随着抗生素的广泛应用，细菌耐药性日趋严重，使临床需要有一种快速、简便、有效的方法诊断感染，从而有的放矢的治疗对阳性的快速诊断，可避免抗生素的滥用。我们以白细胞脂酶和亚硝酸盐还原试验作为快速筛查方法，而LE和Nit却存在准确性、特异性受干扰因素多等局限性。尿路感染是炎症这一病理过程，局部组织细胞的氧化Ⅰ抗氧化反应的必然增强，导致尿路感染患者尿液中出现较高含量的诱导型一氧化氮合酶、NADPH及细胞色素氧化酶等物质。Nit原理就是利用尿路感染患者尿液中这些物质含量增高与Nit反应呈色，达到筛查尿路感染的目的。表2可知Nit与尿培养阳性结果比较，特异性95.9%、灵敏度35.5%、阴性预测值85.3%。与文献报告基本一致[3]。这结果表明Nit实验用于尿路感染的筛查方法是可以接受的。本实验结果中尿培养阳性而Nit阴性20例结果中，Nit只能筛查出硝酸盐还原成亚硝酸盐的那一类的细菌，但是尿路感染不仅仅是此类细菌，还有不能将硝酸盐还原成亚硝酸盐的其它细菌（如场球菌和真菌）。并且Nit方法本身受过的的PH值、尿中过高的尿胆元等因素的干扰。LE只对含有此类酶的中性粒细胞呈阳性反应，而对不含此酶类的淋巴细胞、细菌呈阴性反应。本实验结果中LE诊断菌尿进行比较，灵敏度45.2%，特异性77.7%，阴性预测值84.7%。并有17例假阴性和27例假阳性结果。LE和Nit同时与尿培养比较，特异性74.4%、灵敏度61.3%、阴性预测值88.2%，提示我们比单独的检查LE或Nit阴性预测值和特异性高，因此我们一起并行检测LE和Nit，有助于筛查细菌尿。实际工作中为了快速诊断和减少经费，LE和Nit同时阴性标本，79.6%标本不依赖尿培养。7.9%假阴性的标本如果怀疑真菌或革染氏阳性标本，一定要依赖于尿培养。

参考文献

[1]FinegoldSM.BaronFJ:Diagnosticmicrobiology.7th.ed.st.Louis:mosby,1986:283-5.

[2]陈颧珠.实用内科学[M].第12版.北京：人民卫生出版社，2005：2217.

[3]PfallerMA,KoontzFP.Laboratoryevaluapionofleukocyteesteraseandnitritetestsforthedetectionofbacteriuria.JClinMicrobiol1985;21:840-2.